李秀森
- 作品数：87 被引量：479H指数：11
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 多种肿瘤传代细胞中lg样物质存在与检测被引量：16
- 1999年
- 目的：探讨lg样物质是否在多种肿瘤细胞内存在广泛的表达，筛选出lg样蛋白高表达细胞株。方法：通过免疫组织化学方法（直接法、APAAP法），分别用抗人IgG多克隆抗体、抗人IgG重链、轻链单抗，对乳腺癌（T47－D、MCF－7）、大肠癌（HT－29、HCT－8）、卵巢癌（SKOV3、Ca）、肺癌（A549）、口腔上皮样癌（A431）、肝癌（BC－7402）、宫颈癌（S3、MR）等上皮性恶性肿瘤及部分造血系统肿瘤传代细胞（Ran、HL－60、K562）的胞浆内屹样物质进行了检测。结果：当用抗人IgG多抗进行检测时，所有的上皮性恶性肿瘤细胞同阳性对照（杂交瘤）一样，都呈阳性反应；而在造血系统肿瘤中，除Ran细胞呈弱阳性反应外，K562、HL－60为阴性反应。用抗人IgG轻、重链单抗进行APAAP法检测时，所得结果基本同直接法，但在上皮性恶性肿瘤细胞株中显示了明显的阳性强度差异，如：HeInMR、CaOV3、MCF－7、T47－D、对抗人IgG重链单抗呈强阳性反应；而HCT－8、A549、A431、BCL－7402、等细胞株为弱阳性，SKOV3则为阴性。抗人IgG。链阳性率高于λ链。结论：Ig样物质在所检测的上皮性恶性肿瘤传代细胞系中存在广泛的表达。
- 邱晓彦侯春梅李秀森沈继铭唐佩弦毛宁
- 关键词：上皮细胞肿瘤传代细胞
- IL-2基因修饰肿瘤细胞的形态计量学研究被引量：1
- 1996年
- 应用图像分析系统对ＩＬ２基因转移前后的小鼠肥大细胞瘤细胞系Ｐ８１５细胞及人红白血病细胞系Ｋ５６２细胞进行了形态计量学测定及组间显著性检验。结果显示，基因修饰的Ｐ８１５及Ｋ５６２细胞的形态均发生了明显的变化，其面积、周长、最大直径、最小直径、形状因子及等效直径与其亲本细胞相比有十分显著的差异，主要表现为细胞大小不均，体积增大，形状不规则。
- 刘晓丹郭宁李秀森涂开成曹珍山杜德林毛宁
- 关键词：白细胞介素2基因转导肿瘤细胞
- 人正常骨髓 CD_(34)^+ 造血细胞的形态学与细胞化学特征被引量：5
- 1997年
- 目的：探讨ＣＤ３４＋造血细胞的形态学特征。方法：采用免疫磁珠－流式细胞仪分选二步法获取高纯度的人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞。结果和结论：ＣＤ３４＋造血细胞从形态上可分为３型，Ⅰ型胞体略大于淋巴细胞，各种细胞化学染色阴性，最原始，拟定候选干细胞群；Ⅱ型为典型的小淋巴细胞状，细胞化学亦为阴性，拟定多向祖细胞阶段；Ⅲ型胞体极不均一，依分化方向不同其细胞化学表现为±～＋＋，拟定定向祖细胞阶段。
- 奚永志李秀森张双喜唐佩弦唐佩弦魏文毛宁
- 关键词：造血干细胞形态学细胞化学
- 骨髓间充质干细胞的生物学特性被引量：92
- 2000年
- 从人骨髓中分离人间充质干细胞 (MSCs) ,台盼蓝拒染法测定细胞增殖状态 ,MTT实验检测不同细胞因子对细胞增殖的影响。应用流式细胞学技术测定细胞周期及细胞表面抗原特征并观察细胞组织化学特点。结果 :MSCs具有独特的表征 ,即CD2 9,CD44 ,CD16 6阳性 ,CD34,CD45 ,HLA DR和荆豆素阴性。细胞化学结果显示 ,几乎所有细胞酸性萘酚醋酸酯酶 (ANAE)及糖原 (PAS反应 )阳性 ,酸性磷酸酶 (ACP)及苏丹黑反应 (SB)阴性 ,约5 %细胞碱性磷酸酶 (ALP)阳性。细胞倍增时间约为 30h ,细胞周期分析显示约 10 %细胞处于S期。MTT结果表明 ,MSCs对多种细胞因子的增殖反应性不同 ,TNF α ,IFN γ ,干细胞因子 (SCF)及胰岛素样生长因子 - 1(IGF 1)明显促进细胞的增殖。提示 :MSCs是一群均一的细胞 ,具有独特的增殖、表征及组织化学特征。MSCs对细胞因子的不同反应性 ,为筛选合适的细胞体外扩增及维持体系提供了有意义的线索。
- 李秀森郭子宽杨靖清刘晓丹侯春梅唐佩弦毛宁
- 关键词：间充质干细胞骨髓细胞因子生物学特性
- 间充质干细胞移植抑制小鼠急性移植物抗宿主病的实验研究(英文)
- 2010年
- 目的研究间充质干细胞的体内免疫调节活性。方法将C57/BL脾脏细胞输注入受亚致死量照射的BALB/c小鼠,建立急性移植物抗宿主病模型,受体小鼠或同时接受密质骨骨髓来源的间充质干细胞,流式细胞技术检测脾细胞表面表达的活性分子。结果模型经输注间充质干细胞后,鼠脾脏CD11b+细胞表达的CD86和CD69减少,提示抗原呈递细胞的成熟度下降。此外,作为一种效应T细胞早期活化和发育的标记,CD3+CD69+细胞/CD3+细胞的比值降低,导致脾内CD3+细胞的绝对和相对数目减少。但是,在同系脾细胞输注模型中,CD11b+细胞表面的CD69和MHCⅡ表达以及CD3+细胞表面的CD69不受影响。结论 MSCs可以分3个阶段抑制急性移植物抗宿主病,有望成为急性移植物抗宿主病的有效治疗手段,但仍需进行深入研究。
- 李红郭子宽李秀森江小霞朱恒要辉宇王晓燕苏永丰廖丽刘元林吴英张毅毛宁
- 关键词：急性移植物抗宿主病抗原呈递细胞免疫调节T淋巴细胞
- 人肿瘤浸润淋巴细胞的克隆化
- 1992年
- 肿瘤组织经机械剪切和酶消化分离肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)。TIL在含1000U/ml重组人白细胞介素-2(rhIL-2)的培养液中培养6d后,植入含1000U/ml rhIL-2的软琼脂半固体培养基中培养,7d后将形成的克隆转移到含rhIL-2的培养液中培养。^(51)Cr释放法测定结果表明,约30％的克隆对NK敏感的K562细胞和对NK不敏感的H7402肝癌细胞有细胞毒性,为具有杀瘤活性的TIL杀伤克隆(TIL-K)。60％以上TIL-K克隆在含IL-2的培养液中可持续地增殖2～3个月,其细胞数可扩增至10~8～10~9,并始终保持对肿瘤细胞的细胞毒性。TIL-K克隆的表型为CD3^+、CD4^-、CD8^+、CD16^-,有T细胞抗原受体β链基因的表达,说明其属T细胞系统。采用半固体-液体两步培养法可获取大量高纯度具有广谱杀瘤活性的TIL,本研究有助于TIL的深入研究和临床应用。
- 周生毛宁张明伟江飞子李秀森杜德林
- 关键词：肿瘤淋巴细胞克隆化
- 逆转录病毒载体介导IL－2导入MCF－7细胞基因表达及对LAK细胞杀伤的敏感性研究
- 1995年
- 用逆转录病毒载体介导人ＩＬ－２基因导入人乳腺癌细胞系ＭＣＦ－７并获得表达。原位杂交结果证实，转染的ＭＣＦ－７细胞中有ＩＬ－２ｍＲＮＡ的表达，用ＩＬ－２依赖细胞系ＣＴＬＬ－２以ＭＴＴ比色法测得ＭＣＦ－７细胞培养上清液中有ＩＬ－２活性，其活性平均为１０ＩＵ／１０￣６细胞。转导后的ＭＣＦ－７细胞对ＬＡＫ细胞的杀伤敏感性降低。
- 李秀森郭宁王利红施巍江飞子王嘉玺毛宁
- 关键词：杀伤细胞基因表达
- 造血干细胞及其相关的间充质干细胞和胚胎干细胞的基础与应用研究
- 毛宁张毅郭子宽周生张明伟刘兵江小霞李秀森于晓妉
- 课题组在对造血干/祖细胞（CD34+细胞）生物学特性研究基础上，获得人CD34+细胞分离纯化、体外扩增及定向诱导分化的较理想的条件与技术手段，并依据研究结果建立了可应用于临床细胞治疗的实验方法，为临床应用奠定了基础。进一...
- 关键词：
- 关键词：造血干细胞间充质干细胞胚胎干细胞
- 逆转录病毒介导的人血小板生成素(TPO)在骨髓基质细胞中的表达
- 2000年
- 为探讨逆转录病毒介导的TPO基因在人骨髓基质细胞系HFCL中的表达,利用脂质体法将含TPO基因的逆转录病毒载体导入HF-CL细胞中,RT-PCR和基因组DNA PCR分析证实mRNA水平有表达,基因组中整合有Neo基因和TPO基因。TPO依赖细胞株TD-3检测生物学活性表明转染的骨髓基质细胞分泌TPO。上述结果为进一步研究转基因骨髓基质细胞对造血细胞的调控作用提供了必要的基础资料。
- 张毅唐佩弦李秀森江飞子毛宁
- 关键词：人血小板生成素骨髓基质细胞逆转录病毒
- 人CD40-Ig融合蛋白在CHO细胞中的表达与纯化研究被引量：3
- 2001年
- 目的 建立稳定表达CD40 Ig融合蛋白的工程细胞株 ,获得大量融合蛋白以研究靶向阻断CD40∶CD40L途径防治移植物抗宿主病 (GVHD)策略的应用潜力。方法 自真核瞬时表达载体pIG 40Ig中切下CD40 Fc融合基因 ,插入pcDNA3.1载体中构建稳定表达载体。利用脂质体Lipo fectamine将该载体转染CHO细胞 ,G418筛选抗性克隆 ;夹心ELISA法检测上清中CD40 Ig融合蛋白的表达 ;Westernblot法鉴定其免疫学活性。利用有限稀释法对筛选出的混合克隆单克隆化。滚瓶法无血清大批培养工程细胞 ,ProteinA亲和层析法纯化 ,SDS PAGE后薄层扫描分析纯度。利用流式细胞术检测该蛋白与Jurkat细胞表面CD40L的结合功能。结果 CD40 Fc融合基因插入pcDNA3.1载体后构建成功稳定表达载体p3.1 40Ig ,转染CHO细胞后经 2次克隆化获得稳定表达CD40 Ig融合蛋白的基因工程细胞株 ,命名为B2。ProteinA亲和层析纯化后融合蛋白纯度达 95 %以上 ,该融合蛋白可特异结合Jurkat细胞表面的CD40L。结论 CD40 Ig融合蛋白可模仿天然分子与其配基结合 ,为研究靶向CD40∶CD40L途径的治疗制剂在防治GVHD中的潜在应用提供了有用的工具。
- 刘荷中毛宁侯春梅李秀森郭子宽吴英沈倍奋唐佩弦
- 关键词：融合蛋白CHO细胞纯化骨髓移植
