王旭东
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞钙调素基因表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:观察TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)细胞钙调素(CaM)mRNA表达的影响,探讨TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞的作用机制。方法:采用荧光定量PCR技术检测TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞CaMmRNA表达的影响。结果:与空白对照组相比较,高剂量(1×10^(-4)mol/L)、中剂量(1×10^(-5)mol/L)及低剂量(1×10^(-6)mol/L)的TCDCA作用组均能够极显著(P<0.01)的促进大鼠肺泡巨噬细胞CaMmRNA的表达量。结论:TCDCA能够促进大鼠肺泡巨噬细胞CaMmRNA的表达。
- 王旭东毛伟关红李培锋周蕾
- 关键词：牛磺鹅去氧胆酸钙调素
- 牛磺胆酸对NR8383细胞ERK活性的影响被引量：2
- 2016年
- 在采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)法确定牛磺胆酸(taurocholic acid,TCA)、脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)和PKC抑制剂(G6983)对细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK)mRNA水平影响的基础上,采用Western-blot法测定TCA对LPS介导的NR8383细胞pERK、ERK蛋白水平相对表达量的影响。结果显示:TCA可显著降低LPS介导的pERK、ERK含量(P<0.05),G6983可显著减低pERK、ERK的表达量,G6983也可降低LPS对ERK的活化作用。TCA通过影响PKC通路,而降低LPS介导的NR8383细胞pERK、ERK含量。
- 张子英王旭关红王旭东周蕾李培锋王彩云
- 关键词：牛磺胆酸细胞外信号调节激酶磷酸化细胞外信号调节激酶脂多糖
- RNA 干扰抑制大鼠肺泡巨噬细胞 NR8383 TGR5受体表达的研究被引量：3
- 2014年
- 应用RNA干扰技术建立大鼠肺泡巨噬细胞NR8383TGR5基因阻断模型。采用阳离子脂质体法,将TGR5siRNA(Santa Cruz Biotechnology)转染到NR8383细胞中,实时荧光定量PCR和Western blot分别检测NR8383细胞中TGR5mRNA和蛋白水平表达变化。结果显示,与对照组比,转染TGR5siRNA组可明显降低NR8383细胞TGR5mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。RNA干扰技术能够特异性的高效阻断NR8383细胞中TGR5基因的表达,为深入探讨TGR5的生物学功能提供了可靠方法和新途径。
- 刘倩史琳凯李磊张子英王旭东李培锋
- 关键词：RNA干扰
- 胆汁酸膜受体TGR5真核表达载体的构建及在细胞中的表达被引量：3
- 2014年
- 试验旨在构建胆汁酸膜受体TGR5真核表达载体,转染293T细胞并在其中表达。用RT-PCR技术从胎盘组织中得到TGR5基因,克隆至真核表达载体pCMV-EGFP中。双酶切和测序鉴定正确后,将pCMV-EGFP-TGR5瞬时转染293T细胞,并采用实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测TGR5的表达。结果显示,本试验构建了TGR5真核表达载体pCMV-EGFP-TGR5;转染293T细胞后,荧光显微镜观察到绿色荧光表达;实时荧光定量PCR检测TGR5表达量显著增加;Western blotting结果显示有目的蛋白表达。结果表明,真核表达载体pCMV-EGFP-TGR5构建成功,转染293T细胞后在基因、蛋白水平上均表达TGR5受体。
- 史琳凯刘倩张子英刘畅王旭东丁月霞李培锋
- 关键词：克隆真核表达载体构建
