符方勇 作品数:36 被引量:117 H指数:5 供职机构: 南方医科大学南方医院 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 国家临床重点专科建设项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
脂质体介导核因子κB诱捕物寡聚脱氧核苷酸对重症急性胰腺炎大鼠肝炎症因子mRNA表达和肝损伤的影响 被引量:1 2007年 目的:研究表明,重症急性胰腺炎及其伴发的急性呼吸窘迫综合征、多器官功能障碍综合征与多种细胞因子的作用有关,然而促炎性细胞因子、趋化因子、黏附因子等基因的活化和表达均受到核因子κB调控。观察脂质体介导核因子κB诱捕物寡聚脱氧核苷酸对重症急性胰腺炎SD大鼠肝部核因子κB活性及受其调控炎症基因mRNA表达和肝损伤的影响。方法:实验于2004-12/2006-03在南方医科大学南方医院消化研究所实验室完成。①实验材料:清洁级雄性SD大鼠50只,3个半月龄,体质量300~400g。引物和寡聚脱氧核苷酸由上海生工生物工程有限公司合成和全硫代修饰。②实验分组及过程:实验分为5组,每组10只。假手术组:开腹翻动胰腺,未诱导重症急性胰腺炎。其余大鼠以牛磺胆酸钠诱导SD大鼠建立重症急性胰腺炎模型,各组分别于建模后1h静脉注射裸寡聚脱氧核苷酸、脂质体/诱捕物寡聚脱氧核苷酸复合物、脂质体/错配寡聚脱氧核苷酸复合物和生理盐水。③实验评估:注射4h后应用电泳迁移率变动分析核因子κB的活性;利用反转录-聚合酶链反应法检测肝组织细胞间黏附因子1、白细胞介素1α、白细胞介素2、肿瘤坏死因子α、血管细胞黏附分子1mRNA表达;检测血丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸转氨酶水平。结果:①脂质体/诱捕物寡聚脱氧核苷酸复合物组血丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶低于生理盐水组、脂质体/错配寡聚脱氧核苷酸复合物组和裸寡聚脱氧核苷酸组(P<0.05);天门冬氨酸转氨酶高于假手术组。②电泳迁移率变动分析结果显示脂质体/诱捕物寡聚脱氧核苷酸复合物组核因子κB活性受到显著抑制,与假手术组比较活性依然较高(P<0.05)。③核因子κB特异性探针与核因子κB结合后,核因子κB与核蛋白DNA的结合活性显著被抑制,与非特异性SP1探针与核因子κB结合比较差异有显� 钟荣德 周杰 廖柳清 符方勇 李湘竑关键词:脂质体 抗IFITM1单克隆抗体的制备及检测 被引量:1 2014年 目的:制备抗干扰素诱导的跨膜蛋白-1(interferon-induced transmembrane protein 1,IFITM1)的单克隆抗体,为检测IFITM1及进一步研究其在结肠肿瘤发生过程中的作用提供实验基础。方法:以结肠癌患者的癌组织为材料,提取总RNA,以RT-PCR扩增得到IFITM1 cDNA序列,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后,克隆入pGEX-4T-3进行原核表达并纯化得IFITM1-GST;以该融合蛋白免疫BALB/c小鼠,淋巴细胞杂交瘤法制备单克隆抗体;采用ELISA、Western-blot及免疫组织化学法以制备的抗体检测结肠癌患者结肠癌组织中的IFITM1。结果:成功构建了IFITM1原核表达载体,获得了IFITM1-GST重组蛋白;制备得到了1株抗IFITM1单克隆抗体,腹水ELISA效价为1:30000,抗体亚类为IgG1,可用于ELISA、Western-blot及免疫组织化学法检测结肠癌患者结肠癌组织中的IFITM1。结论:获得了1株可用于ELISA、Western-blot及免疫组织化学法的抗IFITM1单克隆抗体2F-1,为进一步研究IFITM1在结肠肿瘤发生过程中的作用提供了实验基础。 刘灏 林智琪 符方勇 周忠信 刘正军关键词:结肠癌 单克隆抗体 MicroRNA-132通过诱导线粒体氧化应激障碍-铁死亡进程促进动脉粥样硬化 被引量:12 2022年 目的探讨MicroRNA-132(miR-132)在动脉粥样硬化斑块中的表达及生物学意义。方法收集在本医院行外周血管造瘘手术的动脉粥样硬化患者的斑块样本及周围正常血管样本各30例,分为实验组(n=30)与对照组(n=30);利用RT-qPCR验证miR-132在30例组织标本中的表达水平;采用脂质体转染技术上调人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中miR-132的表达,继而通过流式细胞及激光共聚焦技术分析过表达miR-132的HUVEC内活性氧(ROS)、ROS与线粒体的定位关系、线粒体活性氧超氧化物(mtROS)、线粒体膜电位状态(MMP)以及线粒体膜转换孔通透性(mPTP)的功能变化;通过ELISA检测HUVEC内线粒体氧化还原呼吸链复合体(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型)活性的状态;通过Westernblot检测铁死亡关键蛋白的表达水平。结果与正常血管样本(对照组)相比,miR-132在动脉粥样硬化斑块的表达水平显著上调(P<0.001);相比于正常HUVEC,脂质体转染的HUVEC内miR-132表达量显著上升(P<0.001),细胞内ROS明显增加(P<0.001),且大部分ROS与线粒体存在共定位关系;同时于正常HUVEC,miR-132过表达的HUVEC细胞内MMP下降(P<0.001)、mtROS升高(P<0.001)、线粒体活性氧mPTP更多开放(P<0.001),继而引起线粒体氧化还原呼吸链应激障碍,铁死亡关键蛋白GPX4显著下调(P<0.001)、氧化蛋白NOX4显著增多(P<0.001)。结论MiR-132可通过诱导线粒体氧化应激障碍-铁死亡进程促进动脉粥样硬化,有望成为动脉粥样硬化的治疗靶点。 刘泽鑫 曹赛 陈清 符方勇 程梅容 黄显莹关键词:动脉粥样硬化 氧化应激 人工血管透析通路远期并发症8例处理体会 被引量:4 2013年 作为长期血液透析通路的一种类型,近年来人工血管内瘘较广泛地应用于临床,而相应人工内瘘成形术后血管并发症也逐渐增多。南方医科大学南方医院血管外科2009年10月至2012年2月行人工血管内瘘成形术35例,20例获随访,其中8例出现并发症,经过相应处理后,7例均保持人工血管内瘘通畅。报告如下。 林智琪 万恒 陆京伯 周忠信 符方勇 叶玲 刘正军关键词:血液透析 CBL在血管外科教学中的应用 被引量:14 2012年 为克服传统教学模式的缺点、提高教学质量,将CBL引入血管外科教学。通过实践,探讨了CBL模式在血管外科教学中的应用及效果,并对CBL的难点与重点、优势与不足进行归纳总结,为培养临床型人才提供经验借鉴。 陆京伯 刘正军 林智琪 万恒 符方勇 叶玲 黄显莹 刘爱华关键词:CBL 血管外科 个体化临床教学在普通外科的应用体会 被引量:1 2010年 目的探讨针对不同授课对象在普通外科开展个体化教学的体会。方法明确实习医生、规范化培训医生、研究生以及进修医生的层次,进而制定教学目标,进行不同深度和方式的个体化教学。结果经上述教学改革,实习医师对普通外科常见疾病认识加深,培训医师的外科技能以及相关理论更扎实,研究生理论水平明显提高,而且进修医生对重大疾病及术后合并症的认识和处理水平也得到提高。结论个体化临床教学可大大提高不同授课对象的教学绩效。 周忠信 刘道洪 符方勇关键词:医学教育 普通外科 教学改革 个体化 Hybrid技术在复杂主动脉病变治疗中的应用 被引量:5 2015年 目的:探讨杂交技术在复杂主动脉病变应用。方法:回顾性分析2007年8月—2012年8月采用Hybrid技术治疗的12例复杂主动脉病变患者的临床资料,其中主动脉夹层9例,胸腹主动脉瘤3例,手术方式主要为各种人工血管旁路术联合覆膜支架腔内修复术。结果:所有患者均取得技术成功。1例主动脉夹层患者术后出现支架近心端1型内漏,未予处理,1例主动脉夹层患者围手术期死于严重纵膈内感染,余患者术后康复良好。8例患者随访3个月至2年,均存活良好,未发现内漏及其他并发症。结论:Hybrid技术是治疗复杂主动脉病变一种合理的可选择方案。 万恒 林智琪 刘灏 陆京伯 周忠信 符方勇 叶玲 黄显莹 刘正军关键词:杂交手术 注射毒品致假性股动脉瘤的急诊手术体会 目的探讨注射毒品致假性股动脉瘤(false femoral aneurys m,FFA)的急诊手术的体会。方法回顾性分析我院近10年来急诊收治注射毒品所致的58例FP患者临床资料,调查FFA手术方式和围手术期疗效。结果4... 潘春球 周忠信 符方勇文献传递 注射毒品致假性股动脉瘤的急诊手术体会 2009年 目的探讨注射毒品致假性股动脉瘤(FFA)的急诊手术的体会。方法回顾性分析我院近10年来急诊收治注射毒品所致的58例FP患者临床资料,调查FFA手术方式和围手术期疗效。结果46例(79.3%,46/58)行急诊手术,39例(84.8%,39/46)行近端髂外动脉+远端股浅股深动脉缝扎,其中4例(10.3%,4/39)术后出现患肢缺血(1例非手术处理恢复,2例再次手术经隧道旁路行人工血管重建,1例于当地医院截肢)。4例(8.7%,4/46)首次手术采用隧道旁路行人工血管重建,术后恢复正常。3例(6.7%,3/46)经瘤腔行人工血管重建,其中1例人工血管感染和深静脉血栓,去除人工血管后恢复。23例(50%,23/46)完成1年以上随访,其中18例动脉缝扎者中1例(5.6%,1/18)长期间歇性跛行,另5例人工血管重建者通畅。结论综合评估患肢的血供情况,规范注射毒品引致的FFA的手术抉择和操作流程,在手术中注意细节,可提高FFA的抢救成功率和减少并发症以及杜绝截肢的可能。 周忠信 潘春球 符方勇 林智琪关键词:毒品 假性股动脉瘤 急诊手术 改良式颈动脉内膜剥脱术治疗颈动脉狭窄:附2例报道 被引量:5 2017年 在传统颈动脉内膜剥脱术的基础上,我们通过两例病例报道来研究一种新型颈动脉内膜剥脱术,无需补片,改变颈动脉切口的方向以防颈内动脉再狭窄,2例患者术后恢复良好,无手术并发症。研究发现,与外翻式、补片式相比,改良式颈动脉内膜剥脱术既可防止再狭窄发生,又能缩短手术时间,具有明显可行性。 刘正军 陆京伯 刘灏 林智琪 黄显莹 万恒 符方勇 黄水传关键词:颈动脉狭窄 再狭窄