王子龙
- 作品数:20 被引量:13H指数:2
- 供职机构:广西大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 编码糖基水解酶家族1的β-葡萄糖苷酶基因及其应用
- 一个来自链霉菌的编码糖基水解酶家族1的β-葡萄糖苷酶的基因及其应用,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述基因编码的β-葡萄糖苷酶S-bgl4,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,该酶能够在分解纤维二糖中应...
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- 文献传递
- 一种双酶法制备甜菊醇的方法
- 本发明属于天然化合物的生物合成技术领域,具体涉及一种双酶法制备甜菊醇的方法。一种双酶法制备甜菊醇的方法,以甜菊糖苷为底物,将其用水或者缓冲液配制成溶液,按照顺序加入β‑葡萄糖苷酶S‑bgl4和Sbgl,反应1‑12h,即...
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- 文献传递
- 一种双酶法制备甜菊醇的方法
- 本发明属于天然化合物的生物合成技术领域,具体涉及一种双酶法制备甜菊醇的方法。一种双酶法制备甜菊醇的方法,以甜菊糖苷为底物,将其用水或者缓冲液配制成溶液,按照顺序加入β‑葡萄糖苷酶S‑bgl4和Sbgl,反应1‑12h,即...
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- 文献传递
- 一种编码木糖异构酶的基因及其应用
- 一种编码木糖异构酶的基因Pgi,属于基因工程技术领域。该基因含有SEQ ID NO.1的核苷酸序列,该基因编码的蛋白质含有SEQ ID NO.2的氨基酸序列,该蛋白质用于以木糖为原料生产木酮糖或以葡萄糖为原料生产果糖。本...
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- 对异黄酮糖苷高催化效率的β-葡萄糖苷酶的功能鉴定
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- 编码糖基水解酶家族3的β-葡萄糖苷酶基因及其应用
- 本发明涉及一个编码糖基水解酶家族3的β-葡萄糖苷酶的基因及其应用,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述基因编码的β-葡萄糖苷酶Sbgl,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,所述基因编码的β-葡萄糖苷酶Sb...
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- 乳酸片球菌AS1.2696来源的α-L-鼠李糖苷酶酶学性质分析被引量:2
- 2019年
- 克隆表达乳酸片球菌AS1.2696菌株中的α-L-鼠李糖苷酶基因,研究重组酶的酶学性质。分析乳酸片球菌AS1.2696菌株的全基因组序列,聚合酶链式反应扩增目的基因,以p SE380为表达载体构建重组质粒p SE-prha2和p SE-prha3,在大肠杆菌Escherichia coli XL-blue进行表达,使用镍亲和层析纯化重组蛋白,研究重组酶PRHA2、PRHA3的酶学性质。结果表明,重组酶PRHA2的最适pH值和温度分别为5.0和60℃,Km值为(3.039±0.581)mmol/L,Vm a x值为(2.032±0.186)μmol/(min·mg);PRHA3的最适p H值和温度分别为5.5和45℃,Km值为(2.797±0.132)mmol/L,Vmax值为(113.35±1.485)μmol/(min·mg)。PRHA2和PRHA3能够水解人工底物对硝基苯基-α-L-吡喃鼠李糖苷(p-nitrophenyl-α-L-rhamnopyranoside,p NPR)以及α-1,6键的橙皮苷、芦丁;PRHA2对4-硝基苯基-β-D-阿拉伯糖苷(4-nitrophenyl-β-L-arabinoside,p NPA)有一定的水解活性;PRHA3对淫羊藿苷、淫羊藿次苷I、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C这几种物质C-7位的葡萄糖糖苷键有较弱的水解作用。此外,PRHA3能够水解朝藿定C的C-3位以α-Rha(2→1)α-Rha连接的外侧的鼠李糖苷键,在食品及医疗方面具有一定的应用价值。
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- 关键词:乳酸片球菌克隆表达酶学性质
- 对异黄酮糖苷高催化效率的β-葡萄糖苷酶的功能鉴定
- <正>β-葡萄糖苷酶是纤维素酶系的重要组份,随着人们对纤维素酶系研究的深入而受到重视。近年来,β-葡萄糖苷酶在水解由β糖苷键连接的天然糖苷化合物以及合成新的糖衍生物方面同样引起学者的巨大兴趣。本研究从广西武鸣糖厂周围被榨...
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- 文献传递
- 差异柠檬酸杆菌GXW-1 β-葡萄糖苷酶的酶学性质及分子改造被引量:7
- 2017年
- 【目的】筛选鉴定1株产β-葡萄糖苷酶的菌株,克隆、表达该菌株中的β-葡萄糖苷酶基因,研究重组酶的酶学性质并进行分子改造。【方法】在自然界中采集土样,筛选到1株具有β-葡萄糖苷酶活性的菌株,对野生菌进行16S rDNA鉴定,比对分析Gen Bank数据库中与野生菌同属的β-葡萄糖苷酶基因序列,设计简并引物PCR扩增基因保守区;设计引物扩增目的基因,以pQE30为表达载体构建重组质粒,转化至大肠杆菌中进行诱导表达;采用镍亲和层析对重组酶进行纯化,研究其酶学性质;采用易错PCR和定点随机突变相结合的方法对野生型β-葡萄糖苷酶进行分子改造。【结果】一个来自于差异柠檬酸杆菌GXW-1的β-葡萄糖苷酶基因被克隆并在大肠杆菌中表达。酶学性质研究结果表明该β-葡萄糖苷酶CBGL的最适温度为45°C,最适p H为6.0,V_(max)值是(0.1704±0.0073)μmol/(mg·min),K_(cat)值为(0.2380±0.0102)/s。CBGL能水解α-pNPG、甜菊苷、黄豆苷和染料木苷。对野生酶进行分子改造,获得V_(max)是野生酶2.54倍的突变体W147F。【结论】CBGL不仅具有β-1,4-糖苷键水解能力,还可能具有一定的α-糖苷键水解酶活性。此外,CBGL还能够水解天然底物甜菊苷、黄豆苷和染料木苷。这些特性表明该β-葡萄糖苷酶在理论研究及在工业中有一定的应用价值。
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- 关键词:Β-葡萄糖苷酶酶学性质
- 一种编码碱性β-葡萄糖苷酶基因及其应用
- 本发明公开了一个编码碱性β-葡萄糖苷酶基因和应用,本碱性β-葡萄糖苷酶基因Pbgl含有SEQ ID NO.1的核苷酸序列,并提供了所述基因编码碱性β-葡萄糖苷酶的氨基酸序列,该序列如SEQ ID NO.2所示。本碱性β-...
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- 文献传递