陆萍
- 作品数：14 被引量：65H指数：5
- 供职机构：安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家级星火计划安徽省高等学校省级质量工程项目长三角科技联合攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生核科学技术更多>>
- 某猪场腹泻仔猪沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验
- 针对安徽某猪场仔猪腹泻病例,分别采集5头不同窝的肛拭子和肠道内容物样品,利用常规法结合PCR技术进行沙门氏菌的分离鉴定,玻片凝集试验和ERIC-PCR技术确定分离株的血清型与基因型,标准K-B纸片法进行20种抗生素敏感试...
- 姚明黄晓慧陆萍焦安心孙裴魏建忠李郁
- 关键词：腹泻仔猪沙门氏菌血清型基因型药敏试验
- 文献传递
- 猪丹毒丝菌SpaA基因原核表达及表达蛋白质的免疫原性分析被引量：9
- 2017年
- 旨在克隆表达猪丹毒丝菌SpaA蛋白,分析其免疫原性,为猪丹毒新型疫苗的研发奠定基础。运用PCR扩增SpaA基因,连接至pGEX-6P-1载体,将阳性重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导表达,SDSPAGE分析表达产物,GST亲和层析纯化融合蛋白质,Western blot鉴定;纯化SpaA蛋白免疫小鼠,间接ELISA检测血清中IgG和Th1、Th2相关细胞因子;不同致病力猪丹毒丝菌攻击免疫小鼠,观察病理组织变化及其免疫保护率。结果显示,猪丹毒丝菌SpaA基因在大肠杆菌中实现表达,获得大小为75ku的纯化目的蛋白质。该蛋白质能特异性识别猪丹毒丝菌抗血清,可诱导小鼠产生较高水平的特异性抗体IgG,并使TNF-β、IFN-γ、IL-5、IL-10含量显著升高,对攻毒菌的免疫保护率均为100%,病理组织变化与攻毒对照组之间差异明显。可见成功获得的重组SpaA蛋白具有良好的免疫原性,能激发机体的体液免疫和细胞免疫,产生较强的免疫保护力,可以作为研发猪丹毒亚单位疫苗的候选抗原。
- 姚焱彬陆萍杨志鹏魏建忠孙裴李郁
- 关键词：原核表达免疫原性免疫保护力
- 猪丹毒杆菌安徽分离株的生物学特性分析
- 引言猪丹毒是由猪丹毒杆菌(Erysipelothrix husiopathiae)引起的一种人畜共患传染病。20世纪80、90年代,猪丹毒与猪瘟、猪肺疫并称为中国养猪业的三大传染病。之后随着养猪业规模化的发展,猪丹毒逐渐...
- 陆萍魏文涛李恩孙裴魏建忠李郁
- 碳离子辐照对猪链球菌部分生物学特性的影响
- 2015年
- 为了解30 Gy和50 Gy 12C6+离子辐照对猪链球菌部分生物学特性的影响,采用微生物学法和毒理学法检测亲本株和突变株的溶血性、对18种抗生素的敏感性、生物被膜形成能力、表面疏水性及毒力。结果显示,与亲本株相比,30 Gy突变株的溶血性、对抗生素的敏感性、生物被膜形成能力,表面疏水性及毒力无显著差异(p≥0.05);50 Gy突变株对庆大霉素、复方新诺明、链霉素、甲氧苄啶和洁霉素的敏感性差异显著(p≤0.05),但溶血性、生物被膜形成能力、表面疏水性及毒力无显著差异(p≥0.05)。结果表明,30 Gy 12C6+离子辐照不能导致猪链球菌生物学特性显著改变,而50 Gy 12C6+离子辐照猪链球菌能够导致部分突变株对部分抗生素敏感性的显著改变,但不同突变株对不同种类抗生素的敏感性改变不同。
- 陆萍焦安心常沛玺胡步荣付谦孙裴魏建忠李郁
- 关键词：碳离子辐照猪链球菌生物学特性
- 猪红斑丹毒丝菌制苗用菌株的筛选被引量：5
- 2018年
- 为筛选出致病力强、抗原性优良、遗传性状相对纯一稳定的猪红斑丹毒丝菌制苗用菌株,对42株临床分离的猪红斑丹毒丝菌进行筛选,通过小鼠致死性试验确定4株受试菌株,编号为AEr9、AEr21、AEr31和AEr32。采用改良寇氏法测定受试菌株的半数致死量(LD50),通过微量平板凝集和琼脂扩散试验测定反应原性,基于小鼠免疫攻毒试验测定免疫原性,并通过连续传代培养,分别对第10、20、30代受试菌株进行LD50、沉淀抗体滴度和免疫保护率检测,以确定稳定性。结果显示,AEr9、AEr21、AEr31、AEr32的LD50分别为845、50.3、35.5和10.1 cfu·m L-1,微量平板凝集试验和琼脂扩散试验进一步筛选出反应原性高的菌株AEr21和AEr31。灭活全菌体免疫小鼠,均产生免疫保护力,以AEr31免疫保护力最好。细菌传10代后,两株菌毒力均出现致病力减弱的情况,第10、20、30代菌株致病力趋向于稳定,AEr21引起的兔抗猪丹毒血清沉淀抗体滴度水平更稳定。说明菌株AEr21、AEr31具备毒力强、抗原性好、遗传稳定的特性,可作为猪红斑丹毒丝菌制灭活苗用的候选菌株。
- 吴琼娟杨志鹏姚焱彬陆萍魏建忠孙裴李郁
- 关键词：抗原性稳定性
- 检测猪丹毒杆菌抗体重组SpaA ELISA的建立被引量：8
- 2017年
- 【目的】利用表达纯化的猪丹毒杆菌表面保护性蛋白SpaA,建立检测猪丹毒杆菌抗体的间接ELISA方法。【方法】克隆扩增猪丹毒杆菌SpaA基因,并将SpaA基因与原核表达载体p GEX-6P-1连接,通过PCR、双酶切及测序鉴定后,将阳性重组质粒转化入受体菌E.coli Rosetta(DE3),并利用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。将SpaA重组蛋白按不同浓度包被酶标板,通过方阵滴定法确定最佳抗原包被浓度及血清稀释度,并对其他条件进行优化,最终建立检测猪丹毒杆菌抗体的间接ELISA方法。【结果】利用克隆表达的猪丹毒杆菌SpaA蛋白作抗原,通过方阵滴定法确定蛋白最佳包被浓度为1.0 mg/L,血清的最佳稀释度为1:100,建立了检测猪丹毒杆菌抗体的间接ELISA方法,批内及批间变异系数均小于10%,具有较好的重复性及特异性。用建立的间接ELISA方法检测猪丹毒疫苗免疫后的健康猪血清样品,检测结果与美国TSZ公司猪丹毒杆菌抗体检测试剂盒和Western blot鉴定结果进行对比,两者总符合率分别为92.20%、92.59%。【结论】试验利用原核表达的SpaA重组蛋白作抗原建立的检测猪丹毒杆菌抗体的间接ELISA方法,特异性强、重复性好、敏感性高,可用于猪丹毒杆菌的抗体检测及流行病学调查。
- 姚焱彬李倩文杨志鹏陆萍魏建忠孙裴李郁
- 关键词：猪丹毒杆菌克隆表达间接ELISA
- 某猪场腹泻仔猪沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验被引量：7
- 2014年
- 针对安徽某猪场腹泻仔猪,分别采集5头不同窝的肛拭子和肠道内容物样品,利用常规法结合PCR技术进行沙门氏菌的分离鉴定,玻片凝集试验和ERIC-PCR技术确定分离株的血清型与基因型,标准K-B纸片法进行20种抗生素敏感试验。结果显示,4头腹泻仔猪(4份肠道内容物样品、1份肛拭子样品)均分离到沙门氏菌,阳性检出率为80%,涉及明斯特沙门氏菌、纽兰沙门氏菌、新斯托夫沙门氏菌和乌干达沙门氏菌4种血清型,其中1头同时检出4种血清型沙门氏菌;8株沙门氏菌分离株为同一基因群,分属2个基因型,亲缘关系较近,对20种抗生素均敏感。结果表明,该猪场仔猪腹泻与不同血清型沙门氏菌的混合感染有一定的关系,母猪的清洁卫生与猪舍的消毒到位不容忽视,临床上常用抗生素可用于防治或减缓仔猪腹泻的发生。
- 谢倩姚明黄晓慧陆萍焦安心孙裴魏建忠李郁
- 关键词：腹泻仔猪沙门氏菌血清型基因型药敏试验
- 检测猪丹毒杆菌抗体重组SpaA ELISA的建立
- 引言猪丹毒(Swine erysipelas)是由猪丹毒杆菌(Erysipelothrix rhusiopathiae)引起的一种人畜共患传染病,其临诊特征主要为高热、急性败血症、皮肤疹块、慢性疣状心内膜炎及皮肤坏死与多...
- 姚焱彬陆萍杨志鹏李郁
- 合肥市宠物犬与犬粮携带沙门氏菌情况调查及耐药性研究
- 为了解合肥市宠物犬和犬粮携带沙门氏菌情况,分离菌株的药物敏感性和耐药基因携带情况,本研究利用常规法和PCR技术,对746份宠物犬肛棉拭子和404份犬粮样品进行沙门氏菌分离鉴定,凝集试验和K-B法确定分离菌株的血清型和耐药...
- 王元兰刘军军陆萍姚明孙裴魏建忠李郁
- 关键词：宠物犬沙门氏菌耐药机制基因检测
- 文献传递
- 猪丹毒杆菌SpaA基因原核表达及间接ELISA方法的建立
- 引言 猪丹毒(Swine erysipelas)是由猪丹毒杆菌(Erysipelothrix rhusiopathiae)引起的一种人畜共患传染病。目前，该病在世界上大多数国家都有分布，呈散发或流行性发生，给养猪业造成了...
- 陆萍魏文涛李郁魏建忠孙裴
