郭建辉
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 供职机构:军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 用人DNA介导的基因转移修复中国仓鼠细胞的HPRT缺陷被引量:1
- 1990年
- 中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)经N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱变和6-巯基鸟嘌呤(6-TG)选择,得到稳定的次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)缺陷细胞株,酶活性仅为野生型的6.5%。用磷酸钙共沉淀法和电脉冲法向HPRT-细胞转移人宫颈癌细胞(HeLaS_3)基因组DNA,纠正了CHO细胞的HPRT缺陷。酶活性提高了6.9倍,达到野生型的45%。用Alu序列探针进行分子杂交,证实经过基因转移并连续传代15次以上的受体细胞中含人DNA序列。表明人的有关基因已稳定地整合到CHO细胞的染色体中。
- 郭建辉章扬培夏寿萱
- 关键词:化学诱变细胞仓鼠
- HPRT缺陷细胞株的诱变和分离被引量:1
- 1989年
- 用单功能烷化剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝胍(MNNG)作为化学诱变剂处理中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1),使其基因发生点突变,通过含有6-巯基鸟嘌呤(6-TG)的培养基选择,获得次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT,E、C、2、4、2、8)缺陷细胞的克隆.诱发突变频率为1.3×10^(-5).经含次黄嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶核苷(HAT)的选择培养基鉴定及大剂量6-TG选择培养基验证,确认选出的克隆为HPRT缺陷型.经6周连续传代,缺陷株表型仍稳定.
- 郭建辉章扬培夏寿萱
- 关键词:HPRT诱变