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我国山西、河南虫媒病毒调查及西藏新分离环状病毒分子进化遗传分析: 背景　　山西省地处黄河流域中部、华北平原的西侧，四周分别与内蒙古、河北、河南、陕西四省相邻。省内四周山环水绕，大部分地区海拔在1000米左右，全省自北向南分布有6大盆地，地形复杂、气候多样，促成了媒介生物种类的多样性和繁...; 郑雅匀; 关键词：虫媒病毒环状病毒

一株发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒的分离鉴定及其生长特性研究被引量：1: 2016年; 目的探索疑似发热伴血小板减少综合征病例中病原体的分离鉴定,了解病毒生长特性。方法利用非洲绿猴肾细胞Vero E6从患者抗凝血标本中分离发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV),并通过血清学、形态学等方法对病毒进行鉴定;将分离的病毒接种不同细胞,利用荧光定量PCR检测不同时间细胞上清中病毒载量的变化。结果从患者抗凝血标本中分离出SFTSV;免疫荧光显示感染病毒的细胞培养物能与患者血清发生阳性反应;在透射电镜下能观察到布尼亚病毒样颗粒。SFTSV可感染Vero E6、Hep G2、THP-1等多种细胞,但病毒在不同细胞中的复制水平差异明显。其中Vero E6细胞对SFTSV较易感,病毒可增殖至4.89×109copy/ml。而Hep-2和HT29细胞不能被SFTSV感染。结论从疑似发热伴血小板减少综合征病例血液标本中成功分离出SFTSV。该病毒具有较广泛的细胞嗜性,对肾来源的细胞更易感。这些研究将为后续研究SFTSV的相关基础研究提供重要的线索。; 郑雅匀戴晓懿金东孙晖熊衍文罗雪莲; 关键词：发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒病毒复制

海南省虫媒病毒调查研究状况被引量：2: 2011年; 海南省地处热带北缘,自然条件适合节肢动物繁殖及虫媒病毒传播,曾发生过多次登革热大流行,也是流行性乙型脑炎(乙脑)地方性流行区。以往从海南省多种媒介和宿主动物中分离到4种甲病毒(基孔肯雅、马雅罗、盖塔和罗斯河病毒)、2种黄病毒(乙脑和登革热病毒)和1种Seadornavirus。现对海南省新分离虫媒病毒及其人畜感染状况进行回顾整理,为当地以及我国虫媒病毒病的预防控制提供依据。; 郑雅匀王志玉梁国栋; 关键词：虫媒病毒虫媒病毒病

淮阳山病毒NSs基因在THP-1细胞中的稳定表达及其对白细胞介素-6的调节作用: 2016年; 淮阳山病毒(Huaiyangshan virus,HYSV)是一种能引起人类发热伴血小板减少综合征的新型布尼亚病毒。NSs是淮阳山病毒的毒力因子,可能在病毒的致病中起重要的作用。本研究从构建好的含HYSV NSs基因的重组质粒pBluntNSs中扩增出NSs基因,然后克隆到慢病毒载体pHAGE-CMV-MCS-IZsGreen中构建重组质粒pHAGE-NSs;利用脂质体将pHAGE-NSs与包装质粒psPAX2、包膜质粒pMD2.G共转染293T细胞,在荧光显微镜下可见大量绿色荧光,收上清,即慢病毒悬液;将慢病毒悬液感染THP-1细胞后,通过绿色荧光蛋白进行流式分选、Western blot验证获得稳定表达NSs蛋白的THP-1细胞。利用人白介素-6ELISA检测试剂盒检测NSs蛋白对白介素-6的调节作用,结果表明,NSs蛋白能激活THP-1细胞产生白细胞介素-6。; 戴晓懿郑雅匀金东孙晖罗雪莲; 关键词：慢病毒载体白介素6

山西省运城市2012年蚊媒病毒的分离鉴定被引量：2: 2015年; 目的了解山西省运城市蚊虫及蚊媒病毒的种类和分布。方法2012年8月在山西省运城市临猗县和永济市采集蚊虫标本，经鉴定分类和分批研磨后，利用细胞（C6／36和BHK21）培养方法分离病毒，对阳性分离物使用蚊媒病毒种属特异引物进行RT-PCR扩增鉴定。结果采集4属7种10455只蚊虫，临猗县和永济市优势蚊种分别为淡色库蚊（91．96％）和三带喙库蚊（72．85％）。经鉴定分析，从标本中分离到15株基因I型乙型脑炎病毒（JEV）、4株库蚊黄病毒（CxFV）、3株淡色库蚊浓核病毒（CppDNV）和1株盖塔病毒（GETV）。结论首次从山西省分离GETV和CxFV；三带喙库蚊仍是运城市优势蚊种，目前当地自然循环的JEV仍以基因I型为主。; 郑雅匀曹玉玺付士红程璟侠赵俊英代培芳孔祥盛梁国栋; 关键词：乙型脑炎病毒盖塔病毒

2022年湖北省人与家养动物中荆门蜱病毒感染状况初步研究被引量：1: 2023年; 目的对2022年湖北省人和家养动物血清中荆门蜱病毒(JMTV)的抗体阳性率进行初步研究,评估荆门蜱病毒感染人群和动物的风险。方法将JMTV NS3蛋白在大肠埃希菌中表达并纯化,制备ELISA包被抗原,利用人和动物血清分别确定cut-off值;收集湖北省多个市牛羊养殖场采集的牛、羊血清,武汉市中心医院体检健康人血清,对这些血清样本以及实验室保存的林区居民血清进行JMTV特异性抗体以及核酸检测。结果初步建立基于NS3蛋白的JMTV抗体检测酶联免疫吸附试验(ELISA)。确定人血清、牛血清和羊血清的cut-off值分别为0.342、0.098和0.298。44份牛血清和193份羊血清中JMTV抗体阳性率分别为4.55%和3.63%。174份体检健康人和13份林区居民血清JMTV抗体结果均为阴性。所有样本中均未检测到JMTV的核酸片段。结论家养动物牛、羊血清中检出JMTV特异性抗体,提示需关注牛、羊作为蜱携带者导致病毒扩散的风险。; 张秀丹李贝杰王静孙晖郑雅匀罗雪莲; 关键词：NS3 酶联免疫吸附试验血清学

青藏高原喜马拉雅旱獭粪便携带腹泻相关病毒的调查分析被引量：1: 2016年; 目的调查我国青藏高原喜马拉雅旱獭粪便中腹泻相关病毒的携带情况,并对检出病毒进行序列分析。方法根据腹泻相关病毒基因组保守区设计兼并引物,采用直接PCR或一步法RT-PCR方法对96份喜马拉雅旱獭粪便标本核酸进行检测;阳性PCR产物测序后与参考毒株进行序列比对;利用Phy ML 3.0软件对喜马拉雅旱獭粪便中病毒序列进行进化分析。结果 96份青藏高原喜马拉雅旱獭粪便中共检出星状病毒32份、小双节RNA病毒42份和嵴病毒5份,阳性率分别为35.4%、43.8%和5.2%;星状病毒、小双节RNA病毒和嵴病毒与参考毒株核苷酸一致性分别为78%、77%和93%,氨基酸一致性分别为77%、84%和91%。兼并引物未检测到腺病毒、札如病毒和诺如病毒。结论青藏高原喜马拉雅旱獭粪便中存在星状病毒、小双节RNA病毒和嵴病毒,为后续喜马拉雅旱獭携带病毒谱系研究提供了重要线索。; 罗雪莲郑雅匀戴晓懿金东孙晖熊衍文; 关键词：喜马拉雅旱獭星状病毒

河南省新安县和息县2012年蚊传虫媒病毒调查被引量：2: 2015年; 目的了解河南省部分地区蚊传虫媒病毒的种类分布及基因型别。方法于2012年5-8月在河南省洛阳市新安县和信阳市息县的居民住房、猪圈、牛棚及树林中采集蚊虫。使用细胞培养法分离病毒,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行种属特异扩增鉴定,并用Clustal X2.1、Meg Align、Genedoc 3.2和Mega v5.1生物信息学软件完成病毒核酸序列的分子生物学分析并进行基因分型。结果共采集蚊虫4属5种7149只,其中新安县以骚扰阿蚊居多(2055只,51.36%),息县以淡色库蚊(2964只,94.16%)为主。共分离获得5株病毒,直接接种BHK-21细胞无病变、C6/36细胞培养仅导致轻微病变,其C6/36细胞传代培养物转接BHK-21细胞后3 d可致细胞明显病变;序列分析表明这5株病毒均属基因Ⅰ型流行性乙型脑炎病毒(JEV),其中3株分离自淡色库蚊,2株来自三带喙库蚊。结论河南省部分地区依然存在JEV及其传播媒介,且目前当地自然界中循环的JEV仍以基因Ⅰ型为主。; 郑雅匀付士红唐晓燕李幸乐尚思远徐超梁国栋; 关键词：流行性乙型脑炎病毒基因型

2021年广东省广州市一株埃可病毒11型菌株的分离与鉴定: 2024年; 目的探索疑似埃可病毒病原体感染标本的分离鉴定,了解埃可病毒11型(ECHO 11)生长特性及进化特征。方法将2021年广东省广州市发热、急性扁桃体炎患儿的咽拭子标本接种人横纹肌肉瘤细胞(RD)进行病毒分离培养通过巢式反转录聚合酶链反应及一步法聚合酶链反应等方法对疑似埃可病毒病原体进行鉴定;扩增分离株VP1基因全长序列,选择全球有代表性流行株,绘制进化树,确定分离株的基因型并研究分离株在细胞中的生长动力学。结果从患者咽拭子标本中分离出ECHO 11毒株,命名为Qi-2023。分离株在RD细胞中能有效增殖,病毒滴度随着复制时间的增加而上升,3~12 h之间病毒增殖最快。进化树结果表明该分离株与D型代表株聚类在一起,VP1基因核苷酸相似性为84.42%~99.08%。且与D5亚型同源性最高,VP1基因核苷酸相似性99.08%。结论从疑似肠道病毒感染患者的咽拭子中成功分离出一株ECHO 11,为D5亚型。这些研究将为ECHO 11感染防控提供实验室数据参考。; 李贝杰陈澜范前进刘文宽孙晖郑雅匀罗雪莲; 关键词：肠道病毒 VP1基因

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