王陈继
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
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- 一种新的甘露糖结合凝集素——朱顶兰凝集素基因的克隆及序列分析
- 2004年
- 运用同源克隆的方法设计简并引物，通过3’和5’RACE技术，从石蒜科植物朱顶兰(Amaryllis vittata Ait)总RNA中克隆了编码此凝集素(AVA)的全长cDNA序列。该基因全长686bp，起始密码子位于第41～43bp，终止密码子位于515～517 bp处，开放阅渎框长474bp，编码158个氨基酸，包含信号肽序列、成熟蛋白序列和C-末端剪切序列的前体蛋白。成熟蛋白由109个氨基酸残基组成，分子量为11．9kD。成熟蛋白在氨基酸水平上与雪花莲凝集素、水仙凝集素、石蒜凝集素和君子兰凝集素分别有73．4％、85.3％、80．7％和83．5％的同源性；朱顶兰凝集素的分子模式显示其与雪花莲凝集素有极其相似的三维结构；在Blocks数据库中检索AVA蛋白氨基酸序列的结构域，发现有3个凝集素功能结构域，并具有3个典型的甘露糖专一结合位点盒(QDNY)。
- 吴传芳安洁何小佳邓洁洪志霞刘超吕鸿周李宜瑾王陈继陈放鲍锦库
- 关键词：同源克隆
- 水稻巯基蛋白酶抑制剂的圆二色谱研究被引量：1
- 2005年
- 水稻巯基蛋白酶抑制剂(CPI)圆二色性谱(CD)显示206nm和222nm处的双负峰,CPI分子以α 螺旋构象为主;当CPI与木瓜蛋白酶等摩尔结合后,CPI完全丧失抑制活性,复合物CD谱发生显著变化,α 螺旋含量降低.CPI具有较高的结构稳定性,但在100℃处理时间延长以及pH向酸碱两极变化时,其CD谱发生较大改变,α 螺旋含量减少;而抑制活性仅在pH>9时逐渐下降,在酸性条件下保持不变.用不同试剂修饰CPI分子中的巯基和二硫键,CPI的活性不受影响;DTT、PCMB修饰CPI,其CD谱发生显著变化,NEM修饰CPI,其CD谱变化甚微.4mol/L的脲中,CD谱仅显示206nm负峰、214nm和225～235nm处新的负肩,并在240～250nm之间出现新的负峰,分子中无规卷曲增加,CPI活性未受影响;经NBS修饰,CPI分子中α 螺旋减少,无规卷曲增加较多,CPI完全丧失抑制活性.
- 荣艳珍赵曦常丽青高顺李宜瑾吕鸿周王陈继鲍锦库
- 关键词：抑制剂分子修饰抑制活性圆二色性
- 金属离子和变性条件对野花生豆凝集素活性和构象的影响被引量：1
- 2005年
- 野花生豆凝集素在pH7.0和pH5.0缓冲体系中,用EDTA去除其金属离子,CML凝血活性下降.Ca2+、Mg2+、Mn2+、Zn2+可使去除金属离子CML活性基本恢复到天然水平,表明这些二价金属离子为CML活性所必需.研究不同温度和不同浓度盐酸胍条件下CML的圆二色谱、荧光光谱及其凝血活性的变化,结果表明CML含有较多β 折叠,具有较强的抗变性能力;脲变性的时间扫描荧光光谱证实了CML变性过程的阶段性.
- 赵曦荣艳珍常丽青高顺吴传芳李宜瑾王陈继鲍锦库
- 关键词：野花生豆凝集素金属离子圆二色谱荧光光谱生物学活性
- 温度和酸碱度对黄精凝集素Ⅱ生物学活性与构象的影响研究被引量：2
- 2003年
- 采用圆二色谱和荧光光谱 ,研究了黄精凝集素Ⅱ (PCLⅡ )在不同温度及不同pH值时 ,其活性和分子构象变化的关系 ,结果表明 :PCLⅡ具有较强的温度和酸碱度的耐受性 ,但在80℃ ,pH 2 ,pH 4和 pH 12时 ,其分子构象发生较大变化 。
- 吕辉高顺荣艳珍赵曦安洁段真王陈继鲍锦库
- 关键词：温度酸碱度圆二色性生物学活性分子构象
- 朱顶红凝集素的分子克隆和序列测定
- 朱顶红凝集素(Amaryllis vittata Agglutinin AVA)是一种来源于石蒜科植物朱顶红的具有多重生物学活性的甘露糖结合蛋白,自从1987年第一个石蒜科雪花莲凝集素被发现以来,石蒜科植物凝集素因其重要...
- 吴传芳王陈继常丽青荣艳珍高顺赵曦曾仲奎鲍锦库
- 文献传递
- 玉帘凝集素的性质研究、分子克隆和序列分析
- 玉帘凝集素(Zephyranthes Canadia Agglutinin,ZCA)是一种具有甘露糖结合活性的石蒜科凝集素,具有很强的兔血凝集活性并能有效降低Ⅱ型人类单纯疱疹病毒(HSP-Ⅱ)对Vero细胞(非洲绿猴肾细...
- 吕辉赵曦段真安洁王陈继荣艳珍曾仲奎鲍锦库
- 文献传递
- 风雨花甘露糖结合凝集素基因克隆与序列分析被引量：4
- 2004年
- 单子叶甘露糖结合凝集素具有抑制人类免疫缺陷病毒的活性。风雨花 (Zephyranthes grandiflora)球茎中含有亚基分子量为 12 KD的甘露糖结合凝集素 (ZGA)。运用同源克隆的方法设计简并引物 ,通过 3'和 5 'RACE技术 ,从风雨花总 RNA中克隆了编码此凝集素的全长 c DNA序列 ,其开放阅读框长 4 92 bp,编码 16 4个氨基酸 ,包含信号肽序列、成熟蛋白序列和 C-末端剪切序列的前体蛋白。成熟蛋白由 10 6个氨基酸残基组成 ,分子量为 11.6KD。成熟蛋白在氨基酸水平上与石蒜凝集素、雪花莲凝集素、水仙凝集素和君子兰凝集素分别有 71.8%、81%、81.8%和 84 .5 %的同源性 ;在 Blocks数据库中检索 ZGA蛋白氨基酸序列的结构域 ,发现有 3个凝集素功能结构域 ,并具有 3个典型的甘露糖专一结合位点盒 (QDNY)
- 鲍锦库吴传芳安洁高顺赵曦常丽青荣艳珍王陈继陈放
- 关键词：甘露糖结合凝集素KD蛋白序列人类免疫缺陷病毒基因克隆前体蛋白
- 变性剂和巯基修饰对黄精凝集素II构象和活性的影响被引量：1
- 2003年
- 采用圆二色谱、荧光光谱,研究了黄精凝集素II(PolygonatumcyrtonemaHua.LectinII,PCLII)在4mol/L和6mol/L盐酸胍中,以及巯基修饰后,其活性和分子构象的变化关系.研究结果表明:PCLII是一种稳定的蛋白质,巯基修饰剂虽不影响其活性,但可使其分子构象发生变化,去除修饰剂后其结构部分能够恢复.在4mol/L盐酸胍中,PCLII活性及构象可发生很大变化,去除盐酸胍后其活性恢复;在6mol/L盐酸胍中,呈现典型的无规卷曲构象,活性完全丧失,去除盐酸胍后活性仍不能恢复,表明活性中心已遭到不可逆的破坏.
- 吴传芳常丽青赵曦荣艳珍高顺段真安洁顾莹王陈继滕蕾龚萌吕辉陈放鲍锦库
- 关键词：变性剂巯基修饰分子构象
