杨祥胜
- 作品数：5 被引量：25H指数：3
- 供职机构：厦门大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 深海沉积物宏基因组文库中产蛋白酶克隆的筛选及性质分析被引量：9
- 2009年
- 提取东太平洋深海沉积物宏基因组DNA,构建了未培养微生物宏基因组文库.该文库平均插入片段30kb以上,含有7000个克隆,含外源DNA总长度约为210Mb.从文库中筛选到18个产胞外蛋白酶的克隆,16SrRNA分析表明,它们分别来源于假单胞菌(Pseudomonas)、寡养单胞菌(Stenotrophomonas)和弧菌(Vibrio)3个菌属.根据活性大小及来源菌株的16SrRNA序列比较,选择10个蛋白酶进行酶学性质分析,结果表明,它们的最适作用pH值在7～10之间,最适作用温度在10～40℃之间.其中Pro20蛋白酶最适作用温度最低,为10℃;Pro1蛋白酶具有最适作用温度低(20℃)、pH耐受性好、热稳定性较好等特性,具有良好的应用开发潜力.
- 郭巧玲杨祥胜赵晶曾润颖
- 关键词：深海沉积物宏基因组文库蛋白酶低温酶
- 深海沉积物宏基因组文库中产蛋白酶克隆的筛选及性质分析
- ＜正＞在酶制剂开发中,普通酶在许多实际生产条件下无法保持其活性,因此在高温、低温等特殊条件下具有活性的极端酶受到强烈的关注。海洋蕴藏着丰富的微生物资源,其中大部分仍未得到认识与研究,尤其是在深海、极地等极端海洋环境中,这...
- 杨祥胜赵晶曾润颖
- 文献传递
- 南极土壤微生物宏基因组文库构建及其抗肿瘤活性初探被引量：13
- 2007年
- 微生物代谢产物是药物的重要来源之一,然而采用传统的分离培养筛选的手段仅能对不到1％的微生物资源进行研究开发．通过构建环境样品微生物宏基因组文库能突破人工培养的瓶颈,直接克隆到完整的次级代谢产物合成基因簇,并从中寻找新的药物和活性次生代谢产物．实验直接提取南极中山站排污口土壤样品中微生物总基因组DNA,以黏粒(SuperCos 1)为载体,构建了宏基因组文库,获得了约27 000个克隆子,平均插入片段在35 kb以上,覆盖了至少946 Mb的微生物基因组信息．通过差异性DNA修复试验(DDRT)法对该文库进行筛选,获得13个具有抗肿瘤活性的克隆子,并采用MTT法对其中活性较高的克隆子进行细胞毒活性测定,表明克隆子AE-3对卵巢癌细胞具有明显的生长抑制作用．
- 赵晶杨祥胜曾润颖
- 关键词：宏基因组文库抗肿瘤活性次生代谢产物
- 北极深海沉积物中嗜冷细菌的系统发育分析被引量：4
- 2007年
- 从北极白令海深海沉积物中分离得到19株嗜冷细菌,通过测定16S rDNA序列对它们进行了分类鉴定及系统发育分析,并且与从热带西太平洋“暖池”区沉积物中分离的嗜冷细菌进行了比较.结果表明,由北极海底沉积物中分离得到的细菌主要属于γ-变形菌(γ-Proteobacteria),此外还有少量的α-变形菌和革兰氏阳性菌.在γ-变形菌中主要的菌属为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas),假单胞菌属(Pseudomonas)和希瓦氏菌属(Shewanella).与西太平洋“暖池”区沉积物中的嗜冷细菌的比较分析表明,假交替单胞菌属和假单胞菌属在两个海域中普遍存在,而希瓦氏菌属的分布则表现出一定的地域性.系统发育分析表明,相同菌属但来自北极和西太平洋海域两个不同环境的嗜冷细菌在系统发育树中的位置都相对独立,有的还形成了独立的分支,说明其分子进化过程可能受到生存环境条件的影响.
- 林曦杨祥胜曾润颖
- 关键词：沉积物嗜冷细菌系统发育分析
