王亚妮
- 作品数：31 被引量：70H指数：4
- 供职机构：西北大学更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金西安市科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学语言文字更多>>
- 圆锥角膜相关成纤维细胞的培养与鉴定
- 2019年
- 目的分离、培养并鉴定人圆锥角膜相关成纤维细胞(HKCs)。方法采用组织块贴壁法培养HKCs和正常人角膜成纤维细胞(HCFs),倒置相差显微镜和电子显微镜下分别观察细胞形态和超显微结构,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增生,Westernblot法检测成纤维细胞标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及α1-1型胶原蛋白(COL1A1)和α1-3型胶原蛋白(COL3A1)蛋白的表达水平。结果与HCFs相比,HKCs生长速度较快,胶原纤维变细减少,线粒体肿大,嵴消失,高尔基体明显扩张,内质网严重肿胀。培养后不同时间点2种角膜成纤维细胞A值比较,差异均有统计学意义(F组间=5023.13,P<0.01;F时间=38518.16,P<0.01),其中同一时间点HKCs细胞A值均明显大于HCFs细胞A值,差异均有统计学意义(均P<0.01)。HKCs和HFCs中α-SMA的相对表达量分别为120.00±5.77和100.00±0.00,COL3A1的相对表达量分别为158.33±4.41和100.00±0.00,COL1A1相对表达量为88.33±1.67和100.00±0.00,HKCs中α-SMA和COL3A1的相对表达量均较HCFs明显升高,HKCs中COL1A1的相对表达量较HCFs明显降低,差异均有统计学意义(t=-3.46,P<0.05;t=-13.23,P<0.01;t=7.00,P<0.05)。结论成功培养并鉴定HKCs,该细胞适用于建立体外圆锥角膜细胞模型。
- 王亚妮刘先宁王小东高伟银勇朱秀萍
- 关键词：圆锥角膜成纤维细胞细胞培养细胞鉴定
- 角膜上皮树突状细胞和神经纤维密度与干眼程度的相关性研究被引量：2
- 2019年
- 目的应用角膜共聚焦显微镜观察不同程度干眼患者角膜上皮树突状细胞的密度和基底层下神经纤维的密度,以进一步探讨干眼和炎症及神经密度之间的关系,为干眼的诊断治疗提供依据。方法收集2016年12月至2017年9月在我院门诊就诊的确诊为干眼的患者,轻度、中度和重度各20例(40只眼)进行共聚焦显微镜检查,观察测量角膜中央区域树突状细胞的密度及基底层下神经纤维的密度,比较不同程度干眼患者之间的变化。结果轻度、中度、重度干眼患者角膜上皮树突状细胞密度与干眼程度呈正相关(r=0.293,P=0.001);角膜基底层下神经纤维密度与干眼程度为负相关(r=-0.331,P<0.001)。随着干眼程度的增加,角膜上皮树突状细胞的密度增加,基底层下神经纤维密度下降。不同程度干眼患者角膜树突状细胞密度总体差异有统计学意义(H=11.502,P=0.003);神经纤维密度总体差异有统计学意义(H=13.157,P=0.001)。结论角膜上皮树突状细胞的密度反映了干眼炎症的程度,基底层下神经纤维的密度反映了神经支配和营养,两者均与干眼程度相关,对其定量分析可以为干眼的诊断治疗提供依据。
- 程钰吴洁朱海峰程燕郝兆芹陆慧琴王亚妮
- 关键词：干眼共聚焦显微镜
- 真菌性角膜炎致病菌种属的PCR鉴定被引量：9
- 2010年
- 目的通过对核糖体18S rRNA基因内部转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）序列的PCR鉴定,建立快速、准确地鉴定真菌性角膜炎致病真菌种属的方法。方法采用眼科常见5种致病菌标准菌株;镜检确诊真菌阳性的角膜炎临床标本29例,其中真菌培养阳性15例,真菌培养阴性14例。所有标本均采用液氮研磨结合小玻璃珠振荡法破碎真菌细胞壁,提取真菌基因组DNA,并以此为模板PCR扩增其18S rRNA基因ITS保守区序列,进行基因测序后在基因库中查询致病菌的种属,与镜检结果比对。结果禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌、燕麦镰刀菌、烟曲霉、白色念珠菌等5种标准菌株培养物和29例临床真菌样本（包括15例真菌阳性培养物和14例真菌培养阴性的角膜病变组织样本）,各5mg样品中提取的DNA样品的浓度在1.7~22.5mg·mL-1。PCR扩增后5种标准菌株均有目的条带,15例真菌阳性培养物也均有目的条带,14例真菌培养阴性的角膜病变组织样本有2例有目的条带,其余12例没有目的条带。标准菌株的PCR鉴定阳性率100%,镜检确诊真菌阳性的临床样本PCR阳性率58.6%,高于真菌培养法鉴定的阳性率51.7%。PCR产物进行基因测序后在基因库中查出了致病菌的种属,检索结果与镜检结果完全一致。结论通过核糖体18S rRNA基因ITS序列PCR鉴定真菌性角膜炎致病菌的方法特异性强,灵敏度较传统的培养加镜检法更高。若能改进从角膜病变组织中提取真菌基因组DNA的方法,其灵敏度还能进一步提高。
- 安娜王亚妮刘先宁朱娟莉朱秀萍吴洁
- 关键词：真菌性角膜炎PCR
- 人角膜基质间充质干细胞外泌体的分离制备及鉴定
- 2021年
- 目的制备人角膜基质间充质干细胞(human corneal stromal mesenchymal stem cells,HC-MSCs)外泌体并进行生物学鉴定。方法采用组织块培养技术获得HC-MSCs,利用超速离心法从HC-MSCs培养上清中分离制备外泌体,通过蛋白免疫印迹、透射电镜、纳米颗粒跟踪分析法进行鉴定。结果分离的纳米囊泡表达外泌体特异性标志蛋白CD63,CD81和TSG101,在透射电子显微镜下可见其呈圆形、卵圆形和杯盘状囊泡,直经113.3 nm。结论从HCMSCs培养上清中可分离出具有典型结构及特征的外泌体,为HC-MSCs外泌体的作用机制及其在眼科的转化应用研究奠定坚实的基础。
- 刘先宁汪耀潘士印肖湘华银勇王亚妮刘睿朱秀萍赵明
- 关键词：外泌体
- 对外汉语教学中文化冲突案例分析及应对策略研究
- 自改革开放以来,中国的经济有了突飞猛进的发展,综合国力不断增强,国际地位和世界的影响力有了显著的提升。越来越多的外国人想学习汉语,了解中国,所以“汉语热”在世界范围内持续升温。代表不同文化的留学生与中国教师、中国社会、甚...
- 王亚妮
- 关键词：对外汉语教学文化冲突
- 文献传递
- 半巢式PCR扩增联合基因测序鉴定丝状真菌的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的 采用分子生物学方法鉴定痰标本培养分离出的丝状真菌菌种.方法 收集陕西省人民医院检验科2012年2月～5月痰标本分离的丝状真菌菌落20份,采用半巢式PCR联合基因测序法及形态学方法同时鉴定菌种.结果 基因测序法：烟曲霉菌13株,黑曲霉菌3株,土曲霉菌1株,绿色木霉1株,娄地青霉菌1株,淡紫拟青霉菌1株.形态学方法：17株曲霉菌与基因序列分析法结果一致,其余3例未能鉴别出菌种.结论 半巢式PCR扩增联合基因测序鉴定丝状真菌快速、简便、准确,可克服传统表型法鉴定真菌的缺点.
- 刘先宁胡淑玲安娜王亚妮朱娟莉朱秀萍
- 关键词：痰标本丝状真菌
- 重组人PEDF蛋白体外活性及抑制大鼠角膜新生血管的研究
- 朱秀萍王亚妮刘先宁安娜杨晓钊杨华
- 圆锥角膜急性角膜水肿治疗后深板层角膜移植临床分析被引量：1
- 2021年
- 目的通过对圆锥角膜急性角膜水肿治疗后行深板层角膜移植的病例分析,探讨眼前节相干光层析成像术(AS-OCT)对急性圆锥治疗后行角膜移植手术的手术方式选择的指导意义。方法回顾性病例对照研究。收集2017年6月至2019年12月我院收治的圆锥角膜急性水肿患者32例(32只眼),均采用保守妥布霉素地塞米松眼膏包眼方法待瘢痕形成后行角膜移植,分析急性期AS-OCT影像与最终所行角膜移植手术方式的关系。结果32例圆锥角膜患者急性水肿期AS-OCT影像中后弹力层脱离伴破裂卷曲10例(31.250%),后弹力层脱离伴破裂15例(46.875%),单纯后弹力层脱离7例(21.875%);32例患者最终角膜移植手术方式,穿透角膜移植23例,深板层角膜移植9例(其中大气泡法5例,手剥法4例)。Spearman相关分析深板层角膜移植手术方式完成与无后弹力层破裂呈正相关r=0.605,95%,CI:0.456~0.730,(P<0.01)。结论圆锥角膜急性水肿期单纯后弹力层脱离的病例深板层角膜移植成功率高,AS-OCT对急性水肿期后圆锥角膜患者角膜移植方式的选择有指导意义。
- 刘明银勇程广阔宋飞宇王亚妮范晶晶曲晓瑜郝兆芹王小东
- 关键词：圆锥角膜角膜移植
- 重组人PEDF蛋白体外活性及抑制大鼠角膜新生血管的研究
- 朱秀萍王亚妮刘先宁安娜杨晓钊杨华
- 异体角膜基质透镜植入联合角膜胶原交联术治疗圆锥角膜的短期临床观察
- 2023年
- 目的探讨飞秒激光辅助的异体角膜基质透镜植入术(SLAK)联合角膜胶原交联术(CXL)治疗中晚期圆锥角膜的疗效。方法回顾性病例系列研究。收集2020年9月至2022年6月于西安市第一医院激光近视治疗中心行飞秒激光辅助的SLAK联合CXL的圆锥角膜病例资料23例(24只眼),其中男性16例,女性7例,年龄(23.69±5.18)岁。记录供体角膜基质透镜厚度、屈光度数、直径;记录患者术前及术后1、3、6个月的裸眼视力、最佳矫正视力(BCVA)、屈光度数;记录患者Sirius三维眼前节分析仪测量的角膜前表面平坦曲率(Kf)和陡峭曲率(Ks)及两者的差值ΔK,以及角膜中央厚度(CCT)及角膜中央直径6 mm圆形区域的总高阶像差、彗差、球差和三叶草差。结果供体角膜基质透镜厚度、近视球镜度数及柱镜度数分别为(103.50±15.78)μm、(4.77±1.34)D和(-0.19±0.24)D。23例(24只眼)圆锥角膜患者飞秒激光辅助的SLAK联合CXL术后6个月CCT为(454.83±50.01)μm,高于术前的(384.92±35.45)μm,差异有统计学意义(P<0.05)。术后6个月UCVA为1.41±0.32,低于术前的1.11±0.33;术后6个月近视球镜度数为(15.73±7.89)D,高于术前的(12.08±5.99)D;术后6个月角膜前表面Kf和Ks分别为(56.82±4.76)和(61.00±4.70)D,高于术前的(53.55±4.95)和(58.65±5.10)D;差异均有统计学意义(P<0.05)。术前与术后6个月BCVA及柱镜度数、ΔK的差异均无统计学意义(P>0.05),角膜中央直径6 mm圆形区域的各高阶像差的差异亦无统计学意义(P>0.05)。且本研究中所有术眼随访期内均未见角膜基质透镜褶皱、融解及移位,无角膜混浊或免疫排斥反应。结论飞秒激光辅助的SLAK联合CXL可显著增加圆锥角膜眼的角膜厚度,具有良好的有效性;患者术后半年视力和像差无明显变化,未见不良反应,手术具有一定的安全性。
- 刘佳申笛孙西宇周堃王亚妮韦伟
- 关键词：圆锥角膜角膜基质角膜移植
