林景卫
- 作品数:37 被引量:120H指数:7
- 供职机构:沈阳农业大学生物科学技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金辽宁省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学经济管理更多>>
- 玉米MADS-box基因ZAG3的表达及功能分析
- 2012年
- 为了解MADS-box蛋白中AGL6亚家族基因ZAG3在玉米花发育中的功能,对ZAG3基因进行序列分析显示,该基因开放阅读框为768 bp,编码255个氨基酸的MADS-box蛋白。亚细胞定位预测显示,ZAG3定位于细胞核中。启动子预测分析表明,ZAG3基因启动子区具有启动子的核心组件、分生组织表达的组件和脱落酸、赤霉素等植物激素应答组件,但没有与茉莉酸相关的应答组件。此外,实时荧光定量PCR表达分析显示,喷施茉莉酸甲酯可以使ZAG3基因在玉米雄穗中的表达明显提高,暗示了该基因与JA介导的雄穗性别决定过程是有关系的。
- 李浩戈刘彦飞钟鸣陈丽静张丽林景卫崔振海
- 关键词:玉米性别决定茉莉酸
- 《基因工程》教学中学生学习能力的培养被引量:5
- 2012年
- 以提高学生的自主学习能力为目标,结合基因工程教学,探讨了学生注意能力,总结能力,组织能力,理解问题能力,解决问题能力培养的方法。
- 马慧李浩戈陈丽静钟鸣张丽郭志富林景卫
- 关键词:基因工程教学
- 南、北五味子RAPD-SCAR鉴别研究被引量:7
- 2011年
- 目的:为准确鉴别南五味子和北五味子寻找一种新的鉴别手段。方法:采用RAPD-SCAR技术对南、北五味子基因组DNA进行PCR扩增。结果:100条RAPD引物中筛选出2条条带清楚、重复性好的RAPD引物能够区分南、北五味子,并将其转化为SCAR标记。结论:RAPD-SCAR技术是在分子水平上鉴别南、北五味子的一种行之有效的方法。
- 陈丽静齐欣王玉坤张丽郭志富林景卫宋宇宁钟鸣
- 关键词:RAPD标记SCAR标记中药鉴定
- 智慧教育环境下中国茶文化的混合式协作学习模式探究被引量:3
- 2019年
- 中国茶文化源远流长,但有关茶文化的学习模式还处于传统阶段。在智慧教育环境下,通过混合式协作学习模式,对茶文化的相关知识构建了符合时代性的教学方式,为茶文化课程提供新的教学理念与方法。
- 张伟王雪杨昕卉林景卫
- 关键词:智慧教育混合式教学茶文化
- 不同温度和盐胁迫下紫花苜蓿MsNAC2和MsNAC3基因提高毕赤酵母耐受性分析
- 2022年
- NAC蛋白是植物特异性转录因子,具有多种生物学功能,紫花苜蓿是多年生的豆科苜蓿属优质牧草。为了探究紫花苜蓿NAC的抗逆性功能,克隆两个紫花苜蓿转录因子基因MsNAC2和MsNAC3,构建其真核表达载体pPIC9-His-MsNAC2和pPIC9-His-MsNAC3,并转入野生毕赤酵母GS115中。通过营养缺失筛选、PCR、SDS-PAGE和West bolt技术鉴定阳性酵母转化子,最终获得MsNAC2和MsNAC3的转基因酵母菌,分别命名为A2和A3。对A2、A3和对照株系(CK)进行37℃、16℃温度胁迫和100mmol·L^(-1)、200mmol·L^(-1)盐胁迫。试验结果表明:在不同温度和盐胁迫处理下,转基因酵母A2、A3的生命力和成活率明显高于CK,A2、A3在非生物胁迫下表现出更好的耐受性。说明MsNAC2和MsNAC3极有可能是优良的抗逆基因,为进一步通过基因工程手段应用于植物抗逆转基因育种提供了理论依据和研究基础。
- 申玉华白玉东范天宁李守坤梁耕源陈焕任秀鹏郭芡芡王浩安林景卫
- 关键词:紫花苜蓿
- 血红铆钉菇免疫调节蛋白基因克隆及其生物信息学分析和重组表达被引量:1
- 2015年
- 为研究血红铆钉菇中克隆的一种新型真菌免疫调节蛋白基因以及其在毕赤酵母GS115中进行高效重组表达,采用同源克隆的方法从血红铆钉菇菌丝体基因组DNA中扩增得到一个新的真菌免疫调节蛋白基因——FIP-cru,构建FIP-cru真核表达重组载体,并在毕赤酵母GS115中进行FIP-cru重组表达。利用硫酸铵沉淀、琼脂糖镍纳米磁珠纯化目的重组FIP-cru蛋白,采用SDSPAGE和Western blot验证重组FIP-cru表达情况。利用体外血细胞凝集实验与MTT法检测r FIP-cru生物学活性。结果表明:FIPcru属于真菌免疫调节蛋白家族,包含342 bp,编码113个氨基酸,经生物信息学分析发现,FIP-cru与其他真菌免疫调节蛋白有较高的同源性。SDS-PAGE和Western blot检测表明FIP-cru在毕赤酵母GS115中正确重组表达,粗蛋白表达水平为148.5mg·L-1。纯化后的r FIP-cru可以在体外凝集小鼠和羊的血细胞而不凝集人血细胞,MTT法表明r FIP-cru可明显刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖。FIP-cru为一种新型真菌免疫调节蛋白,毕赤酵母高效重组表达的r FIP-cru具有良好的生物学活性。
- 林景卫关山越钟鸣陈丽静李浩戈张丽范文丽李天来
- 关键词:血红铆钉菇毕赤酵母GS115重组蛋白
- 金针菇免疫调节蛋白基因fip-fve在毕赤酵母GS115中诱导型和组成型表达被引量:4
- 2014年
- 为获得稳定来源并且具有生物学活性的重组金针菇免疫调节蛋白(Fip-fve),将fip-fve基因转至毕赤酵母GS115中进行诱导型和组成型表达。用PCR方法从金针菇子实体基因组DNA中扩增fip-fve基因,连接至pPIC9构建诱导型表达载体pPIC9-FIP-fve,从毕赤酵母基因组DNA中扩增三磷酸甘油醛脱氢酶启动子(pgap),替换pPIC9-FIP-fve上乙醇氧化酶启动子(paox1)构建组成型表达载体pPIC9-PGAP-FIP-fve。将线性化的两种表达载体用PEG法转化毕赤酵母GS115,经组氨酸缺失培养基筛选和酵母菌落PCR鉴定后进行表达。结果表明,重组Fip-fve在以甲醇(1%,V/V)为碳源进行诱导型表达4 d达到最高,粗蛋白表达量为158.2 mg/L,在以葡萄糖(10%)和甘油(1%,V/V)为碳源进行组成型分别在表达第4天和第5天达到最高,粗蛋白分别为46.3 mg/L和29.5 mg/L。SDS-PAGE及Western blotting证明重组Fip-fve已正确表达,血细胞凝集活性检测初步证明重组Fip-fve具有良好生物学活性。
- 林景卫贾佳钟鸣陈丽静李浩戈郭志富齐明芳刘立侠李天来
- 关键词:金针菇毕赤酵母组成型表达
- 毛百合LiGPAT基因3'端与5'端克隆及其序列分析被引量:3
- 2013年
- 全长cDNA克隆不仅包含完整的阅读框,还拥有5'和3'端的非编码区,全长cDNA序列的获取是正确地注释基因组序列、进行基因的功能及产物分析的必要基础和前提。本研究以叶片为材料,利用3'和5'末端快速扩增(3'RACE和5'RACE)技术成功克隆了毛百合甘油-3-磷酸酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAT)基因3'和5'末端序列,分别得到了长度为777 bp和496 bp的片段。通过与已发表的LiGPAT保守区基因序列(Genbank登录号为HQ654523)拼接,得到全长1544bp的cDNA,其中5'-UTR10bp,ORF区1 233 bp,3'-UTR 311 bp并含有19 bp的poly(A)尾巴,编码410个氨基酸,预测分子量大小为45.9 kD,此序列Genbank登录号为JX524741。氨基酸同源性分析表明克隆得到的序列和其他物种的GPAT基因同源性较高,进一步进化分析表明其与水稻、油棕等单子叶植物的亲缘关系较近,对其进行生物信息学分析结果表明所得基因序列具有典型的GPAT基因的结构特点,包含磷酸酰基转移酶功能域PIsC结构域,由此说明成功克隆了毛百合GPAT基因全长,这将为后续的下游分析及进一步研究GPAT基因的功能奠定基础。
- 相恒佐苗琰陈丽静王利张丽林景卫赵兴华李天来
- 关键词:RACE克隆生物信息学
- 芘高效降解菌ZQ_5的培养条件及无机元素对其降解效率的影响被引量:4
- 2012年
- 以从我国最大的石油污水灌区之一——沈抚灌区污染土壤分离到的以芘为惟一碳源、能源生长的高效降解菌株ZQ5为实验材料,通过对菌株ZQ5培养条件的优化,以及采用摇瓶振荡培养方法测定菌株ZQ5对不同浓度芘的降解率,表明:菌株ZQ5在30℃振荡培养16 d后对150 mg/L芘的降解率为90.31%。通过模拟稻田施用N、P和K肥等的土壤环境,探索了无机营养元素对降解菌ZQ5降解能力的影响,发现土壤中混合加入N、P和K无机营养元素的降解率能达到82%以上,比单加某种营养元素对降解菌ZQ5的降解效果好。本研究结果可以指导稻田PAHs的原位生物修复。
- 白鹏钟鸣赵媛媛杨峰林景卫李浩戈马慧
- 关键词:多环芳烃降解效率生物修复
- 东方百合“索蚌”离体培养快繁体系建立被引量:8
- 2010年
- 本研究以东方百合"索蚌"为试材,以MS培养基为基础培养基,附加不同种类和浓度的植物生长调节物质(6-BA,NAA,IBA)诱导丛生芽及再生植株。结果表明:"索蚌"的最适灭菌时间为8-10 min,最佳取材部位是鳞片的基部。东方百合"索蚌"的最佳诱导分化培养基为MS十6-BA2.0+NAA0.1,最佳继代培养基为MS+6-BA 2.0+NAA 0.2;最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.1+IBA0.01,生根率97.8%,平均每苗根数可达11条;试管苗移栽的最佳基质为珍珠岩∶草炭土∶河沙=1∶1∶1,成活率达92%。
- 陈丽静马爽李丽丽李浩戈林景卫马慧明军
- 关键词:东方百合快速繁殖