李丹莉
- 作品数：11 被引量：9H指数：2
- 供职机构：三峡大学医学院分子生物学研究所更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人乳头瘤病毒16型E2融合钙网蛋白抗肿瘤的实验研究
- 研究背景:HPV感染是一种常见的临床疾病,它与宫颈癌的发生发展关系密切。E2是HPV早期蛋白之一,涉及到病毒生命周期的各个阶段,是乳头瘤形成的必需蛋白。该蛋白与病毒的DNA复制、细胞凋亡、有丝分裂及其他早期蛋白的转录关系...
- 杨建林柳长柏李丹莉
- 文献传递
- CRT/E2-EGFP真核表达载体的构建、表达及其对肿瘤细胞调亡的影响
- 人乳头瘤病毒(HPW)高危型如HPV16型/18型等常引起重度不典型性增生,甚至恶性肿瘤。E2是HPV早期蛋白之一,HPV感染早期,E2蛋白调控病毒基因组的转录和复制在病毒的生命周期中起关键作用。在HPV感染的细胞中,低...
- 杨建林柳长柏李丹莉韩莉任东明
- 关键词：细胞内表达凋亡
- 文献传递
- 肿瘤的基因治疗被引量：1
- 2007年
- 基因治疗是将特定基因作为“药物”输送到患者体内，以治疗疾病的一种分子治疗技术。早期基因治疗的概念比较局限，主要是针对单基因缺陷性遗传疾病，目的在于用一个正常的基因来代替缺陷基因或补救缺陷基因的致病因素。由于肿瘤的发病率不断增高，肿瘤患者远多于单基因遗传性疾病的患者，使得近年来针对肿瘤基因治疗的研究远远超过了单基因遗传性疾病的基因治疗。
- 柳长柏李丹莉
- 关键词：肿瘤基因治疗肿瘤患者单基因遗传性疾病遗传疾病分子治疗致病因素
- 表达CRT-E2融合蛋白肿瘤疫苗诱导特异性抗肿瘤免疫应答被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨表达钙网蛋白(Calreticulin,CRT)和HPVE2融合蛋白的肿瘤疫苗在小鼠体内诱导的抗肿瘤免疫应答。方法:转染重组质粒得到高表达CRT、E2和CRT-E2融合蛋白的肿瘤细胞,作为肿瘤疫苗隔周两次腹腔注射免疫小鼠,17天后观察成瘤率,检测NK细胞杀伤活性、特异性T细胞增殖能力、CTL活性以及脾淋巴细胞分泌IFN-γ水平,并观察荷瘤小鼠生存期。结果:高表达CRT-E2融合蛋白肿瘤疫苗免疫小鼠后,其成瘤率明显低于其他实验组,NK细胞杀伤活性、特异性T细胞增殖能力、CTL活性和脾淋巴细胞分泌IFN-γ水平均显著高于其它实验组(P<0.01),生存期也明显延长(P<0.01)。结论:小鼠体内实验显示,表达CRT-E2融合蛋白肿瘤疫苗能够诱导特异性CD8+T细胞免疫应答和NK细胞活性,显著抑制了肿瘤生长。
- 杨建林李丹莉柳长柏
- 关键词：钙网蛋白E2肿瘤疫苗
- 肺癌肿瘤阻抑基因1:一种新的抑癌基因被引量：3
- 2006年
- 新的抑癌基因TSLC1属于免疫球蛋白超家族,位于人染色体11q23.2。TSLC1编码的蛋白质参与细胞间黏附、细胞运动、信号转导及免疫调节。研究显示,TSLC1在多种肿瘤中表达异常,它对肿瘤的影响主要表现为抑制瘤细胞增殖及诱导凋亡、改变瘤细胞的生长特性及基因表达,和抑制上皮间质转化。TSLC1的缺失与启动子甲基化关系密切,但其发挥抑癌作用的分子机制及信号转导途径尚有待研究。
- 李丹莉张昌菊
- 关键词：抑癌基因肿瘤TSLC1
- pIRES-CRT/E2-SLC真核表达质粒的构建、表达的实验研究
- 目的:为研究针对与人宫颈癌高度相关的18型人乳头瘤病毒(Human PapiUomavirus, HPV)的高效治疗性基因疫苗,我们将钙网蛋白(Calreficulin,CRT)基因 HPV18 E2融合, 并联合次级淋...
- 李丹莉张昌菊柳长柏
- 关键词：基因疫苗钙网蛋白次级淋巴组织趋化因子
- pIRES-CRT/E2-SLC真核表达质粒的构建、表达的实验研究
- 目的：为研究针对18型人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)的高效治疗性基因疫苗,我们将钙网蛋白(Calreticulin,CRT)基因 HPV18 E2融合,并联合次级淋巴组织趋化因子(Sec...
- 李丹莉张昌菊柳长柏
- 文献传递
- 人乳头瘤病毒E2蛋白及其相关疫苗
- 2007年
- 人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)感染在全球范围内颇为常见,其与肛门生殖器疣、生殖器肿瘤的发生关系密切。研究发现,乳头瘤的形成与HPVE2蛋白密不可分,该蛋白质涉及到病毒生命周期的各个阶段,与病毒的有丝分裂、其他早期蛋白的转录及细胞凋亡有关。近年来,各国学者利用E2蛋白的特性研制出E2相关疫苗,分别使用不同的重组病毒来传输E2,或是使用纯化的E2蛋白或E2融合蛋白,运输至体内的HPV转化细胞和/或HPV感染细胞中,以期达到防治HPV感染相关疾病的目的。
- 李丹莉张昌菊
- 关键词：人乳头瘤病毒E2蛋白疫苗
- plRES-CRT／E2-SLC真核表达质粒的构建、表达的实验研究
- 2007年
- 目的：为研究针对18型人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus，HPV）的高效治疗性基因疫苗，我们将钙网蛋白（Calreticulin，CRT）基因HPVl8 E2融合，并联合次级淋巴组织趋化因子（Secondary Lymphoid-tissue Chemokine，SLC），构建了作为HPV DNA基因疫苗的重组基因pIRES-CRT／E2-SLC，检测分析其在真核细胞中的表达。方法：以pDsRed2-N1-SLC为模板，利用PCR技术获得SLC基因片断，插入到pIRES载体的多克隆位点B中；以pCDNA3-CRT和HPVl8 genome DNA为模板，利用PCR技术分别获得CRT和HPVl8 E2基因片断，将CRT和E2插入到pIRES-SLC载体的多克隆位点A中。获得CRT／E2融合基因联合SLC的真核双表达质粒pIRES-CRT／E2-SLC。同时构建真核表达质粒pIRES-E2、pIRES-CRT／E2等作为实验对照。使用lipo-fectamine2000转染试剂将上述重组质粒转染人脐静脉内皮细胞株ECV，RT-PCR及Western Blot方法鉴定目的基因的表达。结果：获得阳性重组表达质粒pIRES-CRT／E2-SLC，经酶切鉴定及核酸序列测定证实真核表达质粒的构建成功。RT-PCR及Western Blot证实其目的基因在真核细胞中的正确表达。结论：正确构建真核表达质粒pIRES-CRT／E2-SLC。
- 李丹莉张昌菊柳长柏
- 关键词：次级淋巴组织趋化因子
- CRT-E2-EGFP表达、胞内定位及其对B16细胞凋亡的影响
- 2009年
- 目的:观察CRT-E2融合蛋白在小鼠黑色素瘤B16细胞中的表达及其定位,并探讨CRT引起的E2蛋白表达定位改变对B16细胞增殖及调亡的影响。方法:构建荧光真核表达载体pEGFP-CRT、pEGFP-E2、pEGFP-CRT-E2,将上述载体以及空载体pEGFP-C1经脂质体瞬时转染B16细胞,West-ernblot分析确认目的蛋白表达。荧光显微镜下观察CRT-E2融合蛋白在细胞中表达定位;流式细胞术检测不同重组表达载体转染B16细胞24h、48h后,对细胞周期的影响和诱导凋亡的情况。结果:CRT-E2融合蛋白在B16细胞中正确表达,主要分布于细胞质,能将细胞阻滞于G1期,有效诱导肿瘤细胞发生凋亡(P<0.01)。结论:成功构建CRT-E2真核表达载体,外源性CRT能够引起E2蛋白表达定位于细胞质,并明显促进了肿瘤细胞的调亡。
- 杨建林柳长柏李丹莉韩莉
- 关键词：HPVE2钙网蛋白凋亡
