王晓清
- 作品数：9 被引量：15H指数：3
- 供职机构：兰州大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技型中小企业技术创新基金更多>>
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- HBsAg特异性核酸适配体的筛选
- 核酸适配体是一种非天然结构、能折叠的单链核酸,能捕捉特定的分子。它是利用指数富集的配基系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SE...
- 王晓清
- 关键词：核酸适配体SELEXELISA
- 文献传递
- 牛磺酸调控妊娠子宫平滑肌收缩作用的实验研究
- 袁国强胡雪梅李菊香葛万文王晓清包军胜
- Tau具有调节离子通道、松弛动脉平滑肌和抗氧化损伤等多种生物学功能，作用靶点十分广泛。但到为止，国内外有关Tau对平滑肌收缩作用的研究多集中于肠平滑肌以及动脉血管。以前的研究显示Tau在大鼠和人的子宫内以高浓度分布，而随...
- 关键词：
- 关键词：子宫平滑肌收缩妊娠牛磺酸安胎药
- HIV-P24核酸适配体的筛选被引量：5
- 2012年
- 目的利用SELEX技术筛选HIV-P24的核酸适配体,为艾滋病的诊断和治疗奠定基础。方法以重组P24为筛选靶,用SELEX技术从随机寡核苷酸库中筛选与HIV-P24结合的寡核苷酸,利用凝胶阻滞实验鉴定第12轮筛选到的寡核苷酸与HIV-P24的结合,再用Dot-blot法筛选出与HIV-P24结合的核酸适配体,并检测核酸适配体识别HIV-P24的特异性。结果 Dot-blot筛选到5条与HIV-P24有较强结合能力的核酸适配体,且均为不同的序列。特异性检测显示,18和26号配体只与HIV-P24特异性结合,而与人血清白蛋白、牛血清白蛋白和脱脂奶粉均无明显结合。结论成功筛选到2条特异结合HIV-P24的核酸适配体,为其应用于艾滋病诊断和治疗提供了实验基础。
- 张宁毛爱红马瑾廖世奇张丽琼王晓清马君
- 关键词：SELEX技术核酸适配体
- 同时检测HIV抗原(P24)和基因降低窗口期的应用技术研究
- 廖世奇袁红霞田彩平马瑾毛爱红王黎何贵山王怡云王晓清张宁陈桦庞鑫张洁渝张丽琼唐文茹魏政丽
- 该课题采用核酸信标配基p24抗原检测技术和基因扩增技术对HIV- p24抗原和基因同时进行实时定量-PCR检测。首次研制艾滋病抗原p24和基因同时检测技术，该技术可提高对艾滋病病毒检测的灵敏度和特异性，达到缩小窗口期的目...
- 关键词：
- 关键词：艾滋病病毒检测基因组学
- 肿瘤Notch信号通路的研究进展被引量：3
- 2018年
- Notch基因编码一类高度保守的细胞表面受体,决定胚胎发育和成熟组织中的细胞命运,是相邻细胞之间通讯进而调控细胞发育、增殖和凋亡的重要通路。多种肿瘤的发生与进展和Notch信号通路异常有关。针对不同肿瘤,有效调控靶向Notch的参与者与靶分子,对抗肿瘤治疗具有重要研究意义。
- 王晓清袁国强潘亚文
- 关键词：NOTCH信号通路肿瘤
- 抗体Fc片段特异寡核苷酸配基介导的实时定量免疫PCR被引量：1
- 2012年
- 目的:利用小鼠IgG抗体Fc片段高特异、高亲和寡核苷酸配基,构建实时定量免疫PCR检测方法,提高抗体检测的灵敏度。方法:用SELEX技术从随机寡核苷酸文库中筛选抗体Fc片段特异寡核苷酸配基,设计合成信标序列,通过不对称PCR法,制备IgG Fc片段的核酸信标配基分子;32P标记核酸信标配基,采用琼脂糖凝胶阻滞双显色法鉴定核酸信标配基与IgG Fc片段结合的亲和力和特异性;制备IgG Fc特异性寡核苷酸信标配基-抗体复合检测分子,构建小鼠IgG Fc片段特异核酸信标配基介导的实时定量免疫PCR检测方法。结果:制备了IgG Fc片段的核酸信标配基分子;凝胶阻滞放射自显影和考马斯亮蓝二次染色结果显示该核酸信标配基分子与IgG Fc片段具有高度亲和力和活性,而且只与非变性IgG结合,与变性IgG不结合;IgG Fc片段的特异核酸信标配基与IgG结合形成复合检测分子,有效完成了信号传递和实时定量PCR信号放大过程。结论:初步建立了一种全新的核酸信标配基介导的免疫PCR检测方法,可有效提高现有IgG类抗体免疫检测的灵敏度和特异性。
- 张伟华王晓清廖世奇王黎马瑾田彩平马君
- 关键词：SELEX
- SELEX筛选中不同筛选介质的富集效果比较被引量：2
- 2012年
- 目的:比较SELEX筛选中不同筛选介质的富集效果,为高通量筛选奠定基础。方法:以乙肝表面抗原(HBsAg)为靶蛋白,采用两种不同的筛选介质:硝酸纤维素膜和环氧树脂,分别将HBsAg包被其上,利用SELEX技术从随机单链DNA文库中筛选得到富集的亲和配基库,最后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和实时荧光定量PCR检测各自的富集效果。结果:经过16轮筛选,发现实时荧光定量PCR时,硝酸纤维素膜空白管与阳性管的循环阈值均在14循环,无明显区别;而环氧树脂空白管与阳性管的循环阈值区别明显,前者是25循环,后者是18循环。结论:在SELEX筛选中,以环氧树脂为筛选介质更易富集到与靶蛋白特异性结合的核酸适配体。
- 田育佼王晓清曾家豫武伟国张伟华马瑾李光迪廖世奇
- 关键词：适体核苷硝酸纤维素膜乙型
- 靶标替换消减SELEX技术筛选小鼠IgG Fc片段的DNA配基及其活性鉴定被引量：4
- 2011年
- 建立高特异性和亲和力的小鼠IgGFc片段DNA配基筛选方法.采用几种小鼠IgG亚类(鼠抗HBV-IgG、小鼠IgG的Fc,IgG1,IgG2a)作为靶分子,利用靶标替换消减SELEX筛选方法进行16轮筛选.利用dot-blot,高压液相色谱以及凝胶阻滞(EMSA)方法对所得配基进行活性鉴定.经过16轮筛选,得到了与小鼠IgG不同亚类相同Fc片段特异性结合的寡核苷酸配基(IgG的Fc配基).特异性分析显示,此配基只与小鼠IgG特异性结合,与胰蛋白酶、小牛血清白蛋白、人血清均无明显结合.高压液相色谱和凝胶阻滞结果均说明了配基和靶蛋白具有特异结合.通过使用靶标替换消减SELEX技术可以有效得到小鼠IgG不同亚型相同部分Fc片段的特异性结合配基,为不同分子相同部位的分子作用机制,以及应用于小鼠抗体亲和层析的研究奠定基础.
- 陈桦葛廷王小琦廖世奇马瑾王黎庞鑫张宁张丽琼张洁瑜王晓清
- 关键词：SELEX特异性
- 抗体Fc片段特异寡核苷酸配基介导的实时定量免疫PCR
- 目的:利用小鼠IgG抗体Fc片段高特异、高亲和寡核苷酸配基,构建实时定量免疫PCR检测方法,提高抗体检测的灵敏度.方法:用SELEX技术从随机寡核苷酸文库中筛选抗体Fc片段特异寡核苷酸配基,设计合成信标序列,通过不对称P...
- 张伟华王晓清廖世奇王黎马瑾
