李伟平
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：河南工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- 基因工程菌SIPI-A0707代谢产物表柔红霉素的分离纯化工艺研究被引量：1
- 2011年
- 目的建立天蓝淡红链霉菌基因工程菌(SIPI-A0707)发酵液中表柔红霉素的分离纯化工艺。方法调节发酵液pH值为5,用甲醇抽提表柔红霉素;先采用大孔弱酸性阳离子交换树脂D152,吸附流速为2mL/min,0.05mol/L HCl-50%丙酮解吸;然后采用氯仿-水萃取体系,萃取pH为6.5,反萃取使用pH为1.5的蒸馏水,最后采用大孔吸附树脂Microsphere-1;吸附pH为7,吸附流速3mL/min,50%甲醇解吸分步收集,浓缩冻干。结果表柔红霉素HPLC纯度达到98.1%,总收率为40%以上。结论此工艺在生产上可行性较高,适合工业大量制备。
- 李伟平屈凌波卢亮邵雷陈代杰李继安
- 关键词：基因工程菌株分离纯化
- 增加糖基合成酶基因拷贝数对多杀菌素发酵单位的影响
- 2010年
- 多杀菌素是由刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa SIPI—A.2090)产生的重要农用抗生素,其生物合成途径已被阐明。NDP-葡萄糖合成酶(gtt)与葡萄糖脱氢酶(gdh)是多杀菌素生物合成途径中的限速酶。从SIPI-A.2090克隆gtt及gdh基因,并构建了表达这两个基因的整合型质粒,转入产多杀菌素刺糖多孢菌,发酵并验证其基因型。结果表明,阳性突变株SIPI—M.2092的多杀菌素发酵单位比出发菌株提高了173%,增加gtt和gdh基因拷贝数可以有效提高多杀菌素的发酵单位。
- 何泞君李继安林惠敏潘海学李伟平邵雷陈代杰
- 关键词：多杀菌素基因整合葡萄糖脱氢酶
- 工程菌制备表柔红霉素工艺的研究
- 表柔红霉素是重要的抗肿瘤药物，同时也是工业生产表阿霉素的重要前体。以表柔红霉素基因工程菌SIPI-A0707发酵方法生产表柔红霉素可以省去多步的化学合成反应，降低成本，减少污染，创造很大的经济效益和社会效益。本文对表柔红...
- 李伟平
- 关键词：菌株选育发酵分离纯化
- 文献传递
- 基因重组法构建表柔红霉素高产菌株被引量：2
- 2010年
- 表柔红霉素是抗肿瘤药表阿霉素的半合成前体。通过中断dnmV基因,并将酮基还原酶aveBⅥ基因导入,可以将柔红霉素产生菌改造成表柔红霉素产生菌。本研究通过此方法得到了产表柔红霉素的基因工程菌mHJ-02-30-1,在此基础上构建柔红霉素生物合成基因dnrU的同框敲除质粒pYG1116,将其转入原有的表柔红霉素产生菌mHJ-02-30-1,通过同源重组双交换的方法,将dnrU基因内部编码153个氨基酸的序列敲除。从而得到dnrU基因失活的突变株mYG1116E,发酵验证表明该突变株表柔红霉素发酵单位比出发菌株提高了约40%。
- 陈继业黄佳李伟平李继安陈代杰朱宝泉邵雷
- 关键词：同源重组基因置换基因敲除
