陈蕤
- 作品数：48 被引量：128H指数：5
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：陕西省科学技术研究发展计划项目国家自然科学基金西京医院学科助推计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- 供者淋巴细胞输注治疗白血病的研究进展被引量：3
- 2004年
- 陈蕤张献清
- 关键词：供者淋巴细胞输注白血病
- 外周导入中心静脉置管及其护理被引量：48
- 1997年
- 外周导入中心静脉置管及其护理第四军医大学西京医院（西安７１００３２）陈蕤外周导入中心静脉置管（ＰＩＣＣ）是一类从肘窝静脉插入且其末端位于上腔静脉（ＳＶＣ）远端的深静脉导管。从１９９２年德国医生Ｆｏｒｓｓｒｎａｎｎ在Ｘ线辅助定位下成功地完成第１例导管置...
- 陈蕤
- 关键词：中心静脉置管护理
- 天花粉蛋白突变体TCS_(KR173-174CG)的构建、表达与纯化被引量：5
- 2006年
- 目的构建天花粉蛋白(TCS)突变体基因,并进行表达及纯化。方法应用计算机预测TCS分子上可能的抗原决定簇,并进行定点突变。以栝楼基因组DNA为模板,经PCR扩增突变基因,与pRSET-A表达载体连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并对表达产物进行Ni-NTA层析纯化。结果目的蛋白在大肠杆菌中获得高效可溶性表达,表达产物经纯化后,得到均一的TCS突变体蛋白。结论已成功构建了TCS突变体基因,并获得高效表达。
- 安群星穆士杰张献清陈蕤夏爱军张清平陈晨雷迎峰黎志东徐志凯
- 关键词：天花粉蛋白定点突变原核表达
- 空勤病员的心理问题分析及调控方法被引量：1
- 1999年
- 肖玮苗丹民陈蕤
- 关键词：心理问题心理护理心理调控
- 天花粉蛋白的定点突变及聚乙二醇修饰
- 2008年
- 目的对天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)进行定点突变及聚乙二醇(PEG)修饰,并对修饰产物进行DNA酶活性分析。方法选择TCS分子上可能的抗原决定簇位点(YFF81-83和KR173-174)进行定点突变,将所构建的两个突变体(TCSYFF81-83ACS和TCSKR173-174CG)在大肠杆菌中表达,并纯化表达产物。通过第82位和173位引入的半胱氨酸残基,分别对突变体蛋白进行PEG定点修饰。通过与突变型TCS比较,分析两个PEG修饰型TCS的DNA酶活性。结果突变的TCS经酶切鉴定及测序分析,证明质粒构建正确,表达的目的蛋白相对分子质量约为30000,经PEG修饰后,相对分子质量约为40000。初步分析显示,与突变型TCS相比,所构建的两个PEG修饰型TCS也显示出类似DNA酶活性。结论成功进行了TCS的定点突变及PEG修饰,为基因工程及化学修饰方法改造TCS提供了一条可行的途径。
- 安群星雷迎峰穆士杰张献清陈蕤夏爱军陈晨易静吴原茹徐志凯
- 关键词：天花粉蛋白定点突变聚乙二醇修饰
- 表达CCR5Delta32基因对人外周血单核细胞增殖功能的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:在人外周血单核细胞(PBMC)内表达CCR5Delta32基因,研究是否对该细胞增殖功能产生影响。方法:构建pLenti-CCR5Delta32慢病毒载体,包装后产生重组慢病毒,将其转染PBMC,荧光显微镜观察转染情况,Westernblot鉴定目的蛋白的表达;分别用植物血凝素(PHA)及破伤风类毒素(TTD)刺激培养经转染的靶细胞,采用MTT比色法测定其增殖功能是否受影响。结果:构建了pLenti-CCR5Delta32慢病毒载体,经包装后产生重组慢病毒,滴度约为5×105TU/mL。将其转染PBMC,观察到约半数PBMC胞浆内有绿色荧光蛋白表达,经Westernblot进一步鉴定为目的蛋白;转染的靶细胞经PHA或TTD刺激培养后,有着与正常PBMC相似的增殖功能。结论:构建了重组慢病毒并将其转染PBMC靶细胞,为获得性免疫缺陷综合征的基因治疗研究奠定了基础。
- 安群星穆士杰张献清陈蕤易静余瑞
- 关键词：慢病毒载体外周血单核细胞人类免疫缺陷病毒
- 含人CCR5Delta32基因重组慢病毒的包装及滴度测定被引量：1
- 2007年
- 目的:包装含人CCR5Delta32基因的重组慢病毒并测定其滴度,用于获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的基因治疗研究。方法:从CCR5Delta32突变个体外周血单个核细胞(PBMC)中提取人基因组DNA,利用PCR技术扩增CCR5Delta32全长基因,经EcoRⅠ单酶切后与pUCm-T载体连接,随后转化E.coli DH5α,提取质粒进行酶切鉴定及DNA测序;将鉴定正确的CCR5Delta32基因亚克隆至慢病毒载体pLenti6/V5-D-TOPO并进行酶切鉴定及DNA序列分析;用pLP1、pLP2、pLP/VSVG及pLenti-CCR5Delta32等4种质粒共转染293T细胞,产生重组慢病毒并测定其滴度。结果:克隆出人CCR5Delta32基因,并构建了含该基因的重组慢病毒载体,经293T细胞包装后产生5×105 TU/mL的重组慢病毒。结论:高滴度含人CCR5Delta32基因重组慢病毒的包装,为进一步的AIDS基因治疗研究奠定了基础。
- 安群星穆士杰张献清陈蕤夏爱军
- 关键词：慢病毒载体滴度测定人免疫缺陷病毒获得性免疫缺陷综合征
- 聚乙二醇修饰前后天花粉蛋白性质的比较研究被引量：1
- 2008年
- 目的对天花粉蛋白（TCS）进行定点突变、聚乙二醇（PEG）修饰，并将修饰前后TCS的诸多性质加以比较。方法选择TCS分子上可能的抗原决定簇位点YFF81-83进行定点突变，并将所构建的突变体TCSYFF81-83 ACS在大肠杆菌中表达及纯化。随后通过该突变体第82位刚引入的半胱氨酸残基进行PEG定点修饰。通过比较研究，分析所构建PEG修饰型TCS的DNA酶活性、致核糖体失活活性、免疫原性、急性毒性以及药代动力学性质。结果所构建的突变型TCS其活性与野生型TCS（wTCS）活性几乎相当，而免疫原性已显著降低。PEG修饰型TCS虽有活性下降，但其免疫原性比wTCS低（P〈0．05），急性毒性比wTCS低，LD50值约为wTCS的1．8倍（P〈0．05），血液内平均滞留时间和半衰期明显长于wTCS（P〈0．05）。结论通过基因工程及化学修饰方法改造TCS是可行的，所构建的突变型及PEG修饰型TCS值得进一步研究。
- 安群星雷迎峰穆士杰张献清陈蕤夏爱军陈晨易静吴原茹余瑞徐志凯
- 关键词：聚乙烯二醇类药代动力学HIV
- 人乳头瘤病毒16型L1 N-端主要抗原基因的原核表达
- 2005年
- 目的 获得序列正确的人乳头瘤病毒 (HPV) 16型L1N -端主要抗原基因 ,构建其原核表达载体 ,并进行诱导表达。方法 采用PCR法从宫颈癌组织中获得HPV16型L1N 端主要基因重组表达质粒 ,转化E .coliDH5α ,4 2℃诱导表达 ,Westernblot分析表达产物。结果 获得了序列正确的人乳头瘤病毒HPV16型L1N -端主要基因 ,相对分子质量约为 5 10 0 0。表达蛋白能与乳头瘤病毒抗体及乳头瘤病毒感染患者的血清发生抗原抗体反应。结论 已成功构建HPV16型L1N -端主要基因表达载体 ,并获得有效表达。
- 陈蕤穆士杰张菊阎小君
- 关键词：HPV16抗原基因人乳头瘤病毒16型DH5Α原核表达载体基因表达载体
- 陕西省不同肝炎患者及献血者中SENV-H DNA的检测被引量：1
- 2006年
- 目的探讨SEN病毒H亚型在陕西省不同肝炎患者和献血者中的感染情况。方法采用巢式聚合酶链反应方法对收集的健康献血者和各型肝炎患者的血样(包括甲肝、乙肝、丙肝和非甲-非戊型肝炎患者)共计754份,进行SENV-H亚型DNA检测。结果SENV-H感染率在无偿献血者中为24.4%,在急性甲肝、慢性乙肝、慢性丙肝和非甲-非戊型肝炎患者中分别为32.7%、45.2%、65.0%和43.9%。结论SENV与HCV等经血传播病毒有相似的传播途径。
- 陈蕤穆士杰李丁张献清
- 关键词：流行病学巢式聚合酶链反应
