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TNFR1特异性肽配基的筛选及其生物学功能研究: 该研究拟以可溶性TNFR1为靶标,采用噬菌体多肽展示技术,寻找与TNF受体特异性结合的肽类配基,通过结构和活性分析,确定TNF受体结合肽的结构模式,期望以此为基础获得TNF受体拮抗剂的先导化合物.我们利用BAC-TO-B...; 高波; 关键词：生物学功能 TNFR 噬菌体展示肽库结合肽; 文献传递

一种基于昆虫防御素的构象型肽库、其构建方法和应用: 本发明公开了一种新型构象型噬菌体随机展示肽库。该肽库以昆虫防御素C末端的一段区域为基本的蛋白骨架，在保持其天然构象的基础上引进随机区，构建具有简单二级结构的随机肽库。这一类肽库因其分子量小，可溶性好，随机区突出于分子表面...; 赵安薛沿宁张杰高波郑莉王会信; 文献传递

大肠杆菌CM/PDT抗反馈抑制突变体的构建及其性质: 2002年; 为了获得具有高催化活性且抗反馈抑制的大肠杆菌分支酸变位酶预苯酸脱水酶 (chorismatemutase prephenatedehydrataseCM PDT) [EC5 .4 .99.5 EC4 .2 .1.5 1],通过相关菌种CM PDT氨基酸序列同源比较 ,寻找高度保守位点 .用定点突变及PCR法构建突变酶M1(缺失 30 4T、30 5G、Q30 6K)、M2 (缺失W 338)、M3(缺失 30 1～ 386位氨基酸 )、M32 9(E32 9A)和M374 (C374A) ,野生型及各突变型基因与pET2 8a(+ )载体连接后 ,表达融合蛋白 .在非变性条件下 ,由TALON金属螯合亲和层析柱纯化野生型和突变体的酶蛋白 .酶活性测定表明 ,突变体M3的PDT活性下降为野生型活性的 2 9% ,但保持了CM活性 .突变体M374保持了CM ,PDT两种酶的活性 ,突变体M1、M2、M32 9的CM ,PDT活性有一定程度的提高 .酶抗反馈抑制作用检测表明 ,突变体M3、M374解除了苯丙氨酸的反馈抑制作用 ,M1、M2、M32 9部分解除了苯丙氨酸的反馈抑制作用 .与含野生型pheA基因的E .coliBL2 1菌株相比 ,含突变基因的E .coliBL2 1菌株对 10mmol L的苯丙氨酸代谢类似物具有强的抗反馈抑制作用 ,其中M1,M2 ,M3对 2 0mmol; 刘云王世春张学清刘志红高波徐琪寿

肿瘤坏死因子－α受体的亲和肽及其应用: 本发明公开了一种肿瘤坏死因子-α受体亲和肽，它的氨基酸残基具有以下通式：A-B-C-E-F-G-H-I-J-K-L，其中，A、C均代表芳香族氨基酸；B代表组氨酸；E代表色氨酸；F代表芳香族氨基酸或含羟基氨基酸；G、H、I...; 薛沿宁高波张杰郑莉赵安王会信; 文献传递

从噬菌体肽库中筛选生长因子模拟肽的研究进展被引量：1: 2002年; 生长因子通过膜受体可将胞外信号转导至胞内 ,现已发现一些小分子肽能够作为受体的配体模拟天然配体的生物学作用。以可溶性受体的纯化蛋白或转染了膜受体的完整细胞为靶标 ,人们从噬菌体肽库中筛选出多种模拟肽 ,对这些肽的序列和生物学功能进行分析 ,发现它们能够竞争受体与天然配体相结合 ,可作为生长因子受体的拮抗剂或激动剂。噬菌体展示技术的应用不仅为生物大分子间的结构和功能关系提供信息 ,而且为新药的研究提供了新思路。本文对从噬菌体肽库中筛选生长因子受体肽类拮抗剂或激动剂的研究进展作一综述。; 高波张迎辉薛沿宁; 关键词：噬菌体肽库模拟肽受体

人截断型LBP基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建被引量：1: 2001年; 目的　构建人N端截断型脂多糖结合蛋白 (tLBP)基因的杆状病毒表达载体 ,为后续的蛋白表达及其抗内毒素保护作用研究奠定基础。方法　采用PCR技术从人全长LBP基因cDNA中扩增长度为 6 95bp的基因片段 ,经pGEM T载体亚克隆筛选和序列分析后 ,应用Bac To Bac杆状病毒表达系统 ,基因重组和外源基因转座分别构建转移质粒pFASTBACtLBP和穿梭质粒pBacmidtLBP。结果　经PCR、琼脂糖凝胶电泳、酶切分析及序列测定 ,所克隆的基因片段为 70 0bp左右的tLBP ,并证实其目的基因重组载体发生了特异转座和病毒重组。结论　本实验成功克隆了tLBP目的基因片段并构建其杆状病毒表达载体。; 王晓东刘友生张杰高波薛沿宁; 关键词：基因克隆杆状病毒

肿瘤坏死因子受体的亲和肽及其应用: 本发明公开了一种肿瘤坏死因子受体亲和肽，它的氨基酸残基具有以下通式：A－B－C－E－F－G－H－I－J－K－L，其中，A、C均代表芳香族氨基酸；B代表组氨酸；E代表色氨酸；F代表芳香族氨基酸或含羟基氨基酸；G、H、I、J...; 薛沿宁高波张杰郑莉赵安王会信; 文献传递

重组人肿瘤坏死因子α抑制肽-抗炎酸性尾巴融合蛋白的生物学活性检测: 2012年; 目的:评价原核表达、纯化的6×His-硫氧还蛋白(TRX)-人肿瘤坏死因子α(TNFα)抑制肽-C端抗炎酸性尾巴融合蛋白的生物学功能。方法:在大肠杆菌中分别表达带His标签的TRX对照蛋白及TRX蛋白融合的人TNFα抑制肽-抗炎酸性尾巴融合蛋白,并对2种蛋白进行N2+金属螯合层析纯化,采用MTT法检测纯化后的蛋白及化学合成多肽抑制TNFα标准品对L929细胞的细胞毒活性。结果:与对照蛋白相比,融合蛋白人TNFα抑制肽-C端抗炎酸性尾巴及合成多肽均能拮抗TNFα标准品对L929细胞的细胞毒作用。结论:融合蛋白人TNFα抑制肽-C端抗炎酸性尾巴及合成肽均能有效拮抗TNFα的生物学作用,为今后发展抑制TNFα为主的抗炎生物药物奠定了基础。; 王玮丁红梅李慧赵强李洁夏伟苏雪婷陈颖黄皑雪高波李少华邵宁生; 关键词：人肿瘤坏死因子Α 融合蛋白细胞毒作用

sTNFR1在昆虫细胞中的表达及鉴定被引量：3: 2002年; 目的 :研究可溶性肿瘤坏死因子受体 (solubleTNFαreceptor1,sTNFR1)在昆虫细胞中的表达。方法 :应用BAC_TO_BAC杆状病毒表达系统 ,构建含有sTNFR1基因的杆状病毒穿梭载体Bacmid ,转染sf2 1昆虫细胞进行高效表达 ,利用TALON金属鏊合层析进行重组蛋白的纯化。免疫印迹和细胞测活方法鉴定重组sTNFR1的生物学活性。结果 :从无血清培养上清中可纯化得到约 3mg L的重组蛋白。免疫印迹反应和细胞活性实验表明 ,重组蛋白具有良好的抗原结合能力和抑制TNF对L92 9细胞的细胞毒作用。结论 :重组sTNFR1在昆虫细胞中表达稳定 ,易于纯化。; 高波张杰刘云王会信薛沿宁; 关键词：肿瘤坏死因子受体1 杆状病毒昆虫细胞炎症反应生物学活性

肿瘤坏死因子拮抗肽及其应用: 本发明公开了一组肿瘤坏死因子拮抗肽，它们具有下述通式氨基酸序列：X1-X2-X3-X4-His-X6-Glu-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14，式中X1、X2、X3、X4、X10、X11、X13、X14...; 张杰薛沿宁郑莉赵安高波王会信; 文献传递

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高波