何菲
- 作品数：11 被引量：41H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市科技计划项目重庆市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乙酰化——炎症调控新方式被引量：6
- 2011年
- 组蛋白、核因子kB及促分裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1等可在相互拮抗的组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰化酶的催化下发生可逆性的乙酰化修饰,这一蛋白质翻译后修饰对炎症相关信号通路、转录因子乃至炎症相关基因构象有显著的调节作用,是影响炎症发生发展的重要调控方式。目前已发现乙酰化修饰的异常与炎症相关性疾病密切关联,而采用工具药干预乙酰化修饰可有效减轻炎症损伤。因而,调控乙酰化修饰成为炎症防治的新策略。
- 何菲刘娟张力
- 关键词：乙酰化炎症组蛋白乙酰转移酶组蛋白去乙酰化酶
- 睡眠剥夺上调小鼠胰腺TNF-α的表达被引量：6
- 2015年
- 目的探讨睡眠剥夺对小鼠胰腺形态、功能的影响以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)表达变化的病理意义。方法 C57雄性小鼠随机分为正常对照组,睡眠剥夺24 h、48 h和60 h组,观察各组小鼠的精神活动状态及体重变化;检测血清淀粉酶(serum amylase,AMS)水平;采用HE染色和免疫组织化学法观察各组小鼠胰腺的组织学特征及TNF-α表达情况;Western Blot检测TNF-α的表达水平。结果随睡眠剥夺时间的延长,模型组小鼠体重较正常对照组明显下降。AMS水平在睡眠剥夺24 h显著升高,48 h达到峰值后维持至60 h。HE染色可见睡眠剥夺组小鼠出现胰岛细胞排列紊乱、胞质浓缩、细胞间隙扩大;外分泌部细胞酶原颗粒消失,细胞空泡化等病理改变;免疫组化及免疫印迹显示,睡眠剥夺组小鼠胰腺中TNF-α的表达随剥夺时间的延长而明显上调。结论睡眠剥夺后不仅导致小鼠全身衰竭,并通过活化TNF-α而诱导胰腺的炎症反应,导致其形态和功能损伤。
- 刘丽君何菲郭珮王琦王琦冉建华
- 关键词：睡眠剥夺胰腺肿瘤坏死因子-Α
- 地塞米松对两种急性肝损伤模型小鼠的作用被引量：4
- 2011年
- 肝炎在我国发病极为普遍且种类较多、发病机制复杂。类固醇激素类药物具有强效的抗炎及免疫调节效应,是治疗严重肝病的常用药[1]。本实验复制了四氯化碳（Carbon tetrachloride,CCl4）及刀豆蛋白A（Concanavalin A,Con A）诱导的小鼠急性肝损伤模型,对比了地塞米松（dexamethasone,DXM）在两种肝损伤过程中的效应。
- 彭小蓉卢虹旭刘娟何菲黎桂菊谢军陈黎张力
- 关键词：急性肝损伤模型小鼠地塞米松免疫调节效应肝损伤模型肝损伤过程
- 高浓度尿素诱导人脑微血管内皮细胞系产生炎性因子被引量：5
- 2015年
- 目的研究高浓度尿素诱导人脑微血管内皮细胞系(HBMECs)产生炎性因子及其机制。方法以相同渗透压的甘露醇为对照,高浓度尿素(25 mmol/L)干预HBMECs 3、6、12和24 h后,免疫荧光法观察细胞内肿瘤坏死因子α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的表达。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TNF-α、i NOS、环氧合酶-2(cycloxygenase-2,COX-2)、核因子κB(NF-κB)/P65和p-P65的表达水平。一氧化氮(NO)试剂盒检测细胞NO含量。结果高浓度尿素增强细胞内TNF-α和i NOS表达。细胞TNF-α、COX-2和p-P65蛋白水平在3和6 h明显高于对照组(P<0.01);i NOS蛋白水平持续增高(P<0.01)。NO含量在3 h明显增多(P<0.05)。结论高浓度尿素诱导人脑微血管内皮细胞产生炎性因子。
- 王琦王弘凯刘丽君何菲汪克建李晋芳冉建华
- 关键词：人脑微血管内皮细胞肿瘤坏死因子Α一氧化氮核因子-ΚB
- 氰酸盐诱导人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤被引量：3
- 2017年
- 该研究探讨尿素水解产物氰酸盐(cyanate)对体外培养的血管内皮细胞氧化应激和功能障碍的作用。培养人脐静脉内皮细胞系(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),通过CCK8法检测氰酸盐对内皮细胞活力的影响;采用DCFH-DA法检测ROS水平;用比色法测定NO水平;分别用细胞免疫荧光和Western blot检测ICAM-1(intercelluar adhesion molecule-1)、e NOS(endothelial nitric oxide synthase)表达。氰酸盐呈浓度依赖性影响内皮细胞活力,与对照组相比,当氰酸盐浓度为1.00 mmol/L时,细胞活力受到明显抑制(P<0.05);与正常组和阴性对照组(甘露醇组)相比,氰酸盐诱导内皮细胞内ROS水平明显升高;NO水平明显减少(P<0.05)。免疫荧光结果显示,氰酸盐作用内皮细胞24 h后,ICAM-1荧光明显增强,e NOS明显减弱(P<0.05)。Western blot结果显示,内皮细胞内ICAM-1水平随氰酸盐浓度升高和负荷时间延长上调,而e NOS水平下调(P<0.05)。氰酸盐诱导血管内皮细胞氧化应激产生和功能障碍。
- 樊春华田宽何菲胡玲郭珮陈益熊伟周宏宇李静李晋芳冉建华
- 关键词：氰酸盐HUVECS氧化应激ROS
- 注射用核糖核酸Ⅱ上调p53诱导人白血病细胞凋亡被引量：8
- 2016年
- 目的研究注射用核糖核酸Ⅱ诱导人白血病细胞系K562和KG1a细胞凋亡的作用。方法以K562和KG1a细胞为研究对象,采用CCK-8法检测注射用核糖核酸Ⅱ对细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率的变化;Hoechst33258染色观察细胞核形态;免疫印迹技术检测p53及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3的表达。结果以100~300 mg·L^(-1)注射用核糖核酸Ⅱ处理K562和KG1a细胞12、24、48 h后,CCK-8检测结果显示K562和KG1a细胞的增殖降低,抑制率明显增高,并呈时间剂量依赖性;100、150、200mg·L^(-1)注射用核糖核酸Ⅱ处理K562和KG1a细胞24 h后,FCM结果显示细胞凋亡率随药物剂量增加而增高;Hoechst33258染色观察到细胞核出现染色质浓缩聚集、染色加深等凋亡指征;Western blot结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ上调p53、Bax和cleaved caspase-3的表达,下调Bcl-2表达。结论注射用核糖核酸Ⅱ通过上调p53,调控Bcl-2/Bax的表达,激活caspase-3诱导人白血病K562和KG1a细胞凋亡。
- 郭珮冉建华李静陈地龙杨宝学何菲熊伟石雪萍李海星
- 关键词：白血病P53K562细胞
- Phenylphthalazines化合物PU_(1424)的利尿作用分析被引量：1
- 2017年
- 目的检测Phenylphthalazines化合物PU_(1424)对大鼠的利尿作用,以及利尿后对电解质平衡、糖脂代谢及肝脏、肾脏功能的影响。方法以♂SD大鼠为研究对象,随机分为溶剂对照组、PU_(1424)组和氢氯噻嗪(hydrochlorothiazide,HCTZ)组,连续给药后每6 h收集尿液,末次给药后取血。采用冰点渗透仪检测大鼠尿液的渗透压;尿素检测试剂盒检测尿素水平;全自动生化仪分析尿液及血浆的离子水平、血糖、血脂和肝肾功能指标。结果 PU_(1424)和HCTZ分别增加大鼠尿量为对照组的1.52倍和1.78倍,降低尿渗透压为对照组的61.5%和50.4%,降低尿尿素浓度为对照组的57.1%和56.8%,饮水量增加为对照组的1.42倍和1.56倍。PU_(1424)和HCTZ的利尿作用降低了尿液中的电解质水平,但对血浆电解质平衡无明显影响。PU_(1424)组大鼠的血糖、血脂水平与溶剂对照组相比无明显差异,而HCTZ升高了血糖和总胆固醇。PU_(1424)和HCTZ对大鼠血清中尿素、肌酐水平无明显影响,PU_(1424)对大鼠血清中谷丙转氨酶/谷草转氨酶(谷丙/谷草)、碱性磷酸酶和总蛋白、白蛋白水平无明显影响,HCTZ可升高血清谷丙/谷草比值。结论新型利尿药候选化合物PU_(1424)利尿作用明显,且不影响机体的电解质平衡、血糖血脂水平和肝脏、肾脏功能。
- 郭珮冉建华李静何菲樊春华田宽
- 关键词：利尿药小分子抑制剂电解质平衡
- PKCβ/p66Shc介导高尿素引起的人脐静脉内皮细胞ROS的产生被引量：2
- 2016年
- 目的探讨PKCβ/p66Shc通路在高浓度尿素引起的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)产生中的作用。方法体外培养HUVECs,分为正常对照组、甘露醇组、尿素组和尿素+LY333531(PKCβ抑制剂)组。采用CCK8法检测高浓度尿素对细胞活性的影响,倒置显微镜观察细胞形态改变;DCFH-DA法检测细胞内ROS含量;Western blot检测细胞中p66Shc、p-p66Shc、PKCβ和p-PKCβ水平;免疫荧光技术观察细胞内p-p66Shc水平。结果 25mmol/L尿素明显抑制HUVECs活力,并引起细胞排列紊乱、细胞间隙增大、铺路石样排列结构受到破坏等形态学改变。与对照组相比,25mmol/L尿素引起细胞内ROS水平明显升高,在6h达到峰值;加入PKCβ抑制剂LY333531后ROS水平明显降低。Western blot结果显示,25mmol/L尿素诱导p66Shc、p-p66Shc、PKCβ和p-PKCβ水平随作用时间的延长而逐渐增加。25mmol/L尿素负荷6h后可见细胞胞质内p-p66Shc免疫反应性明显增强,LY333531可阻断该作用;Western blot检测也显示LY333531可显著抑制高浓度尿素对p-p66Shc水平的上调。结论 PKCβ/p66Shc信号通路是高浓度尿素诱导HUVECs内ROS产生的重要途径。
- 何菲樊春华郭珮王弘凯周宏宇陈益李晋芳冉建华
- 关键词：尿素人脐静脉内皮细胞活性氧簇
- PKCβ/p66Shc介导高水平尿素引起人脐静脉内皮细胞ROS和炎症的产生
- 心血管病（cardiovascular disease，CVDs）是终末期肾脏疾病(End Stage Renal Disease，ESRD)患者最常见的并发症以及最主要的死亡原因，其致死率比其它并发症高10～20倍[1...
- 何菲
- 关键词：活性氧簇尿素水平
- 文献传递
- 注射用核糖核酸Ⅱ通过活性氧介导的PI3K/Akt信号通路诱导人白血病细胞KG1a凋亡被引量：3
- 2019年
- 目的 研究注射用核糖核酸Ⅱ诱导人急性骨髓白血病细胞系KG1a细胞凋亡与PI3K/Akt信号通路和活性氧(ROS)的关系。方法 流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞内的ROS水平;免疫印迹法(Western blot)检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白p-PI3K、p-Akt、p-MDM2、p21和周期相关蛋白cyclin D1、CDK4的表达;加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)后,检测p-PI3K、p-Akt和p53蛋白表达变化。结果 FCM结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ可将KG1a细胞阻滞在G 0/G 1期,且ROS介导了细胞周期的阻滞;FCM检测ROS结果显示,KG1a细胞内ROS水平均随药物浓度增加而升高;Western blot结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ下调p-PI3K、p-Akt、p-MDM2和cyclin D1、CDK4的表达,上调p21的表达;与仅用注射用核糖核酸Ⅱ相比,经NAC预处理后再使用注射用核糖核酸Ⅱ,明显上调了磷酸化PI3K和Akt的表达,下调了p53的表达。结论 注射用核糖核酸Ⅱ通过ROS介导的PI3K/Akt信号通路,诱导人急性骨髓白血病细胞系KG1a细胞凋亡。
- 郭珮李静冉建华陈地龙何菲吕晓婷石雪萍李海星
- 关键词：白血病PI3K/AKT活性氧凋亡
