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黄利华

作品数:66 被引量:155H指数:6
供职机构:中南大学湘雅三医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省科技计划项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学一般工业技术农业科学更多>>

文献类型

  • 53篇期刊文章
  • 13篇会议论文

领域

  • 53篇医药卫生
  • 3篇生物学
  • 2篇一般工业技术
  • 1篇农业科学
  • 1篇理学

主题

  • 27篇细胞
  • 16篇基因
  • 14篇蛋白
  • 14篇多态
  • 13篇多态性
  • 13篇川崎
  • 13篇川崎病
  • 10篇基因多态性
  • 10篇HELA细胞
  • 9篇位点
  • 9篇病毒
  • 8篇柯萨奇
  • 8篇柯萨奇病毒
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  • 6篇位点多态性
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  • 6篇冠状
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机构

  • 65篇中南大学湘雅...
  • 9篇中南大学
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  • 1篇湖南省人民医...
  • 1篇浙江医院
  • 1篇湖南省儿童医...
  • 1篇海口市人民医...
  • 1篇岳阳市第二人...
  • 1篇湖南中医药大...
  • 1篇昆明医科大学
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作者

  • 66篇黄利华
  • 25篇杨作成
  • 16篇邢晓为
  • 15篇李卓颖
  • 10篇田朗
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  • 7篇余灿
  • 7篇伍勇
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  • 6篇黄志军
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  • 5篇陈佳
  • 5篇成亮
  • 5篇杨丽
  • 5篇朱红伟
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  • 4篇李霞

传媒

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  • 1篇中国药学杂志

年份

  • 1篇2024
  • 1篇2023
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  • 1篇2021
  • 1篇2020
  • 2篇2019
  • 5篇2018
  • 3篇2017
  • 4篇2016
  • 5篇2015
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  • 17篇2013
  • 8篇2012
  • 5篇2011
  • 5篇2010
66 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
类风湿关节炎患者外周血白细胞介素-32的表达和临床意义研究
检测类风湿关节炎(RA)患者外周血白细胞介素(IL)-32、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平,同时分析其与C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、类风湿因子(RF)和DAS28的关系,初步探讨IL-32在RA的...
桂明张浩黄利华李英李杨
人睾丸蛋白SPAG4L与KASH结构域蛋白Nesprin-3的相互作用
2017年
目的探讨含SUN(Sad,UNC-84)结构域的人睾丸蛋白SPAG4L(sperm-associated antigen 4 like)与具有KASH(Klarsicht,ANC-1 and Syne homology)结构域的核膜血影重复蛋白3(nuclear envelop spectrin repeat proteins 3,Nesprin-3)之间的相互作用。方法用生物信息学方法对SPAG4L蛋白进行分析,通过体外转染实验,观察SPAG4L的亚细胞定位;并用免疫荧光技术、免疫共沉淀和双分子荧光互补实验检测SPAG4L是否与KASH结构域蛋白Nesprin-3存在相互作用。结果生物信息学分析结果表明,SPAG4L蛋白具有跨膜结构;亚细胞定位结果发现,SPAG4L蛋白定位于核膜和胞浆;免疫荧光、免疫共沉淀和双分子荧光互补实验结果表明,SPAG4L蛋白与Nesprin-3蛋白质相互作用,形成LINC(linkers of the nucleoskeleton to the cytoskeleton)复合物。结论 SPAG4L与Nesprin-3能够相互作用,形成LINC复合物,对了解SPAG4L蛋白在精子发生中的作用具有重要的意义。
任瑶伍勇黄利华邢晓为
关键词:相互作用精子发生
小鼠高迁移率族蛋白B1基因短发卡RNA的构建及干扰效果检测
2015年
目的 构建有效靶向小鼠高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)基因的短发卡RNA(shRNA)载体.方法 针对小鼠HMGB1序列设计4条HMGB1干扰序列的shRNA载体:pYr-1.1-musHMGB1-sh1~4以及与哺乳动物基因组无同源性序列的shRNA作为对照(NC)组,Xho Ⅰ酶切鉴定其序列.然后利用质粒转染小鼠肝癌细胞株Hepal-6,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测干扰效率.结果 经酶切凝胶电泳证实shRNA构建正确;质粒筛选结果表明,转染48h后,pYr-1.1-musHMGB1-sh1~4及NC组的荧光表达率为85%、78%、75%、70%、60%;FQ-PCR显示pYr-1.1-musHMGB1-sh1~4组及NC组转染Hepal-6细胞48h后相对表达量分别为0.52±0.05、0.59±0.08、0.61±0.08、0.57±0.21、1.02±0.21.结论 成功构建表达靶向HMGB1的4条shRNA重组质粒载体,其中pYr-1.1-musHMGB1-sh1质粒对HMGB1基因的抑制作用最强,为研究HMGB1的功能提供实验基础.
朱红伟李志强黄利华余枭
关键词:高迁移率族蛋白B1RNA干扰
SOD1真核表达载体的构建及表达被引量:1
2010年
目的:构建人铜锌超氧化物歧化酶(SOD1)基因真核表达载体,并在HeLa细胞中进行表达。方法:应用RT-PCR从人外周血中扩增SOD1基因开放阅读框(ORF),采用TA克隆技术,将目的片段插入到pUCm-T载体中进行鉴定,重组的质粒命名为pUCm-T-SOD1。随后,将SOD1进一步克隆到真核表达载体pTracer-CMV/Bsd中。用脂质体将经过测序、验证的重组pTracer-CMV/Bsd-SOD1质粒转染HeLa细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,转染HeLa细胞,经杀稻瘟菌素(Blasticidin)筛选4周,用RT-PCR、Western blot检测SOD1的表达。结果:成功构建了pTracer-CMV/Bsd-SOD1真核表达质粒,转染HeLa细胞,发现转染成功的细胞均发绿色荧光;RT-PCR及Western blot检测结果表明,所转染的SOD1在HeLa细胞中成功表达。结论:成功构建了能够同时表达绿色荧光蛋白和SOD1的真核表达质粒pTracer-CMV/Bsd-SOD1,为进一步研究SOD1在基因治疗中的作用奠定了基础。
吴雄辉孙虹邢晓为黄利华
关键词:铜锌超氧化物歧化酶基因转染基因表达基因治疗
Binding tendency with oligonucleotides and cell toxicity of cetyltrimethyl ammonium bromide-coated single-walled carbon nanotubes被引量:2
2011年
Functionalized carbon nanotubes (CNTs) were made for the delivery of genes and drugs and CNT-based biosensors. The basis of CNTs is for binding with biomolecules in biomedical applications. The binding tendency with small interfering RNA oligonucleotides and cytotoxicity of cetyltrimethyl ammonium bromide (CTAB)-coated single-walled carbon nanotubes (SWNTs) were studied. The field emission scanning electron microscopy and transmission electron microscopy results show that a SWNT suspension in CTAB solution was well-dispersed and stable. CTAB is the cross-linker between SWNTs and oligonucleotides. The CTAB-coated SWNTs have less cytotoxicity to human umbilical vein endothelial cells than single SWNTs and the cytotoxicity of CTAB-coated SWNTs depended on the concentration of CTAB-coated SWNTs.
阎雪彬谷永红黄东甘丽邬力翔黄利华陈哲东黄苏萍周科朝
关键词:OLIGONUCLEOTIDESCYTOTOXICITY
自噬与高迁移率族蛋白B1在急性胰腺炎损伤中的作用
2012年
急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是临床上常见急腹症之一,其中重型急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)一直是临床上治疗的难点和挑战。虽然近年随着对重型急性胰腺炎发病机制的进一步认识,以及'个体化治疗方案'和'综合治疗体系'的应用使得重型急性胰腺炎生存率明显提高,
余灿黄利华余枭
关键词:重型急性胰腺炎自噬胰蛋白酶原胰腺腺泡细胞雨蛙肽溶酶体酶
中国儿童内皮细胞蛋白C受体基因多态性与川崎病易感性的关系(英文)被引量:6
2019年
目的:调查中国儿童人群内皮细胞蛋白C受体(endothelial protein C receptor,EPCR)基因的单核苷酸多态性是否与川崎病(Kawasaki disease,KD)相关。方法:招募103名KD患者(其中23名患者出现冠状动脉病变)和158名对照组。选择EPCR基因的7个标记单核苷酸多态性(rs6088738,rs2069940,rs2069945,rs2069952,rs867186,rs9574和rs1415774)进行TaqMan等位基因鉴别分析。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测53名KD和52名健康儿童血浆可溶性EPCR(soluble EPCR,sEPCR)水平。结果:rs2069952,rs9574,rs1415774与KD的发生显著相关,但与冠状动脉病变的发生无关。具有rs2069952,rs9574,rs1415774和rs2069945单核苷酸多态性的男性比女性具有更大的KD风险。KD患儿血浆sEPCR水平不能预测冠状动脉病变的形成,而KD患者rs867186等位基因G与血浆sEPCR水平升高有关。结论:中国汉族儿童EPCR的单核苷酸多态性与KD易感性有关。
李卓颖江杰黄利华戴红梅陈佳蔡骞杨作成
关键词:川崎病内皮细胞蛋白C受体冠状动脉病变
带Myc、His标签的SPAG4L真核表达载体的构建与表达被引量:4
2013年
为了获得带有His、Myc双标签的SPAG4L蛋白,建立能够稳定表达该蛋白的细胞系,本研究利用PCR技术从人睾丸cDNA中扩增SPAG4L开放阅读框,构建到pcDNA3.1(+)myc-his真核表达载体中进行测序和双酶切验证。将pcDNA3.1/myc-His(-)A/SPAG4L质粒和空白载体分别转染HeLa细胞,G418筛选后建立稳定转染细胞系。用Western blotting和免疫荧光技术对新建立的稳定转染细胞系进行检测。结果表明,成功扩增了SPAG4L基因,构建到pcDNA3.1/myc-His(-)A真核表达载体后,经酶切和测序验证所插入的SPAG4L序列完全正确;pcDNA3.1/myc-His(-)A/SPAG4L转染HeLa细胞后,经G418筛选后建立了稳定转染细胞系。Western blotting检测后发现,新建立的细胞系能够正确表达SPAG4L及其标签蛋白,进一步的免疫荧光实验发现,SPAG4L能够和内质网标签蛋白PDI共定位。研究结果所提供的稳定转染细胞系将为下一步进行免疫共沉淀和pull-down实验提供了有力的工具。
陈颜亮郑治王剑龙周晓哲李艳杨梦黄利华邢晓为
关键词:标签转染真核表达蛋白功能
TRAF1基因干扰质粒的构建及其对胃癌细胞生物学功能的影响
2012年
目的:构建TRAF1基因干扰重组质粒及建立TRAF1基因干扰瞬时转染胃癌细胞模型,然后通过干扰目标胃癌细胞中的TRAF1基因来检测TRAF1对胃癌细胞的生物学功能的影响。方法:首先通过rea1—tin1ePCR和Western印迹验证TRAF1在胃癌细胞系BGC823,SGC7901,MGC803中的表达,筛选出TRAF1表达量最高的一株细胞作为干扰转染的目标细胞;设计及构建3个TRAF1的shRNA表达载体pLVX-shRNA-TRAF1.shRNA1~3,将其分别转染至目标胃癌细胞系中,应用rea1.timePCR和Western印迹筛选出干扰效率最强的shRNA,最后通过MTF及流式细胞术检测TRAF1对胃癌细胞凋亡能力的影响,通过Transwe11小室迁移实验来检测对其迁移功能的影响。结果:与GES.1比较,TRAF1基因在BGC823,SGC7901,MGC803中的表达均有上调(P〈O.05),其中以BGC823表达最高;3个TRAF1shRNA对TRAF1基因均有抑制作用,以pLVX-shRNA-TRAF1-shRNA2干扰效果最强;干扰胃癌细胞BGC823中的TRAF1可使细胞生长活力减弱,凋亡明显增加,但对其迁移功能无明显影响。结论:TRAF1基因在胃癌细胞系BGC823中上调最明显;pLVX-shRNA-TRAF1.shRNA2可成功干扰BGC823中TRAF1的表达;TRAF1可抑制BGC823细胞的凋亡。
王芬杨燕冯茜步光奎黄利华闾宏伟郭勤徐灿霞沈守荣
关键词:TRAF1胃癌细胞系
miR-181a基因rs77418916位点多态性与川崎病的关联性研究被引量:2
2021年
目的:观察miR-181a基因rs77418916位点多态性与川崎病(KD)及其并发冠状动脉损伤(CAL)的关联性。方法:选取100名KD患儿和100名健康儿童外周血标本,提取DNA,使用聚合酶链反应-直接测序法(PCR-SBT)技术检测miR-181a基因rs77418916位点的多态性。结果:miR-181a基因rs77418916位点的AA、AT、TT基因型分布和A、T等位基因频率在KD组与对照组间,及川崎病合并冠状动脉损伤组(KD-CAL)组与川崎病无冠状动脉损伤组(KD-NCAL)组间的差异无统计学意义。结论:miR-181a基因rs77418916位点多态性与KD发病及其CAL的发生均无明显关联性。
姚美清余梦吴吉平黄利华杨作成
关键词:川崎病基因多态性
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