朱晓燕
- 作品数:32 被引量:52H指数:4
- 供职机构:郑州大学基础医学院更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划河南省医学科技创新人才工程项目河南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生哲学宗教艺术文化科学更多>>
- 组织型纤溶酶原激活剂真核表达载体的构建及其在乳癌细胞系MCF-7中的瞬时表达被引量:1
- 2006年
- 目的:构建组织型纤溶酶原激活剂(t- PA)真核表达载体,并检测其在乳癌细胞系MCF-7中的瞬时表达。方法:以含t PAcDNA的质粒PETPFR为模板,PCR扩增目的片段t PA,HindⅢ和SalⅠ双酶切t- PA,HindⅢ和XhoⅠ双酶切pcDNA3真核表达载体。SalⅠ和XhoⅠ的黏性末端互补,体外连接酶切产物,重组体转化感受态JM109细菌,筛选菌落和测序鉴定。以脂质转染胺试剂LipofectamineTM2000将pcDNA3t PA转染入乳癌细胞系MCF-7,G418筛选。应用原位杂交技术,以地高辛标记的t PAcDNA为探针,显示t PA在MCF7中的瞬时表达。结果:电泳获得目的片段t PA的条带2.1kb,初步鉴定为阳性重组体,测序证实为正确的t PA序列。MCF-7细胞原位杂交显示大部分细胞表达阳性。结论:组织型纤溶酶原激活剂真核表达载体构建成功,可在乳癌细胞系MCF7中表达。
- 朱晓燕岳保红丁一张钦宪
- 关键词:组织型纤溶酶原激活剂真核表达载体
- 不同类型人胃黏膜组织中端粒长度随年龄的变化
- 2008年
- 目的:探讨不同类型人胃黏膜组织中端粒长度随年龄的变化。方法:选择32例胃癌患者(男12例,女20例;年龄20~岁3例,30~岁7例,40~岁10例,50~岁4例,60~69岁8例;肿瘤直径〈3cm 13例,≥3cm 19例;高、中分化6例,低分化19例,黏液腺癌或印戒细胞癌7例;肿瘤侵及黏膜层和黏膜下层3例,深肌层11例,浆膜层18例;有淋巴结转移19例,无淋巴结转移13例)手术切除的癌组织、癌旁组织和正常胃黏膜组织标本,用酚-氯仿法抽提基因组DNA,再经限制性内切酶HinfⅠ酶切后,应用Southern杂交技术检测端粒长度,并分析端粒长度与患者年龄以及临床病理指标的关系。结果:正常胃黏膜组织的端粒长度为(6728±1707)bp,且随年龄增长端粒长度缩短(P〈0.05);癌旁组织的端粒长度为(5969±1659)bp,癌组织的端粒长度为(5088±1712)bp,胃癌和癌旁组织的端粒长度均不随年龄增长而缩短(P均〉0.05)。按正常胃黏膜组织、癌旁组织、胃癌组织的顺序,端粒长度依次缩短(P均〈0.05),且胃癌组织端粒长度与性别、肿瘤大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移等病理指标均无相关性(P均〉0.05)。结论:端粒缩短是胃癌早期发生的分子事件;端粒长度变化不宜作为判断胃癌恶性程度的生物标志。
- 刘书漫李倩如朱晓燕张钦宪
- 关键词:胃黏膜胃癌端粒长度年龄
- siRNA对生长抑素基因表达的抑制作用
- 2006年
- 目的:研究siRNA对生长抑素(SOM)基因表达的抑制作用.方法:根据生长抑素基因序列设计和合成 RNA干扰的靶序列,应用RiboMAXT7体外转录试剂盒合成siRNA并转染胃癌细胞系 SGC-7901,经RT-PCR,免疫组化法检测生长抑素在mRNA和蛋白质水平的抑制效应.结果:成功合成了siRNA(21 bp).胃癌细胞系 SGC-7901中SOM基因的表达呈强阳性,分布在胞质中,siRNA作用48 h后SOM基因的表达明显抑制,与空转染和空白对照组相比有显著性差异(49.71%±0.056%vs 10.49%±0.021%, 0%,P<0.01).结论:siRNA可特异性抑制生长抑素基因的表达.
- 朱晓燕岳保红张钦宪
- 关键词:生长抑素RNA干扰
- 成人和成体羊心脏组织动力学比较被引量:3
- 2007年
- 目的:比较正常成人和成体羊心脏的组织动力学过程,探讨心脏组织演化的规律。方法:取12只山羊和6例人尸检心脏组织标本及羊心脏传导系统标本,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察。结果:正常成人与成体羊心脏组织演化均包括心内膜-心肌演化体系、房室间区-心肌演化体系和肌层内心肌演化体系,但在羊心内膜-心肌演化体系中的优势演化途径是心内膜细胞-心肌生成单位-心肌细胞演化系,人的优势演化途径是心内膜细胞-非心肌生成单位-心肌细胞演化系;在肌层内心肌演化体系中有细胞重建的重要演化方式。结论:正常成人和成体羊心肌演化总体模式基本相似,但各自具有不同优势演化途径。
- 史学义朱晓燕张清莲邢文英刘书漫张娓
- 关键词:心瓣膜
- 胃癌遗传不稳定性与胃肠激素和核基质蛋白的研究
- 张钦宪丁一苏永乐晓萍邢文英朱晓燕张娓王峰杨继要冯若
- 该研究应用PCR-变性PAGE-银染技术,研究了不同分化类型的胃癌组织和胃癌细胞系BGC-823p16基因微卫星不稳定性,并对胃癌细胞系进行了细胞遗传学研究;应用原位杂交技术,探讨了错配修复基因hMSH2在胃癌、癌旁和正...
- 关键词:
- 关键词:胃癌胃肠激素核基质蛋白
- 胃癌组织核基质与p16基因上游序列的相关性研究被引量:1
- 2004年
- 目的 :研究胃癌组织核基质蛋白与 p16基因上游序列的相关性。 方法 :应用SDS PAGE技术和Southwestern印迹技术 ,对 2 2例胃癌组织、癌旁组织及正常组织的核基质蛋白进行研究。结果 :与正常组织比较 ,胃癌组织 3 0kD、2 8kD的核基质蛋白表达量明显减少 (P <0 .0 5 ) ;不同分化类型及不同临床分期胃癌组织间比较 ,3 0kD、2 8kD核基质蛋白表达量无明显差异 (P >0 .0 5 )。正常组织核基质蛋白与p16基因上游序列的结合主带为 2 8kD、3 0kD、40kD、43kD、5 0kD ,胃癌组织中为 40kD、66kD。胃癌组织与正常组织比较 ,66kD结合阳性信号明显增强 (P <0 .0 5 ) ;而不同分化类型及不同临床分期胃癌组织间 ,66kD结合阳性信号无显著性差异。结论 :胃癌组织中核基质蛋白的改变及 66kD蛋白与p16基因上游区结合量的异常可能是胃癌发生的早期分子事件。
- 张钦宪丁一苏永乐晓萍邢文英朱晓燕张娓
- 关键词:胃癌核基质P16基因癌组织
- 含纳米氧化硅的低碳铝碳不烧滑板砖及制备方法
- 本发明公开了一种含纳米氧化硅的低碳铝碳不烧滑板砖,它由下述重量配比的原料制成:70~80wt%的刚玉颗粒和细粉、5~15wt%的铝硅粉、6-8wt%的活性氧化铝微粉、2~4wt%碳、含硼添加剂0.5~5wt%,纳米二氧化...
- 刘新红贾晓林李素平冯隆朱晓燕马驰远
- 文献传递
- 组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)真核表达载体的构建
- 血栓栓塞性疾病是当前危害人类健康导致死亡的主要原因之一。防栓和溶栓是防治该病的关键。目前,国产正式应用于临床的溶栓药暂限于人尿激酶/(Urokinase,UK/),链激酶/(Streptokinase,SK/),而尿激酶...
- 朱晓燕
- 关键词:组织型纤溶酶原激活剂真核表达载体转染
- 文献传递
- 核干细胞因子特异性短发夹状RNA对HL-60细胞分化抗原和生物学性质的影响被引量:8
- 2006年
- 目的研究核干细胞因子(nuc leostem in,NS)特异性短发夹状RNA(shRNA)阻断NS基因表达对HL-60白血病细胞分化抗原及生物学性质的影响,探讨NS的生物学功能和与急性白血病的关系以及用于基因治疗的可能性。方法特异性转染试剂和合成的NS短发夹状RNA(NS-shRNA)体外直接转染HL-60细胞,采用RT-PCR判断基因阻断效果,MTT法测定转染后细胞增殖能力,流式细胞仪(FCM)测定细胞分化抗原,形态学观察细胞形状和生长状态,血细胞分析仪测定细胞大小、粒度。结果合成的2条NS-shRNA均能明显阻断NS基因表达,抑制率分别为37.82%和71.88%;NS-shRNA能显著抑制HL-60细胞的增殖并存在时间和浓度依赖性,以48 h和10 nmol/L浓度最佳。转染后:分化抗原CD11b、CD33、CD14、CD64、HLA-DR增高,CD38降低,显示有向粒系继续成熟和向单核系重新分化趋势;细胞聚团性减弱,碎片增多,一部分细胞形态变成梭形和长尾形,染色后细胞核紧密,凹陷,髓过氧化物酶(MPO)和α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)活性增强;大小和粒度分析小体积细胞和核碎裂细胞增多。结论NS-shRNA通过阻断NS基因表达,对HL-60细胞有抑制增殖和促分化作用,改变了细胞的生物学性质,使细胞恶性程度有所减弱,并有可能诱发凋亡,在白血病的基因中具有潜在的临床价值。
- 岳保红朱晓燕张功员孙玲赵小强王清霞刘帅张秋堂张钦宪
- 关键词:核干细胞因子短发夹状RNA分化抗原生物学性质分化
- siRNA抑制SOM基因表达的有效序列筛选被引量:1
- 2006年
- 目的研究siRNA对胃癌细胞BGC-823生长抑素(SOM)分泌的抑制效应。方法设计2条针对SOM基因不同位点的寡核苷酸序列,应用RiboMAXT7体外转录合成siRNA并转染胃癌细胞系BGC-823,经RT-PCR,免疫细胞化学法检测SOM mRNA和蛋白的表达水平,筛选抑制效果最佳的序列。结果转染后24 h、48 h及72 h,SOM基因的表达被抑制,抑制效率有差异。结论体外合成siRNA可以抑制SOM基因的表达,抑制效率呈现浓度及时间依赖性。
- 朱晓燕刘书漫张钦宪
- 关键词:生长抑素RNA干扰胃癌细胞系