朱晓文 作品数:18 被引量:60 H指数:4 供职机构: 军事医学科学院军事兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 吉林省卫生厅科研基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 更多>>
A型流感病毒跨种传播和致病性相关蛋白研究进展 被引量:4 2011年 A型流感病毒是重要的人和动物病原体,每年都会在人群中引发季节性流感流行,偶尔还会引发全球流感大流行,对公共卫生安全构成严重威胁。研究发现,A型流感病毒的跨种传播与该病毒的多个蛋白有关,其中血凝素是该病毒宿主范围的主要限制因素,但聚合酶蛋白和非结构蛋白1(NS1)的作用也不容忽视。A型流感病毒通过不断地适应各类宿主和长期地进化,每年都能够产生大量致病性未知且具有潜在流行性的新毒株,人们经过长期地研究发现,A型流感病毒的致病性主要受该病毒的聚合酶蛋白、血凝素蛋白和非结构蛋白1(NS1)上某些特定氨基酸的影响。论文从以上几方面对A型流感病毒跨种传播和致病性分子机制的研究进展进行综述。 于志君 朱晓文 刘红 李硕 范宝静 王世申 吴静 武艳丽 王铁成 杨松涛 黄耕 高玉伟 夏咸柱关键词:A型流感病毒 分子机制 H9亚型禽流感病毒HA基因的克隆与序列分析 被引量:4 2011年 目的扩增、克隆H9N2 HA基因,并进行序列分析,为H9N2流感病毒种间及跨种传播机制研究奠定基础。方法设计特异性引物,扩增克隆H9N2亚型禽流感病毒,测序后进行序列分析。结果成功克隆出4株H9N2亚型禽流感病毒,全长均为1.7 kb,ORF为1 683 bp,编码560个氨基酸;联机检索,与参考毒株比对核苷酸和氨基酸同源性均在90%以上。结论成功克隆4株H9N2亚型禽流感病毒,序列分析显示其核苷酸和推导氨基酸与参考毒株高度同源。 李林 桑晓宇 朱晓文 于志君 李天松 王磊 黄海楠 阮洋 秦峻岭 刘玉秀 高玉伟 夏咸柱 胡桂学关键词:H9亚型禽流感 HA基因 克隆 豚鼠TNF、IFN-γ、IL-1荧光定量PCR检测方法的建立 2012年 目的建立测定豚鼠肺脏中TNF、IFN-γ、IL-1的荧光定量PCR方法。方法根据已有序列设计TNF、IFN-γ、IL-1基因检测引物,建立荧光定量PCR检测方法。结果用建立的荧光定量PCR检测豚鼠TNF、IFN-γ、IL-1基因的溶解曲线峰值单一,扩增水平稳定。结论成功建立了检测豚鼠TNF、IFN-γ、IL-1基因的荧光定量PCR方法,为豚鼠先天免疫方面研究提供技术支持。 张钊伟 张坤 朱晓文 忻悦 于志君 刘玉秀 桑晓宇 程凯慧 刘红 赵永坤 王铁成 高玉伟 夏咸柱关键词:荧光定量PCR 变异甲型H1N1流感病毒疫苗候选株的构建研究 流感(influenza)是由流感病毒(influenza virus, IV)引起的一种高度传染性呼吸道疾病。在美国,每年估计有2500万至5000万流感患者,导致平均22.5万人住院治疗,在过去的三十年中,据估计每年... 朱晓文关键词:甲型H1N1流感病毒 疫苗 反向遗传学 文献传递 裂谷热病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:4 2012年 目的根据裂谷热病毒(Rift Valley Fever Virus,RVFV)M片段的保守序列设计并合成特异性引物和TaqMan探针,建立鉴定裂谷热病毒的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。方法合成裂谷热病毒M片段基因,PCR扩增后将其连入pMD18-T载体,构建重组质粒作为阳性标准品,以10倍系列稀释的标准品进行荧光定量PCR扩增,并绘制标准曲线。结果所绘制标准曲线的相关系数为0.999,该检测方法的灵敏度达40copies/μL,特异性好,对除裂谷热病毒外其他病毒(PPRV、HFV、RV、SPPV和GIPV)检测均为阴性。该方法重复性好,批内重复和批间重复的变异系数均小于1%。结论裂谷热病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立为裂谷热病毒的快速准确诊断及流行病学调查提供了有效的手段。 朱晓文 李林 桑晓宇 高玉伟 胡桂学 冯娜 王铁成 步志高 夏咸柱关键词:实时荧光定量PCR TAQMAN探针 犬瘟热病毒引起啮齿类动物肥胖症的机制研究进展 2010年 在过去的30年中,已报道8种病原体可引起人和动物的肥胖,其中犬瘟热病毒是首个报道的可引起动物肥胖症的病毒。研究发现感染犬瘟热病毒的啮齿动物后期表现为病态肥胖。早期犬瘟热病毒的复制对感染鼠下丘脑造成不可逆的损伤,感染鼠表现为体重增加、脂肪细胞增大、体内瘦素受体表达水平下降、黑色素浓集激素前体(ppMCH)mRNA水平下降,高胰岛素血症,儿茶酚胺水平降低,这些因子与机体的食欲增强和(或)能量消耗减少有密切关系,与肥胖症的特征相一致。论文综述了有关犬瘟热病毒引起啮齿类动物肥胖症机制的研究进展。 刘玉秀 高玉伟 李天松 王磊 于志君 李林 张钊伟 朱晓文 冯娜 黄耕 杨松涛 王铁成 夏咸柱关键词:犬瘟热病毒 啮齿动物 肥胖症 甲型H1N1流感病毒对未孕雌鼠及孕鼠的致病性研究 被引量:1 2010年 目的应用A/Changchun/01/2009(H1N1)(简称XD09)分别感染未孕昆明雌鼠和孕鼠,研究甲型H1N1流感病毒对怀孕哺乳动物的致病性差异。方法 XD09鼻内接种8周龄雌性未孕雌鼠和孕鼠,于感染后第2 d各处死3只,分别检测病毒在鼠脑、鼻甲骨、肺、肝、脾、肾、胎盘(孕鼠)中的分布,同时计算病毒的MLD50,并观察感染鼠临床症状。结果未孕昆明雌鼠感染XD株病毒后第2 d出现被毛粗乱,呼吸窘迫,体重下降;病毒主要分布在肺脏和鼻甲骨,滴度分别为(5.83±0.29)log10eID50/ml和(3.42±0.38)log10eID50/ml,脾组织也检测到病毒的复制;该病毒对未孕雌鼠的MLD50为6.25 log10eID50。昆明孕鼠感染后第3 d开始出现被毛粗乱、活动减少等轻微临床症状,但未见明显的呼吸窘迫,其中1只孕鼠攻毒后流产并产下木乃伊胎儿;病毒主要分布在肺脏和鼻甲骨等呼吸道组织,滴度分别为(5.07±0.55)log10eID50/ml和(4.08±0.29)log10eID50/ml,脑组织也检测到病毒的复制;该病毒对孕鼠的MLD50>6.5 log10eID50。结论甲型H1N1流感病毒不需要传代适应就能够直接感染未孕雌鼠,而季节性流感病毒通常需要在未孕雌鼠体内连续传代适应后才可在其肺部有效地复制,因此该病毒对未孕雌鼠的致病性要强于季节性流感病毒。研究还发现病毒在未孕雌鼠和孕鼠间表现出不同的组织嗜性,为近一步研究H1N1流感病毒感染孕妇病死率偏高现象建立了动物实验模型。 于志君 刘玉秀 高玉伟 朱晓文 李林 候小强 李天松 范泉水 夏咸柱关键词:甲型H1N1流感病毒 孕鼠 组织嗜性 两株B型流感病毒的基因组序列分析 被引量:4 2013年 目的了解两株B型流感病毒的基因组序列特征。方法对两株B型流感病毒进行全基因组序列测定和基因进化特性的分析。结果成功扩增出两株B型流感病毒的全基因组序列,并且两毒株的基因组均属于Yamagata系类似株Ⅱ系。两株病毒的基因组序列与疫苗株B/Florida/4/2006(Yamagata系)以及Victoria系代表株B/Brisbane/60/2008、B/Malay-sia/2506/2004相比,HA基因同源性为89.7%~97.3%,NB基因同源性则为95.4%~98.4%。两株病毒的HA蛋白与WHO推荐的疫苗株B/Florida/4/2006(Yamagata系)相比,存在11处氨基酸突变,其中HA的N131K氨基酸位点突变,可能对抗原性产生影响。NB的S198N氨基酸位点突变可能影响神经氨酸酶抑制剂的灵敏度。结论两株B型流感病毒的遗传进化状态稳定,但是与同分支中的毒株基因序列部分位点存在差异。 岳秀芳 夏咸柱 于志君 朱晓文 刘红 李硕 范宝静 王世申 吴静 武艳丽 王铁成 杨松涛 黄耕 高玉伟 胡桂学关键词:B型流感病毒 基因序列 进化树 一种流感病毒受体结合特性检测试剂盒 本实用新型涉及医疗设备领域,具体涉及一种流感病毒受体结合特性检测试剂盒,它包括盒体、盒盖与反应槽,所述盒盖设置在盒体上,所述反应槽设置在盒体内,所述反应槽上方设置有红细胞试管,所述红细胞试管右侧设置有VCNA溶液试管,所... 高玉伟 孙伟洋 于志君 桑晓宇 朱晓文 王铁成 杨松涛 王化磊 赵永坤 李元果 夏咸柱文献传递 5株H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白分子特征分析和豚鼠间传播能力的评估 被引量:3 2012年 为研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在哺乳动物间的传播能力,本研究以豚鼠为模型评价了5株H9N2亚型AIV在豚鼠体内的复制能力和水平传播能力,并分析了5株病毒血凝素(HA)蛋白的分子特征。结果表明,5株病毒均属于CK/Beijing谱系,其中2株病毒的HA具有人样受体特征(Lys226),2株病毒具有禽样受体特征(Gln226),而A/Chicken/JN/Li-2/2010(H9N2)株在该位点的氨基酸残基为苯丙氨酸(Phe226)。裂解位点分析表明,5株病毒均具有低致病性AIV特征。个别病毒的潜在糖基化位点存在增加或缺失现象。感染试验表明,5株病毒均能够在豚鼠呼吸道复制。并且在鼻甲骨处复制稳定,平均病毒滴度为2.01 Log EID50/mL~4.5 Log EID50/mL。传播试验表明,所有病毒株的人工接种豚鼠的鼻洗液中均能够检测到病毒,最长排毒期为接毒后第8 d,而接触组豚鼠鼻洗液中未检测到病毒。本研究表明,5株H9N2亚型AIV均属于CK/Beijing谱系,部分病毒株的HA蛋白已具备人样受体结合特征,并且关键氨基酸位点(226位)处出现新的突变。5株病毒均能够在豚鼠呼吸道复制并通过上呼吸道排毒,但不能在豚鼠间同群传播。 桑晓宇 高玉伟 李林 丁洁 朱晓文 张钊伟 于志君 张坤 程凯慧 冯娜 刘红 王铁成 杨松涛 黄耕 夏咸柱关键词:H9N2亚型禽流感病毒 血凝素