杨丽媛
- 作品数：9 被引量：24H指数：3
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- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 胆道闭锁患儿自身免疫性肝病抗体的筛查分析被引量：5
- 2017年
- 目的 分析自身免疫性肝病相关抗体在胆道闭锁（BA）患儿血清中检出情况,探讨其在BA临床诊断及致病机制中的意义.方法 采用线性免疫印迹法分别检测81例BA组、48例疾病对照组（DC）和40例正常对照组（NC）血清中自身免疫性肝病IgG抗体,包括原发性胆汁性胆管炎相关抗体（PBC相关抗体,含AMA-M2、抗M2-3E 、抗Spl00、抗PML和抗gp210抗体）、自身免疫性肝炎相关抗体（AIH相关抗体,含抗LKM-1、抗LC-1、抗SLA/LP抗体）以及抗Ro-52抗体.结果 BA组患儿中PBC相关抗体组合检出率为18.5%,单一检出率由高到低分别为抗M2-3E抗体（14.8%）、抗PML抗体（3.7%）、抗gp210抗体（2.5%）,AMA-M2（1.2%）和抗sp100抗体（1.2%）,其中,抗M2-3E抗体阳性率明显高于NC组（（χ）2=5.025,P=0.025）,但与DC组（4.2%）无统计学差异（P〉0.05）.AIH相关抗体在BA患儿中仅检出抗LC-1抗体（7.4%）,与DC组（6.3%）、NC组（7.5%）的检出率差异,无统计学意义（P〉0.05）.抗Ro-52抗体在BA、DC和NC组的检出率分别为6.2%,4.2%和5%,组间无统计学差异（P〉0.05）.结论 BA患儿血清中存在不同程度检出率的自身免疫性肝病抗体,PBC相关抗体检出率较高,尤其是抗M2-3E抗体.自身抗体的检出提示BA存在针对靶抗原的体液免疫,可能参与BA的免疫致病过程,但其在BA的血清学诊断意义仍待进一步研究.
- 庞舒尹陈奕豪刘海英杨丽媛彭小芳代玉梅龙海锋
- 关键词：胆道闭锁自身抗体胆汁淤积
- miR-200a在胆道闭锁患儿肝组织中的表达
- 2016年
- 目的检测胆道闭锁(BA)患儿肝组织及血浆miR-200a的表达,探讨其与BA肝纤维化及肝脏炎症的关系。方法采用逆转录PCR检测26例BA组、10例正常组血浆标本miR-200a的表达,并分析其与生化指标的相关性;采用酪胺信号放大荧光原位杂交(TSA-FISH)检测14例BA及2例正常肝组织标本miR-200a的表达;根据Ishak系统对BA肝组织进行肝纤维化及炎症评分,分析肝组织miR-200a表达与肝纤维化及炎症的相关性,并分析BA血浆与肝组织miR-200a的相关性。结果BA组血浆miR-200a表达显著高于正常组,差异有统计学意义(P<0.01);BA组血浆miR-200a表达与TB、DB、ALP、γ-GT、ALT、AST没有相关性(P>0.05)。BA组肝组织miR-200a表达显著高于正常组,BA肝组织纤维化区miR-200a表达显著低于没有纤维化的肝实质区;miR-200a与BA肝纤维化进展正相关(P<0.05),而与肝脏炎症程度无关(P>0.05)。9例检测了血浆miR-200a的肝组织标本中有6例出现肝组织miR-200a表达越高,血浆miR-200a表达越高的情况。结论miR-200a可能通过上皮间质转化、Wnt/β-catenin和TGF-β信号通路调控BA肝纤维化,并可能成为预测BA肝纤维化程度的血浆标志物。
- 陈奕豪杨丽媛刘海英彭小芳庞舒尹陈峥嵘王凤华陈翊
- 关键词：胆道闭锁MICRORNA肝纤维化
- 胆道闭锁循环miRNA的高通量测序分析被引量：2
- 2016年
- 目的用高通量二代测序方法（next generation sequencing, NGS）分析胆道闭锁（biliary atresia，BA）患儿外周血中循环miRNA的表达特征，为寻找新的疾病相关无创诊断标志物提供依据。方法分别收集2013年1月至2014年5月到本中心就诊的29例BA（疾病组），10例婴儿肝炎综合征、5例Citrin基因缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症（NICCD）、5例胆总管囊肿（疾病对照组）和29例健康对照（正常对照组）血浆样本。选取前期收集的疾病组和正常对照组样本各9例用于高通量测序，将两组儿童分别按性别和年龄匹配分为3组，将血浆样本按上述分组进行组内等比例混合，提取血浆混合池中的总RNA，以Illumina HiSeq 2000测序仪分析混合样品中的全部miRNA序列。组间差异比较采用t检验，靶基因预测软件TargetScan, miRanda和PITA对差异miRNA的功能进行预测；并以实时荧光定量聚合酶链反应（reverse transcription quantitative real-time polymerase chain reaction，RT-qPCR）对差异表达显著的miRNA进行验证。结果本研究成功构建BA患儿循环miRNA表达谱；BA患儿组与正常对照组中有188个循环miRNA表达存在差异（P〈0.05），包括87个上调、101个下调，56个为新发现的miRNA，其余皆为数据库中的已知miRNA。表达差异大于2倍的miRNA有146个，77个上调、69个下调。其中，表达量高且为各样本组恒定表达的miRNA有8个，均为已知miRNA，包括上调的has-miR-122-5p、-100-5p、-432-5p，下调的has-miR-140-3p、-10b-5p、-26a-5p、-126-3p、-744-5p；功能预测显示，这8个差异miRNA与肝胆发育、肝纤维化、细胞凋亡等相关；RT-qPCR验证结果表明，BA组血浆hsa-miR-122-5p、-100-5p表达量显著高于正常对照，而hsa-miR-140-3p、-10b-5p、-126-3p显著低于正常对照组（均P〈0.05），与测序结果一致。结论本研究结果全面展示了BA患儿外周血循环中miRNA的表达特征，其中一些�
- 彭小芳付捷温哲庞舒尹陈奕豪高坎坎辜少玲杨丽媛陈峥嵘刘海英
- 关键词：胆道闭锁微RNAS高通量测序标记物
- 人类全基因组编码蛋白质芯片技术筛选胆道闭锁自身免疫靶抗原被引量：1
- 2018年
- 目的筛选胆道闭锁(biliary atresia,BA)自身免疫相关靶抗原,建立疾病差异性抗原谱,寻找疾病诊断及发病机制研究线索。方法以20例BA患儿、5例疾病对照组患儿(包括婴儿肝炎综合征2例、胆总管囊肿3例)和5例正常儿童对照组的血清为探针,采用全基因组蛋白质芯片技术进行检测,并进行生物学聚类分析和GO功能分析。结果通过比较BA组与对照组,共筛选出存在明显差异的免疫响应蛋白281个,其中Ig G响应105个,Ig M响应176个,Ig G和Ig M同时响应的26个;依据差异倍数≥2、表达稳定的标准得出49个高响应蛋白。GO功能分析发现差异抗原主要涉及调控细胞发育、增殖、凋亡及胆道形成。其中CENP6、UBQLN3、PDCD2、SPEG和RBPJ蛋白在BA组中阳性率显著高于正常对照组(100%vs 0%,P<0.05)。结论成功建立BA相关自身抗原差异谱,为BA的早期诊断、发病机制的阐明提供新的科学依据,但仍需更为深入的鉴定和更多临床样本的验证。
- 邓蕾庞舒尹杨丽媛代玉梅刘云锋张锐忠刘海英
- 关键词：胆道闭锁自身抗原蛋白质芯片
- 超敏C反应蛋白定标方式对检验结果影响的比较研究
- 2009年
- 目的探讨超敏C反应蛋白（hsCRP）在日立7170A生化分析仪和贝克曼DXC800生化分析仪上的定标方式与检验结果的关系，以实现两台仪器检验报告的一致性。方法在日立7170A生化分析仪上分别采用Spline和Exponential的定标方式定标，在贝克曼DXC800生化分析仪上采用Math Model1和Math Model3的定标方式定标，分别测定各浓度水平的hsCRP标准品3次和50份血清标本。结果测定hsCRP标准品时，除零点以外，Math Model1定标方式的测定值与标准品浓度之间的差异有统计学意义（P〈0．05），而其他三种定标方式的测定值与标准品浓度之间的差异无统计学意义（P〉1．05）。测定hsCRP血清标本时，采用Math Model3定标方式与Exponential定标方式的测定结果之间的差异有统计学意义0—2．731，P〈0．01），与Spline定标方式的测定结果之间的差异无统计学意义（f一0．946，P一0．349）。结论测定hsCRP时日立7170A采用Spline定标方式与贝克曼DXC800采用MathModel3定标方式时的结果具有可比性，且能够满足临床诊断的需要。
- 杨丽媛顾晓琼万根平
- 关键词：超敏C反应蛋白全自动生化分析仪
- APRI在评估婴儿胆道闭锁肝脏纤维化程度中的应用被引量：4
- 2015年
- 目的：探讨天冬氨酸转氨酶（AST）与血小板（PLT）比值（APRI）与胆道闭锁（BA）肝脏纤维化程度的关系，评估其在肝脏纤维化中的临床意义。方法临床实验研究。收集2010年1月至2013年6月间广州医科大学附属妇女儿童医疗中心收治的确诊BA患儿97例，分别进行胆道探查术前一周内的血清AST、PLT检查以及APRI与肝组织Metavir纤维化分级的相关性分析，并进一步绘制患儿AST、PLT以及APRI的ROC曲线。结果 BA患儿血清AST水平、PLT计数与肝脏纤维化分级分别呈弱正相关和负相关（r分别为0．367、－0．403，P值均＜0．001），而APRI则与患儿肝脏纤维化分级相关（r＝0．541，P＜0．001），随着肝脏纤维化程度增加而升高。 APRI诊断无或轻度纤维化与中重度纤维化的ROC曲线下面积为0．78，最优截断值为0．75，敏感度为77．9％，特异度为62．1％；APRI诊断非肝硬化与肝硬化的ROC曲线下面积为0．85，最优截断值为1．77，敏感度为75．0％，特异度为89．4％。 APRI诊断无或轻度纤维化、中重度纤维化与肝硬化的准确性分别为73．2％（71／97）、64．9％（63／97）、87．6％（85／97）。结论 APRI可应用于临床评估BA患儿肝脏纤维化严重程度。（中华检验医学杂志，2015，38：337－340）
- 高坎坎陈峥嵘彭小芳付捷何丽娟温哲庞舒尹王会杨丽媛辜少玲刘海英
- 关键词：胆道闭锁疾病严重程度指数天冬氨酸氨基转移酶类比值比
- 以DOPS为工具的形成性评价在检验科临床教学中的应用探索被引量：9
- 2021年
- 操作技能直接观察评估(DOPS)作为一种兼具教学和考核功能的形成性评价工具,能够客观、全面地评估学员的学习过程,其效果已经在国外得到验证。该教学组采用传统教学终结性评价方法和DOPS为工具的形成性评价教学法对检验科住院医师进行规范化培训(简称规培),并对两种方法的规培效果进行考核评价。结果显示采用DOPS为工具的形成性评价教学法较传统教学法更具有优越性,可以更好地完善检验科的形成性评价带教系统,提高师资建设专业化水平,使学员的临床综合能力得到提升,值得推广。
- 王淑慧关小珊杨丽媛钟华敏姚淑雯胡舜妍刘海英
- 关键词：检验教学
- 金黄色葡萄球菌LDH多克隆抗体制备及其交叉反应性被引量：3
- 2016年
- 目的:在原核载体中表达、纯化金黄色葡萄球菌乳酸脱氢酶,免疫小鼠获得多克隆抗体,使用多克隆抗体分析与其它菌种的交叉反应性。方法:复苏p ET28a-ldh/Bl21重组菌,IPTG诱导重组融合蛋白表达、以抗HIS标签的单克隆抗体进行western-blot鉴定重组蛋白。使用纯化的重组蛋白以及相应的佐剂免疫小鼠,利用ELISA测定血清抗体效价,并使用小鼠抗血清进行免疫印迹法鉴定重组蛋白的反应原性及其与金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌的交叉反应性。结果:SDS-PAGE电泳在39 KDa处可见目的条带,免疫印迹法验证了重组LDH的表达,纯化后获得2.8 mg重组蛋白。纯化蛋白免疫小鼠能诱导产生特异性体液免疫应答,ELISA检测特异性Ig G效价为1:50000,western-blot鉴定显示所制备的多克隆抗血清能分别识别金黄色葡萄球菌重组及天然乳酸脱氢酶,但不识别表皮葡萄球菌、肺炎链球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌中天然乳酸脱氢酶。结论:纯化的LDH具有良好的免疫活性,免疫小鼠获得高滴度的多克隆抗体。使用多克隆抗体western-blot显示与其它菌种LDH不存在交叉反应性,为后续使用该重组蛋白进行金黄色葡萄球菌感染的诊断研究奠定基础。
- 梁秉绍杨丽媛董慧李飞黄艳梅陈吟霜谢永强钟华敏周珍文
- 关键词：金黄色葡萄球菌乳酸脱氢酶多克隆抗体交叉反应性
- 金黄色葡萄球菌乳酸脱氢酶多克隆抗体的制备及其交叉反应性研究矿
- 目的:在原核载体中表达、纯化金黄色葡萄球菌乳酸脱氢酶,免疫小鼠获得多克隆抗体,使用多克隆抗体分析与其它菌种的交叉反应性.
方法:复苏pET28a-1dh/B121重组菌,IPTG诱导重组融合蛋白表达、以抗HIs...
- 梁秉绍杨丽媛董慧李飞黄艳梅陈吟霜谢永强钟华敏周珍文
- 关键词：金黄色葡萄球菌乳酸脱氢酶多克隆抗体交叉反应性
- 文献传递
