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热休克蛋白27心肌特异性高表达诱导小鼠产生心肌肥厚被引量：5: 2014年; 目的探讨不同表达量的热休克蛋白27(Hsp27)在小鼠心脏中的作用。方法构建在心肌中特异性表达Hsp27的不同表达量的转基因鼠(TG),对照组为野生型鼠(WT)。采用蛋白印记测定Hsp27蛋白表达水平;分别测量心脏质量与体质量的比值和心脏质量与胫骨长度的比值(HW/BW和HW/TL);采用实时定量荧光PCR(real time PCR)技术测定心肌肥厚标记物心房利钠肽(ANP)、脑利钠肽(BNP)的表达;采用超声心动图观察心功能及心脏结构。通过长期饲养,观察存活率。结果不同TG系鼠,Hsp27心肌特异性表达水平不同。高表达TG10鼠与WT鼠相比,其HW/BW和HW/TL比值显著增加(P<0.01),并且ANP和BNP的mRNA水平也明显增加(P<0.01)。TG10鼠的心功能与WT鼠比较显著下降(P<0.01),射血分数(EF)降低了24.64%,短轴缩短率(FS)降低了29.37%。TG10鼠的生存率明显降低(P<0.01)。结论高表达的Hsp27在TG鼠心肌肥厚发展中起着重要作用,提示Hsp27可以作为心肌病患者治疗的潜在靶点。; 余鹏涂飞张霞钱波刘莉; 关键词：热休克蛋白27 心肌肥厚心功能转基因小鼠

还原应激诱导心肌特异性高表达Hsp27小鼠发生心肌肥厚: 2014年; 目的探讨热休克蛋白27(Hsp27)高表达引起小鼠心肌肥厚的作用机制。方法构建心肌中特异性高表达Hsp27的转基因(TG)小鼠和对照品系野生型(WT)小鼠。采用HE染色和异硫氰酸荧光素-麦胚凝集素(FITC-WGA)染色分别检测心脏体积和心肌面积,Western blot检测谷胱甘肽氧化物酶1(GPx1)蛋白表达,试剂盒测定活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)以及还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平。注射GPx1抑制剂马拉松(MS)后,观察TG小鼠心功能的变化,计算心脏重/体重(HW/BW)和心脏重/胫骨长(HW/TL)比值。结果与WT小鼠相比,TG小鼠心脏体积和心肌面积增大,ROS和MDA水平降低(P<0.01),GSH含量和GSH/GSSG比值以及GPx1蛋白表达均增加(P<0.01)。注射MS后,TG小鼠心脏的射血分数和短轴缩短率增加,而HW/BW和HW/TL比值降低。结论 Hsp27高表达引起的还原应激可能在小鼠心肌肥大发生、发展过程中发挥着重要作用。; 涂飞余鹏张霞钱波刘莉; 关键词：热休克蛋白27 心肌肥厚

热休克蛋白27高表达对内毒素血症所致小鼠心功能不全的保护作用: 心功能不全是脓毒性休克的主要并发症,也是脓毒症死亡率很高的主要原因。我们曾报道心肌特异性高表达热休克蛋白27转基因鼠(Hsp27Tg)可显著改善阿霉素诱导的心功能不全并可提高生存率,因而我们提出"Hsp27高表达将抑制内...; 刘莉尤文军闵笑颜张小进钱波庞斯斯程蕴琳; 关键词：内毒素血症心功能不全热休克蛋白; 文献传递

心肌特异性高表达Hsp27对阿霉素所致小鼠心力衰竭的保护作用: 背景:氧化应激及其引起的心肌细胞凋亡在充血性心力衰竭(congestive heart failure,CHF)发生发展中有十分重要的作用。我们曾报道热休克蛋白27(Heat shock protein 27,Hsp27...; 刘莉钱波闵笑颜张小进程蕴琳

内毒素诱导小鼠心肌中Toll样受体4通路分子靶点激活的时间相关性被引量：1: 2007年; 目的:探讨内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠心肌中Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)通路分子靶点激活的时间相关性及其意义。方法:将雄性C57BL/6J小鼠随机分为LPS处理组(腹腔注射LPS10mg/kg)和生理盐水对照组,Western blotting检测处理后5min、10min、30min、1h、2h、6h、12h、24h各时间点(n=3)心肌TLR4通路各分子靶点的激活。结果:TLR4-MyD88-IκBα通路5min即被激活,2h达高峰,随后开始下降(P<0.05)。MAPKs5min被激活,6h达峰值,随后开始下降(P<0.05)。Akt10min被激活,6h达峰值,其后逐渐下降(P<0.05)。结论:LPS诱导心肌TLR4通路的激活与时间变化存在密切联系。; 闵笑颜钱波刘莉张小进程蕴琳; 关键词：心肌内毒素小鼠

热休克蛋白27对小鼠实验性心力衰竭的保护作用被引量：7: 2007年; 目的观察热休克蛋白27(Hsp27)心肌特异性高表达对 doxorubicin(Dox)诱导的慢性心力衰竭(心衰)小鼠的影响。方法 (1)建立心肌特异性高表达 Hsp27的转基因鼠模型;(2)经 Dox诱导小鼠的慢性心衰,并观察 Hsp27对小鼠生存率、左心室血流动力学的影响。结果 (1)成功建立心肌特异性过表达 Hsp27的转基因鼠模型;(2)Hsp27心肌特异性过表达显著改善了 Dox 诱导的小鼠死亡率(P<0.01)和左心室血流动力学参数变化(P<0.05或 P<0.01);(3)Hsp27表达显著抑制了Dox 诱导的心肌氧化应激。结论 Hsp27心肌特异性过表达对 Dox 诱导的小鼠心衰具有显著的抑制作用。; 刘莉张小进钱波闵笑颜程蕴琳; 关键词：心力衰竭充血性热休克蛋白质类血液动力学存活率

热休克蛋白27改善实验性小鼠心力衰竭的机制研究被引量：4: 2008年; 目的探讨热休克蛋白27（Hsp27）改善实验性小鼠心力衰竭的机制。方法（1）心肌损伤诱导：Hsp27转基因鼠（TG）和作为对照组的野生型鼠（WT），分别腹腔注射阿霉素（25mg／kg）或生理盐水。（2）组织学检查：给药后第3天，取心脏石蜡切片并HE染色。在石蜡切片上进行细胞凋亡（TUNEL染色）、心肌细胞、细胞核的三重荧光染色，激光共聚焦显微镜观察。小鼠死亡后，观察胸腔、腹腔有无积液，取心和肺进行石蜡切片和HE染色。（3）线粒体超微结构：给药后第3天，取左心室肌制超薄切片，在电镜下观察。（4）蛋白质氧化修饰测定：给药后第3天取心脏，进行抗DNP免疫印迹分析。结果尸检结果：死亡小鼠均出现明显的胸腔积液和腹腔积液，肺泡中出现红细胞渗出和肺泡塌陷，WT和TG鼠心肌细胞空泡变性，WT鼠心肌出现纤维化，而TG鼠心肌没有相应变化。阿霉素给药后第3天：WT和TG鼠心肌细胞凋亡都显著增加，但与WT鼠心肌相比，TG鼠的心肌细胞凋亡则被显著抑制；WT和TG鼠心肌的羰基化显著增加，但与阿霉素-WT鼠心肌相比较，阿霉素-TG鼠心肌的羰基化反应被显著抑制；WT和TG鼠心肌细胞中出现了几种线粒体的结构改变如电子密度增加，嵴肿胀、模糊和消失，但这些改变在WT鼠心肌中要比TG鼠中严重。结论线粒体相关的氧化应激和细胞凋亡可能参与了Hsp27对阿霉素诱导心力衰竭的保护作用。; 刘莉张小进钱波闵笑颜程蕴琳; 关键词：热休克蛋白质类阿霉素

热休克蛋白27对内毒素血症所致心功能不全的保护作用被引量：1: 2009年; 目的探讨心肌特异性高表达热休克蛋白27（Hsp27）对内毒素血症所致心功能不全的影响，并初步探讨其机制。方法所有实验均在南京医科大学第一附属医院老年医学科研究室和南京大学模式动物研究所完成。（1）心肌特异性高表达Hsp27转基因鼠（Hsp27Tg）基因型和表达鉴定：分别采用PCFI法和westernblot法；（2）心功能测定：Hsp27Tg和野生型（WT）对照鼠均被腹腔注射内毒素（LPS，10mg／kg），24h后以超声心动图测定心功能，n=6／组；（3）死亡率：Hsp27Tg和wr鼠腹腔注射内毒素（LPS，20mg／kg），密切监测70h内的累积死亡率，n=37／WT，n=27／Hsp27Tg；（4）NF-κB活性测定：心肌组织样本采用凝胶迁移电泳法，细胞样本采用双报告基因法，n=4／组；（5）多组间的两两比较采用ANOVA和Scheffe检验，生存曲线分析采用log—rank检验，P〈0．05设为相差显著性界值。结果（1）Hsp27Tg小鼠心肌有丰富的Hsp27表达，WT则没有；（2）LPS使WT和Hsp27Tg鼠心功能均显著下降，但与WT比较，Hsp27Tg的心功能显著改善（P〈0．01或P〈0．05），其中EF增加27．3％，FS增加37．1％；（3）至LPS注射后70h，WT和Hsp27Tg小鼠死亡率分别为37．84％和11．11％，与WT鼠比较，Hsp27Tg生存率显著提高（P〈0．05）；（4）Hsp27显著抑制LPS诱导的NF-κB激活（P〈0．01或P〈0．05）。结论Hsp27心肌特异性高表达显著抑制内毒素血症所致的心功能不全，改善生存率，其机制可能与Hsp27下调LPS诱导的NF-κB激活有关。; 刘莉尤文军闵笑颜张晓进钱波戴俊程丁正年高翔程蕴琳; 关键词：热休克蛋白内毒素血症心功能不全炎症

心肌特异性高表达热休克蛋白27抑制阿霉素诱导的小鼠心肌凋亡被引量：4: 2007年; 目的观察小鼠心肌特异性高表达热休克蛋白27(Hsp27)对于阿霉素(Dox)诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法野生型(WT)和心肌特异性高表达Hsp27的转基因(TG)小鼠,实验组和对照组(n=3)分别用Dox25mg/kg和等体积生理盐水进行一次腹腔注射,3d后取心脏,经TUNEL染色和蛋白印记分别观察心肌细胞凋亡及可诱导热休克蛋白(iHsps)的表达情况。结果Hsp27在TG鼠心肌中特异性高表达。Dox处理后WT和TG鼠的心肌细胞凋亡较对照组均显著增加,但TG的凋亡比WT显著减轻[(5.22±0.60)‰和(10.67±2.41)‰,P<0.01];Dox刺激后Hsp70和血红素加氧酶1(HO-1)表达增加,TG鼠表达水平要显著高于WT鼠[Hsp70:(1.793±0.237)和(1.013±0.14),P<0.01;HO-1:(6.884±1.104)和(4.385±0.463),P<0.05],而αB-晶体蛋白(αBC)在各组间没有显著差异。结论Hsp27心肌特异性高表达能够有效抑制Dox诱导的小鼠心肌细胞凋亡。; 钱波刘莉闵笑颜张小进程蕴琳; 关键词：热休克蛋白心肌细胞阿霉素

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钱波

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