陆慧琼
- 作品数：14 被引量：28H指数：3
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广东省中医药管理局基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
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- 肝移植围手术期缺血-再灌注胃氧化损伤发生机制被引量：3
- 2015年
- 目的探讨肝移植围手术期缺血-再灌注胃氧化损伤发生的规律及机制。方法将28只SD大鼠按随机数字表法分为4组,每组7只。其中3组建立自体原位肝移植模型。根据移植肝恢复灌注时间设立4、8、16 h组。另1组设为假手术组(Sham组)。取大鼠胃壁组织HE染色后观察胃黏膜损伤的病理学变化。检测胃组织超氧阴离子(O2-)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平。采用Western blot法检测胃组织硫氧还蛋白(Trx)-2表达。实验数据比较采用单因素方差分析及LSD-t检验。结果 4 h组胃黏膜深层及黏膜下层充血、水肿、出血,腺体排列紊乱,部分区域出血、坏死,糜烂深达黏膜肌层;8、16 h组胃黏膜损伤减轻,仅黏膜浅层和深层充血、水肿,Sham组表现为多数胃黏膜上皮结构完整。4 h组O2-和MDA分别为(185±26)U/mg和(0.4±0.1)nmol/mg,8 h组相应为(192±59)U/mg和(0.5±0.1)nmol/mg,明显高于Sham组的(102±34)U/mg和(0.2±0.1)nmol/mg(LSD-t=4.99,4.23和6.37,4.52;P<0.05)。4 h组GSH和GSH-PX分别为(17±6)mg/g和(781±174)U/mg,8 h组相应为(15±4)mg/g和(750±160)U/mg,明显低于Sham组的(30±6)mg/g和(1 162±215)U/mg(LSD-t=-3.26,-4.01和-3.78,-4.36;P<0.05)。16 h组大鼠胃组织O2-、MDA、GSH、GSH-PX分别为(169±27)U/mg、(0.3±0.1)nmol/mg、(25±8)mg/g、(1 108±183)U/mg,与8 h组比较差异有统计学意义(LSD-t=-2.85,-3.46,2.66,3.69;P<0.05)。4、8 h组Trx-2蛋白相对表达量分别为52±10、43±8,较Sham组的125±16明显减少(LSD-t=-5.34,-6.23;P<0.05)。16 h组Trx-2蛋白表达量为160±18,较8 h组明显升高(LSD-t=4.75,P<0.05)。结论大鼠肝移植缺血-再灌注损伤早期即引起胃氧化损伤,其发生可能与Trx-2表达下降、活性氧增多和机体抗氧化能力下降有关。
- 谢汉镔葛缅池信锦罗刚健黑子清陆慧琼
- 关键词：肝移植胃疾病硫氧还蛋白活性氧
- 痰热清注射液抑制HepG2细胞的研究
- 2013年
- 目的研究痰热清注射液对HepG2肝癌细胞株的抑制及对细胞周期的影响。方法采用MTT法检测痰热清注射液对HepG2肝癌细胞株的抑制,采用凯基细胞周期法检测该药对细胞周期的影响。结果痰热清注射液呈剂量依赖性抑制HepG2细胞,使细胞阻滞于G0/G1期,细胞DNA合成减少。结论痰热清注射液对肝癌细胞具有一定抑制作用,可能与使细胞阻滞于休眠期或DNA合成前期,导致细胞DNA合成减少有关。
- 李永伟杨跃武陆慧琼
- 关键词：痰热清注射液HEPG2细胞株细胞周期
- 透明质酸/壳聚糖/pEGFP纳米粒介导体外基因转染关节软骨细胞与滑膜细胞的比较被引量：2
- 2012年
- [目的]以透明质酸(HA)修饰的壳聚糖(CS)/质粒DNA(pDNA)纳米粒介导体外基因转染关节软骨细胞与滑膜细胞,以明确其作为非病毒基因载体治疗关节疾病的潜能。[方法]将HA修饰的CS与负载增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)的pDNA以复凝聚法制成纳米粒,以扫描电镜检测纳米粒形态;激光粒度仪测定其粒径、Ze-ta电位及分散度(PDl);凝胶电泳阻滞试验检测HA/CS和pDNA的结合力及pDNA的释放;体外转染兔关节软骨细胞与滑膜细胞,以流式细胞仪及荧光显微镜检测转染效率。[结果]HA/CS/pDNA纳米粒多呈球形,粒径平均为(142.5±20.3)nm,表面Zeta电位平均为(25.99±8.48)mV,分散度平均为(0.283±0.089),可有效保护pDNA免受核酸酶的降解;通过调节pH值至7.5以上或加入壳聚糖酶可促使纳米粒中的pDNA释放;体外转染实验证明HA/CS/pDNA纳米粒能介导pEGFP转染软骨细胞和滑膜细胞并在细胞内表达绿色荧光蛋白,其对软骨细胞的转染能力较强,比裸pEGFP和CS/pEGFP纳米粒有更高的转染效率(P<0.05);但对滑膜细胞的基因转染效率较低,与CS/pEGFP纳米粒无明显差别(P>0.05)。[结论]复凝聚法制备的HA/CS/pDNA纳米粒是一种有效的新型非病毒基因转染载体,在体外可介导基因转染关节软骨细胞和滑膜细胞,其转染效率具有明显的细胞依赖性。
- 吕璐璐卢华定陆慧琼张富程赵慧清
- 关键词：壳聚糖透明质酸基因转染软骨细胞滑膜细胞
- 基因芯片检测HepG2、HepG2.2.15细胞株及Lumican在多个肝癌细胞株的表达
- 目的:基因芯片检测HepG2和HepG2.2.15两种细胞株之间的差异基因表达,研究差异基因lumican在多个肝癌细胞株的表达。材料与方法:提取细胞总RNA,纯化后反转录合成荧光分子（Cy3/Cy5）标记的cDNA探针...
- 李永伟郭云蔚张彤陆慧琼朱明芬凌小强李刚
- 关键词：基因芯片LUMICAN癌基因
- 文献传递
- 无血清培养人结肠癌球囊样细胞生物学特性研究被引量：1
- 2011年
- 目的采用无血清培养方法从人结肠癌细胞株中分选出富含肿瘤干细胞的球囊样细胞，并分析其增殖和迁移特性。方法人结肠癌细胞株HCTll6、HT29细胞在特殊配制的无血清培养基（SFM）中悬浮培养，观察球囊样细胞的生成。流式细胞仪检测结肠癌干细胞分子标记CDl33表达，利用CCK一8比色法以及Transwell小室法研究结肠癌球囊样细胞的增殖情况和迁移能力。采用成组设计资料的t检验分析检测数据。结果HCTl16、HT29细胞在SFM培养条件下可以获得可稳定传代的球囊样细胞，SFM培养下HCTll6球囊样细胞CDl33阳性细胞占75．44％±11．41％，HT29球囊样细胞CDl33阳性细胞占76．22％±14．23％。与常规含血清培养基（SSM）培养的同系细胞比较，HCTll6及HT29球囊样细胞中结肠癌干细胞分子标记CDl33阳性细胞数明显增多（t：11．43，9．17，P〈0．05），其持续增殖能力和运动迁移能力均增强。结论无血清培养获得的结肠癌球囊样细胞高表达结肠癌干细胞分子标记CDl33，且具有更强的增殖和迁移能力。它可作为进一步研究结肠癌干细胞的良好模型。
- 张实魏波黄勇韩晓燕陆慧琼卫洪波
- 关键词：结肠肿瘤肿瘤干细胞无血清培养
- 甘草甜素对HepG2.2.15细胞株CCL20的影响被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨甘草甜素(GL)对HepG2.2.15细胞CCL20表达及细胞存活率的影响。方法:定量RT-PCR检测CCL20的表达,MTT检测细胞的增殖活性,计算细胞存活率,并与空白对照组比较。结果:给药后各组CCL20水平随着剂量的增加而表现为逐渐降低的趋势,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);MTT实验显示200 mg·L-1以下3个剂量组均可促进细胞增殖(P<0.01);400,800 mg·L-12组均显著抑制细胞增殖(P<0.01)。结论:GL呈剂量依赖抑制CCL20的表达,从而可能抑制HBV引起的免疫炎症反应,但800 mg·L-1组的低表达也可能与细胞的死亡有关。
- 李永伟卢建溪杨宏志陈伟陆慧琼
- 关键词：甘草甜素HBVCCL20HEPG2.2.15细胞株
- 分子医学公共实验室的安全管理策略探讨被引量：1
- 2014年
- 作为为医院教学、科研、实验提供优质服务和有力保障的基本场所,分子医学公共实验室建设与发展必不可少。因而采用多种策略和各种先进手段对分子医学公共实验室进行各方面的安全化管理,全面分析和应对公共实验室可能会面对的各种情况,进一步探索其在开放模式下的管理模式,是促进分子医学公共实验室建设与发展的重要环节。
- 侯雪瑞韩晓燕张海波张富程陆慧琼兰天云
- 关键词：分子医学公共实验室安全管理
- 抑制EBNA1表达对NK/T细胞淋巴瘤细胞增殖的影响
- 2010年
- 目的研究抑制EBV阳性NK/T细胞淋巴瘤细胞系HANK1细胞EBV核抗原1的表达对细胞增殖和周期分布的影响,探讨抑制EBV感染治疗EBV相关性NK/T细胞淋巴瘤的潜在应用价值。方法用RNA干扰(RNA interference,RNAi)方法抑制HANK1细胞EBNA1表达,Western blot检测EBNA1蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡。结果 EBNA1-shRNA表达载体明显抑制EBNA1表达,细胞周期G1期停滞,凋亡细胞增多,细胞增殖受抑。结论根治EBV感染可能是治疗EBV相关性NK/T细胞淋巴瘤的好方法。
- 莫祥兰苏祖兰张富程陆慧琼
- 关键词：EBNA1RNAI细胞周期增殖
- 甘草甜素对HepG2.2.15细胞株HBeAg水平及TLR4表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨甘草甜素(GL)对HepG2.2.15细胞上清HBeAg分泌,Toll样受体4(TLR4)信号分子的表达及对细胞增殖的影响。方法实时荧光定量PCR检测TLR4表达;直接免疫荧光流式细胞术(FCM)检测表达TLR4的阳性细胞率;ELASA检测HBV所分泌抗原;MTT检测细胞增殖活性,并与空白对照组比较。结果给药后HBVe抗原(HBeAg)的分泌结果显示,总体均数间差异显著(P<0.05),但甘草甜素各组与对照组比较差异无统计学意义;GL各组TLR4 mRNA及流式细胞TLR4的表达总体均数间均有显著差异(P<0.01),分别与对照组相比差异有显著性(P<0.01),100μg/mL组尤其明显;MTT实验显示,200μg/mL以下三个剂量组均可促进细胞增殖,50μg/mL组与对照组间差异显著(P<0.05);400μg/mL、800μg/mL两组均显著抑制细胞增殖(P<0.01);而MTT结果与HBeAg水平呈显著负相关(P<0.01),与TLR4表达无相关关系(P>0.05)。结论研究表明,甘草甜素对HepG2.2.15的e抗原分泌可能具有双向作用;细胞的存活率与e抗原呈负相关;TLR4在HepG2.2.15细胞株低表达,GL可上调TLR4表达,甘草甜素可影响先天免疫中的TLR4信号分子,有可能在体内通过免疫途径影响HBV复制和抗原分泌。
- 李永伟杨宏志郭云蔚陆慧琼凌小强
- 关键词：甘草甜素HBVTOLL样受体4HEPG2.2.15细胞株
- 结肠癌组织FOXF1基因甲基化检测及其临床意义被引量：5
- 2013年
- 目的研究结肠癌组织中叉头框F1基因(FOXF1)启动子区甲基化状态及其临床意义,探讨其在结肠癌发生发展中的作用。方法应用甲基化特异性PCR检测62例结肠癌标本中FOXF1基因启动子区甲基化状态,并分析其与结肠癌患者临床病理特征的关系。采用实时荧光定量PCR检测结肠癌标本中FOXF1基因mRNA表达水平,并分析FOXF1基因甲基化与其mRNA表达间的关系。结果结肠癌组织中FOXF1基因启动子区甲基化率为64.5%(40/62),显著高于正常黏膜组织的4.8%(3/62),差异具有统计学意义(P<0.01),低分化组中FOXF1甲基化率为82.6%(19/23),高于高中分化组的53.8%(21/39),差异具有统计学意义(P<0.05)。结肠癌组织中FOXF1基因mRNA相对表达量为1.453±0.385,显著低于正常黏膜组织的3.648±1.228,差异具有统计学意义(P<0.01)。结肠癌组织中FOXF1基因甲基化状态与FOXF1基因mRNA表达呈负相关(rs=-0.438,P<0.01)。结论 FOXF1基因启动子异常甲基化及其mRNA表达下调是结肠癌中的频发分子事件;也是导致FOXF1基因mRNA表达下调的机制之一;FOXF1基因在不同分化程度的结肠癌患者中甲基化率不同,提示FOXF1基因甲基化状态有可能成为评价结肠癌恶性程度的辅助指标,FOXF1基因也可能成为结肠癌靶向治疗的潜在靶点。
- 温机智韩晓燕卫洪波陆慧琼张富程
- 关键词：结肠肿瘤甲基化实时荧光定量聚合酶链反应
