石小丹
- 作品数:9 被引量:14H指数:2
- 供职机构:三峡大学生物与制药学院更多>>
- 发文基金:博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程农业科学理学更多>>
- 溶藻细菌H5对汉斯冠盘藻的溶藻特性研究
- 2013年
- 为了进一步研究溶藻细菌H5的溶藻特性,采用透析、乙醇沉淀、有机溶剂萃取、酸碱稳定性分析等方法探讨了H5溶藻活性物质的特性。结果表明,H5的溶藻活性物质的相对分子质量在3.5~7.0 ku之间,不能用乙醇沉淀法完全分离,具有较好的亲水性,在pH 4~7的酸性范围内溶藻能力较强。H5无菌滤液使汉斯冠盘藻(Stephanodiscus hantzschii)藻细胞丙二醛含量显著上升,SOD活力在处理0~196 h内急剧上升,随后下降,由此推测该活性物质能使藻细胞发生膜脂过氧化,从而破坏了膜的完整性。
- 刘国勇胡亚平石小丹聂小倩黄应平
- 关键词:溶藻细菌溶藻活性物质溶藻特性
- 金属离子对重组大肠杆菌发酵生产α-环糊精葡萄糖基转移酶的影响被引量:4
- 2014年
- 本文研究了金属离子对α-环糊精葡萄糖基转移酶发酵生产的影响。首先,采用单因素分析确定几种微量元素的最佳产酶浓度;其次,通过两水平析因试验确定了关键的影响因子及其最大响应区域,其分别是Mg SO4·7H2O,Fe SO4·7H2O,MnSO4·H2O;最后,通过Box-Benhnken中心组合试验建立数学模型,并采用响应面分析法获得了微量元素的最优配比参数为:MgSO4·7H2O 10.94 mmol·L-1,Fe SO4·7H2O 6.48 mmol·L-1,Mn SO4·H2O 0.51 mmol·L-1,Ca Cl2·5H2O 3 mmol·L-1。与对照组相比,酶活提高了1.4倍。
- 罗宇笛李啸张江石小丹
- 关键词:Α-环糊精葡萄糖基转移酶金属离子响应面设计
- 酮基还原酶基因工程菌发酵特性的研究
- 2015年
- 主要研究了基因工程大肠杆菌发酵生产酮基还原酶的发酵特性。结果表明,发酵12h菌体浓度达到最大,发酵12-22h菌体浓度稳定;发酵液pH值先平稳后急速上升至pH值8.6左右,之后趋于平稳;6~10h达到碳氮源利用高峰,14h后氨基酸态氮含量略微回升;乙酸于10h质量浓度最大,10~12h迅速下降后趋于平稳;酶活于12h达到最大值92.9U/mL,之后,利用流加氨苄的对照罐发酵,验证了发酵特性曲线的可靠性,菌体质粒稳定性得到提升,最大酶活优化为125.2U/mL。此研究对于产酮基还原酶的基因工程菌进一步的发酵优化具有指导意义。
- 张松李啸石小丹程奔
- 关键词:发酵特性酶活质粒稳定性
- 产酮基还原酶基因工程菌培养温度和转速条件的优化被引量:1
- 2016年
- 考察了27℃、30℃、33℃、37℃条件下酮基还原酶基因工程菌生长与产酶的影响。结果发现,37℃以下随着温度的升高,菌体产酶活性得到提升和提前,37℃条件下10 h最大酶活达到了157.5 U/m L。但是所有温度条件下的发酵后期,酶活都出现了下降,发酵后期转速的下降可能是一个原因。因此对37℃下不同恒定转速200 r/min、300 r/min、400 r/min、480 r/min的发酵条件进行了实验。结果发现,转速的恒定对于菌体酶活的积累具有重要意义,恒定转速480 r/min条件下酶活逐渐升高,20 h的酶活为217.1 U/m L。此研究确定了酮基还原酶基因工程菌发酵产酶的最佳温度和转速,并对酮基还原酶进一步的补料分批发酵优化具有指导意义。
- 张松李啸石小丹程奔
- 关键词:温度转速酶活
- 酮基还原酶活性检测方法的构建及其发酵过程特性研究
- 光学活性手性醇是一种重要的手性合成子,广泛应用于医药、农药、香精香料、食品添加剂、液晶等高附加值精细化学品合成中。生物催化潜手性羰基化合物的不对称还原,由于具有反应条件温和、转化率高和选择性高等优点,已成为获取光学活性手...
- 石小丹
- 关键词:大肠杆菌酶活测定分光光度计发酵过程
- 文献传递
- 发酵液中酮基还原酶活性测定方法的构建被引量:3
- 2014年
- 本研究以4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)为底物,还原型辅酶Ⅱ(NADPH)为辅酶,应用紫外-可见光分光光度计法测定发酵液中酮基还原酶活性,通过连续测定NADPH消耗量来计算酶活力,得到了最佳反应体系:NADPH浓度为0.2 mmol/L,COBE浓度为1.0 mmol/L,磷酸缓冲溶液浓度为100 mmol/L、p H值为6,反应温度为40℃。在此条件下平行检测5次酶活,相对标准偏差(RSD)为0.48%。此方法操作简便,耗时短,精确度高,重复性好,可作为发酵液中酮基还原酶活性测定方法加以推广。
- 石小丹李啸罗宇笛谈亚丽
- 关键词:酶活测定
- 溶藻细菌H5的分离、鉴定及溶藻特性研究被引量:2
- 2012年
- [目的]分离和鉴定溶藻细菌,研究其溶藻特性,为进一步研究溶藻细菌对水华的治理作用提供帮助。[方法]从香溪河春季水华集聚区水体中分离得到1株有高效溶藻效果的菌株(H5),采用16S rDNA序列相似性分析和Biolog微生物自动鉴定系统等对细菌进行鉴定。采用直接计数法,研究了其对汉斯冠盘藻(Stephanodiscus hantzschii)、倪氏拟多甲藻(Peridiniopsis niei)、具尾逗隐藻(Komma cau-data)的抑制效果,及对汉斯冠盘藻的溶藻作用方式。[结果]根据生理生化及16S rDNA序列分析鉴定,H5属于纺缍形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)。该菌对汉斯冠盘藻、倪氏拟多甲藻、具尾逗隐藻的溶藻率最高为71.3%,最低为57.4%。培养滤液、热处理培养滤液对汉斯冠盘藻的生长具有明显抑制作用,而细菌无细胞提取物无溶藻能力。[结论]该菌对汉斯冠盘藻有较强的溶藻效果,且是通过分泌溶藻物质溶藻。
- 刘国勇胡亚平石小丹聂小倩黄应平
- 关键词:溶藻细菌芽孢杆菌水华
- 均匀设计法优化重组大肠杆菌产酮基还原酶培养基被引量:1
- 2015年
- 系统研究了典型碳源、氮源、金属离子、磷酸盐以及初始p H值等因素对重组大肠杆菌产酮基还原酶的影响。单因素试验结果表明,甘油、酵母浸粉FM888、酵母蛋白胨FP101、Mg SO4·7H2O以及离子浓度为0.1 mol·L-1 p H值为T7的磷酸缓冲液对菌体生长以及酶活的表达有一定的促进作用。通过均匀设计试验及分析得到培养基的最优配方:甘油6.86 g·L-1,FM888 19.53g·L-1,FP101 8.37 g·L-1,Mg SO4·7H2O 2.50 g·L-1,K2HPO414.96 g·L-1,KH2PO47.34 g·L-1。优化条件下酶活为431.21 U·m L-1,比优化前(70.25 U·m L-1)提高了5.13倍。此研究可为工业化大生产提供理论指导。
- 石小丹李啸张松罗宇笛谈亚丽
- 关键词:重组大肠杆菌培养基优化均匀设计
- 采用计算流体力学仿真优化50L发酵罐搅拌系统被引量:2
- 2015年
- 采用计算流体力学软件Fluent对50 L全自动发酵罐内不同两层桨叶组合的搅拌效果进行气液两相流模拟。针对发酵罐模拟了4种桨叶组合,对比分析4种组合的速度云图,剪切速率云图以及气含率分布云图,以此优化出一种搅拌效果较好的桨型组合。根据模拟结果,初步判断组合B的混合效果最好;试验验证组合B的酶活达到193.20 U·m L-1,与原始组合相比,提高了1.1倍。
- 罗宇笛李啸石小丹
- 关键词:计算流体力学网格划分