耿建军 作品数:57 被引量:180 H指数:8 供职机构: 山西农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山西省自然科学基金 引进国际先进农业科技计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 医药卫生 更多>>
DKK3调控羊驼黑色素细胞中黑色素生成 被引量:1 2021年 Dickkopf-3(DKK3),Wnt/β-catenin信号通路中一个重要的抑制因子,可能参与调控黑色素生成过程。本文研究了DKK3在羊驼黑色素细胞中黑色素生成的作用。在羊驼黑色素细胞中,过表达DKK3显著下调Wnt1,Lef1,Myc和黑色素生成相关基因MITF及其下游基因TYR,TYRP1和TYRP2的表达,在mRNA和蛋白质水平均明显下降(P<0.05);总黑素,褐黑素和真黑素的含量分别下降80.30%、72.17%和64.60%(P<0.05)。相反,在羊驼黑色素细胞中转染siRNA-DKK3,一种小干扰RNA,可以显著上调Wnt1,Lef1,Myc和黑色素生成相关基因MITF及其下游基因TYR,TYRP1和TYRP2在mRNA和蛋白质水平的表达(P<0.05);总黑素、褐黑素和真黑素的含量分别增加1.65倍、1.25倍和1.21倍(P<0.05)。这些结果表明,DKK3可以通过Wnt/β-catenin信号通路介导MITF下调羊驼黑色素细胞中黑色素的生成。 焦丁兴 贾琼 胡世雄 杨婉赟 范瑞文 耿建军关键词:黑色素细胞 内皮素受体在不同毛色绵羊皮肤中的表达和定位分析 被引量:4 2010年 【目的】研究内皮素受体A和B(endothelin receptor A and B,EDNR A and B)在绵羊皮肤中的表达与定位,以及在不同毛色中的差异比较,探讨其在绵羊毛色形成中的作用及其相关机制。【方法】以不同毛色的成年绵羊为研究对象(设黑色毛和白色毛两组),用RT-PCR法检测EDNR基因在不同毛色皮肤中的表达,并使用实时荧光定量PCR技术分析不同毛色绵羊皮肤EDNR基因的相对表达量,采用免疫组织化学法和Western blot法对EDNR在绵羊皮肤中的表达进行定位和定量分析。【结果】荧光定量PCR结果显示黑色绵羊中EDNRA的相对表达量是白色绵羊的1.2648倍,EDNRB的则是1.8248倍;Western blot结果显示,皮肤组织粗蛋白提取物中含有EDNR蛋白,且受体A在黑白两组皮肤中表达不显著(P>0.05),受体B在黑色组的表达显著高于白毛组(P<0.05);免疫组化实验结果显示,EDNR蛋白在两组皮肤的表皮和毛囊中均有表达,通过光密度分析,受体A在黑毛皮肤各处细胞中的表达显著高于白毛皮肤,受体B则在除毛根鞘之外的其它两处细胞中表达显著高于白毛皮肤(P<0.05)。【结论】实验结果提示,EDNR参与绵羊皮肤黑素细胞的生成,且两受体作用效应存在差异。 耿建军 孙乐天 穆晓丽 张杰 姜俊兵 张映 李宏全 董常生关键词:内皮素受体 绵羊 WESTERN BLOT 实时荧光定量PCR MyoD在不同发育阶段小鼠心肌的表达定位 2018年 [目的]为了探讨小鼠MRFs基因家族中MyoD基因与心肌细胞增殖分化之间的关系,[方法]本研究对幼年、性成熟、体成熟、老年4组小鼠心肌MyoD基因的表达进行研究。取小鼠心肌组织,采用实时荧光定量PCR技术检测MyoD mRNA在不同发育阶段小鼠心肌的表达,免疫组织化学法定位MyoD在心肌中的分布。[结果]HE染色显示幼年鼠肌纤维排列紧密,细胞核中心化现象多见,随着年龄增长,肌纤维排列疏松,细胞核中心化现象少见,老年鼠稍有回升。免疫组化MyoD在幼年小鼠中表达量最高,性成熟、体成熟、老年鼠中MyoD表达量均低于幼年鼠。其中性成熟小鼠表达量高于体成熟小鼠和老年小鼠。MyoD在小鼠的不同发育阶段心肌上均有表达,其中在幼年阶段心肌上的表达最显著,而在性成熟阶段和体成熟阶段心肌上的表达降低,老年阶段表达稍有回升,且差异显著。[结论]MyoD对于肌肉的形成有重要的作用,尤其是在胚胎发育早期。MyoD表达量与小鼠心肌细胞的发育具有相关性,即MyoD在不同发育阶段小鼠心肌细胞的表达存在差异性,可以作为判断肌细胞发育程度的一种指标,为进一步研究肌肉作用机制提供理论依据。 薛霖莉 冀云燕 郝晓静 曹靖 任华伟 李艺雷 耿建军 王海东 赫晓燕关键词:小鼠 心肌 不同发育阶段 不同月龄羊驼小肠肥大细胞的数量变化研究 为了揭示不同月龄羊驼的小肠肥大细胞的数量变化及分布规律,本实验分别选择3月龄、12月龄的各3头羊驼的十二指肠、空肠、回肠,利用甲苯胺蓝染色方法进行研究,通过统计学软件分析得出结果:随年龄增长,羊驼十二指肠肥大细胞数量增多... 游蓉丽 董常生 贺俊平 赫晓燕 耿建军 田志英 文雪雪关键词:羊驼 小肠 肥大细胞 文献传递 一种酶与微生态制剂复合组剂及其制备方法 本发明公开了一种酶与微生态制剂复合组剂及其制备方法,是由枯草芽孢杆菌混合液、啤酒酵母菌混合液、嗜酸乳杆菌混合液混合得到菌酶混合液,再与保护剂混合制成。通过本发明得到的复合制剂能调节动物肠道生态平衡,预防疾病的同时促进消化... 任玉红 裴婷 王海东 耿建军 程志学 于秀菊文献传递 黑色素细胞中过量表达miR-137对TYRP-1和TYRP-2的影响 被引量:8 2013年 【目的】证明miR-137通过调控MITF而间接影响小鼠黑色素细胞TYRP-1和TYRP-2的表达,从而影响黑色素的生成。【方法】通过细胞转染技术在细胞水平过量表达miR-137,对黑色素细胞中黑色素含量进行了测定,经RT-PCR以及western blot检测转染后细胞TYRP-1和TYRP-2在mRNA和蛋白水平的变化。【结果】黑色素含量明显减少,在mRNA水平,TYRP1显著降低至0.4倍,TYRP-2显著降低至0.6倍。在蛋白水平,TYRP-1显著降低至0.61倍,TYRP-2显著降低至0.73倍。【结论】过量表达miR-137会通过调控MITF而使黑色素细胞TYRP-1和TYRP-2的表达量降低,从而揭示了miR-137通过调节TYRP-1和TYRP-2的表达间接调控了黑色素的生成。 马淑慧 薛霖莉 徐刚 侯亚琴 耿建军 曹靖 赫晓燕 王海东 董常生关键词:MITF 黑色素 催乳素受体基因与羊驼繁殖性能关系的初探 被引量:6 2007年 通过氯仿/异戊醇法制备羊驼血液基因组DNA,采用PCR方法首次扩增出羊驼催乳素受体基因(prolactin receptor gene,PRLR)exon8-exon9序列(GenBank登录号为DQ198164),该片段长度为622bp。通过NCBI blast(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)比较,结果表明:该序列包括exon8的82bp、intron8全序列472bp和exon9的68bp。同源性比较发现,羊驼PRLR基因exon8和exon9核苷酸序列与其它哺乳动物的相应区域的同源性特高,均≥92%;同时还发现羊驼exon8引物后第19个碱基为G,而其它哺乳动物(猪除外)均为A,猪则是在羊驼exon8引物后的第34个碱基处由G变为A,通过推导氨基酸序列分析发现,这种单碱基的突变使得羊驼与其它哺乳动物相比,该处的氨基酸由亮氨酸取代了异亮氨酸;在羊驼exon9引物前第22个碱基处也发生了A-G碱基替换现象,但这个碱基的突变发生在密码子的第3个碱基上,编码的氨基酸均为脯氨酸。在这些动物中只有羊驼为单胎动物,羊驼exon8核苷酸序列中A-G的碱基替换并引起编码氨基酸序列发生改变是否与羊驼繁殖性能有关还有待进一步研究。 张巧灵 姜俊兵 贺俊平 赫晓燕 耿建军 董常生关键词:羊驼 催乳素受体基因 繁殖性能 单碱基突变 内皮素3在不同毛色绵羊皮肤的表达与定位 被引量:1 2015年 旨在探索内皮素3(Endothelin 3,EDN3)在不同毛色绵羊皮肤的表达差异以及对毛色的影响。以不同毛色绵羊为研究对象,通过荧光定量PCR技术分析EDN3基因在不同毛色绵羊皮肤的表达量,通过免疫组织化学和ELISA方法对EDN3蛋白在不同毛色绵羊皮肤中的定位和表达进行研究。1)qRT-PCR结果显示,EDN3在白色绵羊皮肤的相对表达量为5.540 6±0.030 7,在黑色绵羊皮肤的相对表达量为1.005 8±0.062 0。黑白花色绵羊的白色区和黑色区的相对表达量分别为4.341 9±0.087 7和1.150 1±0.005 3。2)ELISA结果显示,EDN3在白色绵羊皮肤中的表达量为128.424 7±2.223 4,在黑色绵羊皮肤的相对表达量为25.114 4±3.248 3。在黑白花色绵羊白色皮肤中的表达量为93.945 3±7.562 2,黑色皮肤的表达量为28.606 0±9.295 9。3)免疫组织化学显示,EDN3在绵羊皮肤毛囊的毛基质、内外毛根鞘、毛乳头等区域均有表达。综上表明,EDN3在不同毛色绵羊皮肤中均可正常表达,且表达量存在显著差异。EDN3是维持黑色素细胞存在不可缺少的基因,但不影响绵羊黑白花的形成。 李亚楠 赵兵令 马淑慧 赫晓燕 范瑞文 王海东 耿建军 董常生关键词:绵羊 免疫组织化学 内皮素-1(ET-1)对羊驼皮肤黑素细胞增殖和黑素生成的影响 被引量:7 2011年 旨在研究内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)对羊驼皮肤黑素细胞(Melanocyte,MC)增殖和黑素合成的影响。本研究中,体外培养正常羊驼皮肤黑素细胞,观察不同浓度ET-1(0、0.1、1、10、100nmol.L-1)对羊驼皮肤黑素细胞增殖、黑素含量、内皮素受体B(Endothelin recepter B,EDNRB)基因、酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)基因、酪氨酸相关蛋白-1(Tyrosinase related protein 1,TRP-1)基因和表皮黑皮素-1受体(Melanocortin 1receptor,MC1R)基因表达量的影响。结果表明,ET-1处理羊驼皮肤黑素细胞3d后,羊驼皮肤黑素细胞增多,黑素含量、EDNRB、TRP-1和TYR基因表达量都明显增加(P<0.05),以10nmol.L-1组最为显著。ET-1能诱导羊驼皮肤黑素细胞增殖、树突增长,诱导EDNRB、TYR和TRP-1基因表达量增高,使黑素合成增加;同时诱导MC1R基因表达量增高,从而通过α-MSH信号通路对羊驼黑色素的生成产生影响。 耿建军 张杰 穆晓丽 白瑞 董彦君 白俊明 董常生关键词:ET-1 羊驼 黑素细胞 EDNRB MC1R 内皮素-3对羊驼黑色素细胞特征及细胞内毛色基因表达的影响 被引量:8 2013年 为了研究内皮素-3(Endothelin-3,EDN3)对羊驼皮肤黑色素细胞内毛色形成相关基因的影响。本研究在体外培养的羊驼皮肤黑色素细胞中添加不同浓度(0、10-9、10-8、10-7 mol·L-1)的EDN3,通过MTT法、紫外分光光度法、qRT-PCR和Western blotting技术分别检测黑色素细胞活力、黑色素产量、相关基因和蛋白(包括内皮素受体B(Endothelin receptor B,EDNRB)、KIT、小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associtated transcriptionfactor,MITF)和酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR))的表达情况。结果表明,在羊驼皮肤黑色素细胞添加EDN3 72h后,黑色素细胞呈双树突或三树突状,且细胞数量明显增加;在添加适当浓度10-8 mol·L-1时,细胞具有明显的增殖,细胞内EDNRB、KIT、MITF和TRY在转录水平和蛋白水平的表达量被上调,黑色素细胞产生黑色素的量也被上调,且与对照组相比,差异显著(P<0.05)。EDN3对羊驼黑色素细胞内黑色素的产生具有重要的调节作用。 耿建军 白俊明 范瑞文 杨姗姗 庞亚妙 董常生关键词:羊驼 黑色素细胞