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抗人肝癌mAb HAb18F(ab′)_2半成品的制备与质量控制被引量：1: 2000年; 目的制备符合人用标准的抗人肝癌mAbHAb18F(ab′)2 片段。方法用胃蛋白酶消化经硫酸铵盐析的腹水抗体 ,然后在快速蛋白液相色谱(FPLC)上用Phenyl SepharoseHP疏水柱纯化并进行质检。结果经Phenyl SepharoseHP疏水柱纯化后 ,F(ab′)2 片段的纯度可达98.8% ;回收率大于50 % ;免疫活性为1∶8000;细菌、热原质检测均呈阴性。结论本制备工艺周期短、易于质控 ,适宜进行中试放大及半成品生产。; 余晓玲米力陈志南冯强; 关键词：抗人肝癌单克隆抗体

DMSO抑制杂交瘤增殖促进抗体的分泌: 2004年; 利用DMSO促进杂交瘤细胞分泌单克隆抗体 ,并对其作用机制进行了研究。结果表明在杂交瘤细胞对数生长后期添加 0 6 %浓度的DMSO与对照相比可提高抗体的产量 2倍 ;流式细胞仪检测细胞周期表明此时 83 7%的细胞处于G1期 ;免疫印记结果显示在有DMSO作用下杂交瘤细胞P2 7蛋白表达显著升高。因此 ,DMSO可通过促进P2 7蛋白的表达 ,抑制杂交瘤细胞的增殖 ,从而提高杂交瘤细胞分泌抗体的能力。; 王贤辉贺书云张阳徐静冯强李铃米力陈志南; 关键词：DMSO 杂交瘤细胞 P27

连续灌流培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体被引量：10: 2002年; Hybridoma cells were cultured by continuous perfusion in Fibra-Cel of 5L packed-bed bioreactor for 22 days in low serum or serum-free media.The corresponded amino acids were fed and serum concentration was decreased by analyzing glucose concentration, oxygen uptake rate, secretary antibody amount and amino acids concentration in culture supernatant. Comparing with continuous perfusion culture that amino acids were not fed, antibody amunt of production was increased about 2～3 times. The inoculated cell density was 2.5×10 5 cells/mL,while the final cell density was 8.79×10 8cells/mL. Antibody production was reached 295mg/L/d at average level, and the highest level was reached 532mg/L/d.These results provided a primary mode of enlarge culture for monoclonal antibody industrilization.; 米力李玲冯强余晓玲陈志南; 关键词：杂交瘤细胞单克隆抗体

^(99m)锝标记肝癌单克隆抗体HAb18及片段F(ab′)_2在小鼠体内的药代动力学研究被引量：2: 2000年; 目的　研究99m 锝标记肝癌单克隆抗体HAb18及其片段F(ab′) 2 在正常小鼠体内的药代动力学。方法　 4组小鼠经尾静脉分别注入 7.5MBq99mTc HAb18;0 .9MBq ,7.5MBq ,37MBq99mTc F(ab′) 2 ,在不同时间点测尾血的放射性计数。另取 18只小鼠尾静脉注入 7.5MBq99mTc F(ab′) 2 在不同点处死 ,测量各脏器放射性计数。结果　99mTc F(ab′) 2 ,99mTc HAb18的药代动力学均符合二室开放模型 ,二者在 7.5MBq剂量时有关的参数分别为t1 2 β(5 .3± 0 .4)h ,(15 .5± 1.4)h (P <0 .0 5 ) ;Vc(12 9.2± 2 3.7)μl·g- 1 ,(10 3 .5± 6 .8) μl·g- 1 (P >0 .0 5 ) ;CL(6 3.4± 12 .5 ) ,(10 .6± 1.3) μl·g·h- 1 (P <0 .0 1) ;AUC(0 .0 0 7± 0 .0 0 1) ,(0 .0 4± 0 .0 0 7)MBq·h·μl- 1 (P <0 .0 1)。结论　不同剂量的99mTc F(ab′) 2; 段旭东陈志南边惠洁文爱东冯强; 关键词：药代动力学 ^99M锝单克隆抗体

单克隆抗体F(ab’)_2片段的制备与质量控制被引量：5: 1999年; 本文在F(ab’) 2 片段抗体的制备工艺上 ,采用HPLC疏水色谱法 ,用高性能的疏水色谱柱 ,经 2次纯化后的F(ab’) 2 纯度可大于 98% ,回收率大于 5 0 % ,整个过程控制无菌无热原 ,纯化后产品经检定完全符合有关人用鼠源性单抗质量控制标准 ,适宜做大规模生产。; 米力陈志南余晓玲冯强边惠洁徐力青; 关键词：单克隆抗体检定

治疗性肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的质量控制被引量：1: 2005年; 目的进行治疗性肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的质量控制研究.方法用细胞计数、ELISA和FCM分别检测细胞生长、抗体生成速度和抗原结合活性;冻存细胞复苏后及体外传代3个月,检测抗体分泌稳定性和克隆阳性率;进行无菌检查、细胞核型和同工酶谱分析,了解细胞遗传稳定性、外源因子污染和细胞间交叉污染情况.结果肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的细胞生长和抗体生成速度分别为0.047～0.052/h和1.1～1.4 pg/cell·h,与靶细胞FHCC98结合的阳性率达99%,平均荧光强度在200以上.冻存细胞复苏后及体外连续传代3个月后,其特异性抗体生成速度维持在1.0 pg/cell·h以上,培养上清抗体效价仍为1:1000.不同批次的生成细胞核型均符合杂交瘤细胞特征,外源因子检查阴性,无细胞间交叉污染.结论HAb18生产用种子细胞的细胞生长和抗体生成速率、抗体稳定性和特异性均符合已建立的规模化放大培养的种子细胞质控标准.; 李玲米力刘蓉汪莉徐力青冯强田蓉陈志南; 关键词：单克隆抗体 HAB18 种子细胞细胞培养细胞生长

抗人肝癌单抗片段抗体HAb18 F(ab’)2的冻干工艺研究: 目前,大部分生物制品都依赖于冻干保存。尤其对于注射用治疗制品来说,冻干剂型既适于储存、运输,又适于临床应用,是理想的保存方法。但因为生物制品的组成结构千差万别,至今还没有形成一个普适的,公式化的冻干体系,冻干过程很容易使...; 冯强; 文献传递

抗人肝癌单抗片段抗体HAb18F(ab')_2的冻干工艺研究被引量：8: 2002年; 选择适合于HAb18F(ab')2片段抗体的冻干保护剂及其冻干工艺,是确保该生物制品的质量关键之一,对不同种类和不同浓度的保护剂进行了研究,结果表明10%蔗糖对HAb18F(ab')2片段抗体冻干样品的剂型、外观、残水量(<3%)、复溶时间(<10s)、纯度(>95%)及稳定性没有影响。研究优化与保护剂相结合的适用于HAb18F(ab')2片段抗体的最佳冻干工艺,为抗体片段扩大生产提供依据。; 冯强米力余晓玲黄子才陈志南; 关键词：冻干工艺

高效表达肝癌相关抗原HAb18G的CHO细胞株的建立被引量：6: 2001年; 目的　获得高效表达肝癌相关抗原 HAb18G的CHO细胞株。方法　构建含有肝癌相关抗原 HAb18G基因的真核表达载体并经限制性酶切及部分序列分析证明插入是否正确。用阳离子脂质体介导转染 CHO细胞经 G418筛选 ,稳定表达 ,间接免疫荧光染色证实蛋白表达情况。用有限稀释法将筛选的细胞进行单克隆化 ,通过流式细胞仪筛选高效表达株。结果　成功构建了真核表达载体 pc DNA- 3/HAb18G并经限制性酶切及部分序列分析证明基因插入正确。间接免疫荧光染色证实 :HAb18G高效表达于转染细胞的胞膜上。流式细胞仪筛选获得了 1株高效表达的 CHO细胞。结论　实验结果为; 邢金良陈志南米力李郁冯强; 关键词：肝肿瘤膜蛋白质类转染肿瘤细胞

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冯强