童吉宇
- 作品数：6 被引量：41H指数：3
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：广东省教育部产学研结合项目广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程农业科学更多>>
- 副溶血弧菌外膜蛋白ompK免疫磁珠检测方法的建立被引量：3
- 2013年
- 构建重组基因克隆表达副溶血弧菌外膜蛋白ompK并制备多克隆抗体,建立副溶血弧菌的免疫磁珠富集,结合化学显色检测方法。利用生物软件Primer 5设计副溶血弧菌ompK基因的引物,通过PCR扩增出ompK基因,并将其克隆至pET28a(+)原核表达载体,转化至大肠杆菌BL21进行优化表达。镍柱纯化表达产物,免疫小鼠,制备其多克隆抗体。Western blot鉴定重组蛋白,ELISA分析其免疫原性。间接ELISA检测多抗效价及交叉性,并与protein G磁珠偶联结合显色平板检测副溶血弧菌。结果显示,成功表达ompK蛋白;免疫小鼠获得特异性抗血清,效价为1∶64 000;Western blotting证明抗血清能与副溶血弧菌28 kD处条带特异性结合。制备的免疫磁珠敏感度最高能达到104CFU/mL。成功克隆表达副溶血弧菌外膜蛋白ompK并制备副溶血弧菌特异性鼠多克隆抗体,建立的免疫磁珠检测方法与显色平板法结合较传统的二次增菌法能够节省72 h,整个过程只需要传统方法时间的1/3;相比于常用的免疫学检测方法检测灵敏度提高两个数量级。
- 李雨辰闻一鸣童吉宇向军俭
- 关键词：副溶血弧菌多克隆抗体免疫磁珠
- 抗体技术研究进展(1):人源抗体技术被引量：5
- 2012年
- 100年来,抗体的发现为人类疾病诊断、治疗和有害物质的分析检测发挥了巨大的作用.特别是1975年发明了单克隆抗体技术以及1986年发明基因工程抗体技术,为研制特异性高、大量均一并大量生产抗体成为了现实,也使嵌合抗体、全人源抗体造福人类并产生巨大的经济效益.为了克服鼠源性单抗可诱发人抗鼠抗体(HA-MA),通过嵌合抗体、改构抗体、小分子抗体等技术和改良抗体与抗原结合的特异性,已成为抗体技术研究的主要发展方向,本文主要就抗体人源化及抗体分子小型化,抗体功能复合化两个部分的进展进行综述.
- 向军俭童吉宇王宏
- 关键词：抗体人源化抗体基因工程抗体小分子抗体
- MurA蛋白的表达及其多抗用于免疫磁珠富集单增李斯特菌的快速检测
- 目的:单增李斯特菌表面蛋白MurA可作为检查的标志分子,原核表达MurA,制备鼠多克隆抗体,将抗体与磁珠偶联制成单增李斯特菌免疫磁珠,将免疫磁珠富集技术结合选择性平板培养法,建立免疫磁珠-选择性平板快速检测技术,以缩短增...
- 童吉宇
- 关键词：单增李斯特菌
- 文献传递
- 免疫磁珠富集技术联合选择性培养基快速检测单增李斯特菌被引量：25
- 2013年
- 单增李斯特菌是一种危害极大的食源性致病菌，建立快速及特异的检测方法对于食品安全监控尤为重要。丈中联合免疫磁珠与选择性培养基对不同浓度（10^1～10^5CFU／mL）单增李斯特菌进行检测，并对3种李斯特菌、金黄色葡萄球菌及副溶血弧菌进行交叉试验；同时模拟食物污染，探索免疫磁珠．平板法检测样品的检测限以及该方法的最快检测时间。结果显示特异性免疫磁珠联合选择性平板法可检出浓度为10^3 CFU／mL及以上的单增李斯特菌；牛奶样品仅需6h增菌能被检出，检测限为0．7CFU／mL。联合使用免疫磁珠富集技术与选择性培养基，能在30h内完成对牛奶样品的检测，较国标法减少38h以上，且具有同等的灵敏度。
- 闻一鸣李志清童吉宇向军俭
- 关键词：单增李斯特菌免疫磁珠选择性培养基检测限
- 抗体技术研究进展(2):小分子抗体及功能复合化抗体被引量：1
- 2013年
- 随着分子生物学的发展,基因工程小分子抗体以及纳米抗体由于其分子质量小、结构简单、异源性低、组织穿透能力强及易于大量生产等优点而越来越受到人们的关注,并且其与毒素、酶、细胞因子等生物活性物质融合可产生功能复合化抗体——抗体融合蛋白,在肿瘤的诊断和治疗中具有广阔的应用前景.本研究主要就小分子抗体、功能复合化抗体以及纳米抗体近几年的发展与应用进行综述.
- 向军俭童吉宇王宏
- 关键词：小分子抗体抗体融合蛋白
- 原核表达MurA蛋白并制备其多克隆抗体用于免疫磁珠快速检测单增李斯特菌被引量：10
- 2014年
- 【目的】制备MurA多抗,结合免疫磁珠与选择平板进行单增李斯特菌的快速检测,建立单增李斯特菌的免疫磁珠快速检测方法。【方法】构建MurA的原核表达载体,转化大肠杆菌进行优化表达。镍柱纯化表达产物,质谱鉴定重组蛋白,再免疫小鼠,制备其多克隆抗体。用所获多抗制备免疫磁珠,建立单增李斯特菌免疫磁珠-选择性培养基检测方法,并对人工污染牛奶样品进行检测。【结果】在大肠杆菌中高效表达了分子量约为72 kD的可溶性融合蛋白,质谱鉴定其为MurA蛋白;免疫小鼠获得的抗血清效价达1:10 000,与伤寒沙门氏菌、副溶血弧菌、大肠杆菌及属内其它病原菌均无交叉;所建立的免疫磁珠-选择性培养基检测法可检出浓度为103 CFU/mL及以上的单增李斯特菌,仅与英诺克李斯特菌存在一定交叉反应;牛奶样品单次仅需9 h增菌就能被检出,较常规增菌时间缩短39 h;检测限为0.4 CFU/mL。【结论】表达并纯化得到高纯度的单增李斯特菌MurA蛋白,制备的鼠源多克隆抗体亲和力高,特异性好;建立了快速检测单增李斯特菌的免疫磁珠联合选择性培养基法,在灵敏度不变的情况下,实现24 h内成功对牛奶样品的检测,较国标法减少42 h以上。
- 童吉宇李志清闻一鸣李雨辰向军俭
- 关键词：单增李斯特菌多克隆抗体免疫磁珠
