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rhEPO对氧化应激时心肌细胞及心肌梗死后心脏的保护作用被引量：1: 2013年; 目的初步探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对氧化应激时乳鼠心肌细胞及心肌梗死后小鼠心脏的保护作用。方法建立乳鼠心肌细胞的氧化应激损伤模型后,加入rhEPO进行干预。以噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术(FCM)检测rhEPO对心肌细胞凋亡的影响。同时应用Western blotting检测凋亡效应酶胱天蛋白酶-3(caspase-3)、Bax、Bcl-2蛋白的表达水平。将小鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(MI组)和rhEPO组,通过结扎左冠状动脉前降支建立小鼠心梗模型,14 d后取心脏组织,HE染色观察rhEPO对心肌梗死面积的影响。结果在氧化应激损伤过程中,rhEPO可以明显降低心肌细胞的凋亡率,下调caspase-3和Bax蛋白的表达,上调Bcl-2蛋白的表达。HE染色结果显示,rhEPO可以明显缩小小鼠心肌梗死面积。结论在氧化应激时,rhEPO可对抗过氧化氢引起的心肌细胞损伤;rhEPO还可缩小小鼠心肌梗死面积。; 王福刘善文李彬耿海华孙帅李睿肖洁季晓平; 关键词：重组人促红细胞生成素心肌细胞氧化应激损伤心肌梗死

大鼠骨髓间充质干细胞exosome提取及其心肌细胞H9C2靶向作用的实验探索被引量：1: 2013年; 目的研究缺氧预处理条件下，骨髓间充质干细胞分泌的exosome的特征；探索心肌细胞H9C2是否骨髓间充质干细胞exosome作用的靶细胞之一，以及H9C2对骨髓间充质干细胞exosome的摄取是否随时间有一定的变化特征。方法采用分步离心结合蔗糖／D，0垫超速离心方法分离提取干细胞分泌的exosome囊体颗粒。采用透射电镜和Westernblotting法鉴定提取物是否为exosome。采用图像分析软件Image—ProPlus6．0对透射电镜结果中exosome数据进行采集，采用excel和统计软件GraphPad5．0对采集得到的exosome数据进行统计，以明确exosome的直径分布区间和平均半径等特征。采用绿色荧光染料PKH-67标记exosome，将标记的exosome与H9C2共孵育，观察exosome能否被，22肌细胞H9C2摄取。将exosome与H9C2共孵育的不同时间段，观察1-19C2对exosome的摄取随时间变化的特征。结果提取物呈微型囊体结构，形态近似球形或者椭球形，大小均一，均匀分散的分布在视野中，提取物均阳性表达CD63和CD9分子，且较CD63分子，提取物更高表达CD9分子；缺氧预处理条件下，骨髓间充质干细胞exosome直径的集中分布范围是20—60nm，半径为（17．03±0．40）nm；exosollle与心肌细胞H9C2共孵育结果显示，仅实验组H9C2细胞质内可见大量的exosome绿色荧光颗粒；tt9C2摄取exo—some的时间特征显示，对照组4个亚组中H9C2对exosomes的摄取情况无明显不同。实验组各亚组显示，exo—some与H9C2共孵育1h，H9C2细胞质中即开始观察到标记的exosome；共孵育1．5～2．5h，H9C2细胞质中exo—some绿色荧光颗粒数量较共孵育其他时间段的多，荧光强度较共孵育其他时间段的强。结论成功分离提取到了缺氧预处理条件下的大鼠骨髓间充质干细胞exosolne；心肌细胞H9C2是骨髓问充质干细胞exosome生物学作用的靶细胞；H9C2对骨髓间充质干细胞exosome的摄取情况随时�; 刘善文王福李彬耿海华李彩娥许哲李睿肖洁张森季晓平; 关键词：缺氧预处理骨髓间充质干细胞 EXOSOME H9C2 缺血再灌注损伤

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王福

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