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李向臣: 作品数：126 被引量：315H指数：9; 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科技资源平台项目转基因生物新品种培育专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生哲学宗教更多>>

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玻璃化冷冻对卵母细胞纺锤体分布的影响: 引言纺锤体是卵母细胞的一个重要组成部分,由极间微管、染色体牵丝及区间牵丝排列组成。纺锤体对细胞质和周围环境的改变非常敏感,冷冻-解冻过程中很容易造成纺锤体的损伤。研究表明,解冻后的纺锤体组织不能维持原有的高度有序结构,在...; 李向臣姚雅馨赵倩君浦亚斌王义鹏关伟军马月辉; 文献传递

牛供体细胞的来源、血清饥饿和预激活对核移植卵体外胚胎发育的影响被引量：11: 2003年; 牛皮肤成纤维细胞经血清饥饿或预激活处理后获得核胞体 ,并注入去核卵母细胞内构建重组胚。检查重组胚 2 4h和 36h卵裂率以及 8d囊胚率 ,以评估供体细胞及其处理方法对体细胞核移植效果的影响。实验结果表明 :来自 3个年龄 (6、 18和 36月龄 )、 2个品系 (红安格斯肉牛和荷斯坦奶牛 )的 4头供体牛皮肤细胞重组胚的卵裂率和囊胚率均无差异。生长到完全汇合的 36月龄荷斯坦牛供体细胞血清饥饿 10～ 13d组重组胚的 36h卵裂率显著低于 0d (对照 )、 3～ 5d和 6～ 9d组 ,囊胚率显著低于 3～ 5d组 ;经 5 μmol/L离子霉素或7%乙醇预激活 5min重组胚的卵裂率和囊胚率均与对照组无差异。; 李雪峰安志兴李煜郭继彤李向臣张涌; 关键词：供体细胞血清饥饿体细胞核移植

山羊乳腺上皮细胞的分离、培养与超微结构观察被引量：37: 2005年; 从山羊乳腺取部分组织进行细胞培养,并通过控时消化分离纯化山羊乳腺上皮细胞,建立了山羊乳腺上皮细胞系。结果表明:用含150 U/mL I型胶原酶和100 U/mL透明质酸酶的混合液,37 ℃消化组织块4h,可得到大量的分散单细胞用于原代培养,该法是获得山羊乳腺组织单细胞的适宜方法;以含 10%胎牛血清和双抗的 RP MI1640或DEME/F12培养液为基础液,在培养液中添加氢化考的松、胰岛素样生长因子 I(IGF I)、表皮生长因子(EGF)及胰岛素转铁蛋白硒钠(ITS)对山羊乳腺上皮细胞的生长具有较明显的促进作用。上皮细胞显微和超微结构显示:山羊乳腺上皮细胞在体外培养过程中可形成岛屿状单层聚集和类似圆顶状的结构;传代培养到第 7 代的细胞仍增殖旺盛,细胞内有丰富的脂滴和高尔基小泡,细胞分泌活动旺盛。; 李向臣任芳丽张涌; 关键词：超微结构乳腺上皮细胞脂滴小泡

基于cytb基因探讨家绵羊和多角绵羊的系统发育被引量：17: 2010年; 【目的】研究中国家绵羊起源进化以及多角绵羊和普通家绵羊的亲缘关系。【方法】测定8个省区42个绵羊个体的细胞色素b基因全序列。【结果】本试验的绵羊个体可定义为40个单倍型,单倍型多样度为0.997±0.006,核苷酸多样度为0.793%。中国绵羊群体可分为4个支系(A、B、C和D),其中支系D首次在中国绵羊群体中被检测到;支系B与支系C的差异最大,分化时间大约为595±150万年。多角绵羊与家绵羊聚在一起,而与野绵羊亲缘关系较远,分属于支系A、B和D。【结论】系统发育分析表明,中国绵羊有多个母系起源或经过多次驯化,未发现盘羊、东方盘羊和亚洲摩佛伦羊与绵羊母系祖先形成相关的分子证据。; 赵倩君关伟军乔海云孟详人韩建林李向臣何晓红浦亚斌马月辉; 关键词：绵羊细胞色素B

鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞分离培养及生物学特性被引量：9: 2013年; 为研究鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞生物学特性,取30～50日龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌,分离培养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞。结果显示,试验成功地分离了鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞,原代培养并传代至16代,免疫细胞化学染色检测卫星细胞表面特异性标志Desmin、MyoD呈阳性表达,RT-PCR检测Desmin、c-Met、Myf5、pax7呈阳性表达;绘制生长曲线,结果说明细胞具有较强增殖能力;应用流式细胞仪对细胞进行周期分析,结果显示S期细胞所占比例为8.94%;骨骼肌卫星细胞向成肌细胞诱导10d后,免疫细胞化学染色检测成肌特异性标志骨骼肌肌球蛋白呈阳性表达;骨骼肌卫星细胞向脂肪细胞诱导7d后,油红O染色呈阳性,RT-PCR检测脂肪细胞特异性标志pparγ、LPL呈阳性表达。结果表明试验成功建立了鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞的体外扩增培养体系,且该骨骼肌卫星细胞有发育形成肌管和脂肪细胞的多项分化潜能。; 边艳超牧仁李向臣李云章关伟军; 关键词：骨骼肌卫星细胞体外扩增增殖能力

农户波尔山羊MOET项目实施研究: 超然7个农户85只波尔山羊供体,供体同期发情率为97.65%（83/85）,有效供体比例占83.53%（71/85）。80只供体进行冲胚,共收集胚胎1257枚,可用胚1006枚。将可用胚移植给589只受体,B超检查怀孕4...; 权富生赵晓娥安志兴李裕强张志平李向臣; 关键词：农户波尔山羊胚胎移植

维生素E提高牛孤雌胚胎的体外发育研究被引量：4: 2005年; 体外生产的牛孤雌胚胎用添加了VE,VE+VC的CR1aa培养液,置38.5℃、5%CO2,饱和湿度的培养箱中进行培养。通过荧光染料Hoechst 33342对胚泡进行荧光染色,检测孵化囊胚的总细胞数。结果表明,当培养基中添加100μmol/L VE时,与对照组相比,扩张囊胚发育率和胚泡的细胞总数显著提高(P<0.01);当VE与VC联用时,发育到早期囊胚、扩张囊胚、孵化囊胚的数量和胚泡的总细胞数均低于单独使用VE的培养组。; 李瑞文李向臣安志兴张涌; 关键词：VITAMIN 孤雌胚体外发育

精子提取液对绵羊同异种核移植重构胚的激活效果被引量：2: 2008年; 应用绵羊精子提取物体外激活绵羊体细胞核移植胚和山羊-绵羊异种核移植胚,比较了不同浓度的绵羊精子提取物对绵羊同种和异种重构胚的激活作用,并与传统的化学激活方法对重构胚的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数做了比较。结果表明,绵羊精子提取物可以有效地激活绵羊体细胞核移植胚和山羊-绵羊异种核移植胚,每一重构胚注射3 pL浓度为5 mg/mL的绵羊精子提取物,对同种和异种胚的发育效果均为最好,并显著高于其他试验组(P<0.05)。注射绵羊精子提取物对绵羊-山羊异种核移植胚的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数的影响,与离子霉素联合6-DAMP激活法差异不显著(P>0.05)。注射绵羊精子提取物对绵羊同种核移植胚的卵裂率和囊胚率的影响,与离子霉素联合6-DAMP激活法差异也不显著(P>0.05),但精子提取物注射法的绵羊核移植胚的囊胚细胞数显著(P<0.05)高于化学激活法的细胞数(72.4 vs 65.2)。; 赛务加甫彭新荣李向臣安志兴郑月茂权富生张涌; 关键词：绵羊重构胚

TSA对牛孤雌激活与体外受精胚胎乙酰化水平的影响: 组蛋白乙酰化对胚胎的发育具有重要的作用，是一个与基因活性开和关密切联系的动态过程，高乙酰化标志活跃转录而低乙酰化则与转录抑制相关。本研究利用100ng/mL组蛋白去乙酰化抑制剂-曲古菌素-A(TSA)处理牛孤雌激活与体外...; 姚雅馨李向臣乔丽敏粱素丽关伟军马月辉; 关键词：体外受精胚胎发育; 文献传递

表观遗传因素对哺乳动物胚胎发育的影响被引量：2: 2012年; 哺乳动物核移植技术作为发育生物学的重要研究方法,在农业、医药、动物保护等方面具有巨大潜力。核移植的低成功率一直是其发展的瓶颈,而体细胞核在卵母细胞中的重编程效率低下是造成该瓶颈的重要诱因。DNA甲基化作为支配基因正常表达的表观遗传修饰方式,是调节基因组功能的重要手段,在胚胎正常发育过程中具有显著调节基因组功能的作用。本研究论述了DNA甲基化、基因印记、microRNA、X染色体失活等因素对哺乳动物胚胎发育中基因调控的影响。; 李亚男姚雅馨李向臣刘俊平关伟军马月辉; 关键词：细胞重编程表观遗传 DNA甲基化核移植

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