张晓刚
- 作品数：27 被引量：196H指数：9
- 供职机构：解放军第309医院更多>>
- 发文基金：军队医药卫生科研基金卫生部科学研究基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ahpC基因突变与结核分支杆菌耐异烟肼的研究被引量：13
- 1998年
- 目的了解我国结核分支杆菌耐异烟肼（ＩＮＨ）分离株ａｈｐＣ编码基因及其启动子突变情况，研究其与ＩＮＨ耐药关系。方法通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）单链构象多态性（ＳＳＣＰ）方法分析６２株结核分支杆菌临床分离株ａｈｐＣ及其启动子基因。以Ｈ３７ＲＶ标准株为对照。结果３２株结核分支杆菌药物敏感株ａｈｐＣ及其启动子基因ＳＳＣＰ均泳动正常；３０株耐ＩＮＨ分离株ａｈｐＣ编码基因ＳＳＣＰ也未见异常；１２株高度耐ＩＮＨ分离株中，５株ａｈｐＣ启动子ＳＳＣＰ泳动异常；１８株低度耐ＩＮＨ分离株的ａｈｐＣ启动子泳动正常。结论结核分支杆菌ａｈｐＣ编码基因与耐ＩＮＨ无关；ａｈｐＣ启动子突变是结核分支杆菌ｋａｔＧ改变、过氧化氢酶缺乏的代偿性变化，也许能作为结核分支杆菌高度耐ＩＮＨ的间接指标。
- 吴雪琼张俊仙胡忠义胡忠义庄玉辉张晓刚李国利
- 关键词：结核分支杆菌抗药性异烟肼基因突变
- 重组结核分枝杆菌16000蛋白抗原(rPA16)豚鼠皮肤试验效果的研究被引量：4
- 2000年
- 目的 :以豚鼠为动物模型 ,分析重组 16 0 0 0蛋白抗原rPA16能否引起迟发型超敏反应 (DTH)。方法 :连续 3次皮下注射结核分枝杆菌H37Rv热灭活菌体 ,使豚鼠致敏后进行皮肤试验。以生理盐水为阴性对照 ,PPD为阳性对照组 ,重组蛋白则设置 0 .1,0 .2 ,0 .4μg三个剂量 ,分别进行背部皮内注射 ,注射后 2 4～ 72h观察豚鼠注射局部皮肤的皮痘、硬结程度。结果 :0 .1～ 0 .4μg/ 0 .2ml的重组蛋白抗原rPA16在 48～ 72h阳性反应平均直径与PPD相比均无显著差异 (均P >0 .1) ,3种浓度的重组蛋白豚鼠皮肤反应的阳性率之间也无显著差异 (P >0 .1)。 48h为rPA16引起豚鼠皮肤反应的较佳测量时间。结论 :重组结核分枝杆菌 16 0 0 0蛋白抗原与PPD相比 ,所引起的豚鼠皮肤DTH的反应能力基本相似 。
- 熊志红庄玉辉张晓刚何秀云董恩军昌增益
- 关键词：结核分枝杆菌皮肤试验
- 结核分支杆菌利福平耐药基因突变的研究被引量：39
- 1998年
- 目的了解我国结核分支杆菌耐利福平（ＲＦＰ）分离株ｒｐｏＢ基因突变情况，建立快速检测结核分支杆菌耐药基因型的分子药敏试验方法。方法通过聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）和ＰＣＲ－直接测序法（ＰＣＲ－ＤＳ）分析５０株结核分支杆菌临床分离株的ｒｐｏＢ基因。结果３株结核分支杆菌药物敏感株和２株非ＲＦＰ耐药株中，仅１株ｒｐｏＢＳＳＣＰ图谱异常的药物敏感株出现５３１位密码子ＴＣＧ→ＴＴＧ突变。４５株ＲＦＰ耐药株中，１０株ＳＳＣＰ和ＤＳ分析均未见ｒｐｏＢ突变，３５株ＳＳＣＰ和ＤＳ分析异常，其中１４株为５３１位密码子ＴＣＧ→ＴＴＧ或ＴＧＧ或ＴＡＣ突变，１４株为５２６位ＣＡＣ→ＴＡＣ或ＧＡＣ或ＣＣＣ或ＣＴＣ或ＧＴＣ突变，２株为５１６位ＧＡＣ→ＧＴＣ或ＴＡＣ突变，２株为５１６位和５２６位及５１５位和５１６位密码子双点突变，３株ｒｐｏＢ序列与结核分支杆菌不同。结论大多数结核分支杆菌耐ＲＦＰ是由于其ｒｐｏＢ基因突变所致。
- 吴雪琼张俊仙庄玉辉张晓刚李国利何秀云张军芝贾树林
- 关键词：结核杆菌利福平结核病抗药性
- rIL-2在小鼠体内抗结核菌能力的研究被引量：9
- 1992年
- 用人型结核菌H_(37)RV株和耐药结核菌分别感染小鼠。5和15天后,每只小鼠以重组白细胞介素-2作肌肉注射,分5000u和10000u/只两组,连续注射10天,观察小鼠的抗菌能力。结果表明,经实验治疗后,小鼠脾脏内总菌数和活菌数明显减少。感染后于上述用药时间,剂量组之间无显著差别。
- 庄玉辉李国利张晓刚刘新垣王小宁
- 关键词：白细胞介素2
- 结核分支杆菌重组38000蛋白抗原诱导豚鼠迟发性超敏反应的研究被引量：7
- 2000年
- 目的 探讨结核分支杆菌重组 380 0 0抗原 (rMT38)诱导豚鼠产生迟发性超敏 (DTH)反应的能力及影响因素。方法 常规皮肤试验法 :H3 7Rv致敏豚鼠 ,皮试时以生理盐水为阴性对照 ,5IUPPD为阳性对照 ,0 1μg、0 2 μg、0 4μgrMT38分别于背部皮内注射 ,注射后 48h测量红肿或硬结反应横、纵直径 (mm)。皮肤试验轮圈法 :5IUPPD及 0 1μg、0 2 μg、0 4μgrMT38于同一只豚鼠皮试 ,每批用 6只已致敏的豚鼠 ,共三批试验。同样 ,5IUPPD及 0 1μg、0 2 μg、0 4μg混合抗原同上皮试。于注射后 2 4h、48h、72h测量红肿或硬结反应横、纵直径 (mm)。结果 常规皮肤试验法 ,0 4μgrMT38诱导DTH反应总平均直径与 0 1μg、0 2 μg相比 ,差异存在极显著性 (P =0 0 0 9、P =0 0 1) ;0 1μg、0 2 μgrMT38诱导豚鼠DTH与PPD相当 ,统计分析这两种剂量差异无显著性。轮圈法 ,对应剂量rMT38与混合抗原诱导豚鼠DTH效果相似。剂量效应 ,对于rMT380 1μg、0 2 μg剂量较合适 ;而混合抗原 ,0 4μg剂量或更高较合适。观察时间 ,rMT38诱发豚鼠DTH 48h测量较好 ,而混合抗原则为 2 4h。 结论rMT38能诱导豚鼠DTH反应 。
- 何秀云庄玉辉张晓刚董恩军熊志红昌增益
- 关键词：结核分支杆菌超敏反应
- 结核病病原菌基因诊断技术的建立与变异菌生物学特性及其临床应用
- 庄玉辉李国利吴雪琼张晓刚张寅
- 该项目属细菌学与临床分子生物学领域。在我国率先报道结核杆菌PCR技术条件与技术方案，比国外有改进并首次研制出结核杆菌PCR诊断试剂盒，独家通过国家检定所鉴定；研制出临床标本前处理试剂盒；PCR检测总例数(737)，阳性率...
- 关键词：
- 关键词：结核杆菌诊断试剂盒PCR检测
- 16S rRNA基因突变与结核分支杆菌耐链霉素的研究被引量：15
- 1998年
- 我们已证实大多数结核分支杆菌耐链霉素（ＳＭ）是由于其核糖体Ｓ１２蛋白编码基因（ｒｐｓＬ）错义突变所致［１］，在此基础上，通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）单链构象多态性（ＳＳＣＰ）和ＰＣＲ直接测序法（ＤＳ）进一步研究其１６ＳｒＲＮＡ编码基因（ｒｓ）的突变...
- 吴雪琼张俊仙庄玉辉张晓刚李国利何秀云张军芝贾树林
- 关键词：RRNA基因突变结核分支杆菌链霉素药敏试验
- 结核分支杆菌16000抗原基因在大肠杆菌中的高效表达及其产物纯化被引量：5
- 1999年
- 目的 获得高效表达结核分支杆菌１６ ０００ 抗原的大肠杆菌工程菌，将培养物纯化后得到重组１６ ０００ 蛋白抗原纯品，并检测其免疫学特性。方法 用聚合酶链反应（ＰＣＲ） 方法获得目的基因构建大肠杆菌高效表达株。聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳＰＡＧＥ） 分析重组蛋白抗原的相对分子质量大小及表达形式。ＤＥＡＥ及ＰＥＩ凝胶纯化重组蛋白。Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹及酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ） 分析重组蛋白的免疫原性。结果 构建了具有正确基因序列的重组表达载体，在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中诱导表达，重组蛋白占菌体总蛋白的４０％ ，Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹结果证实该重组蛋白能与抗结核分支杆菌多克隆抗体发生特异免疫结合反应。ＥＬＩＳＡ分析中，该纯化的重组抗原能区别抗结核抗体阳性患者血清及正常人血清。结论 实验中获得了能高效表达１６ ０００ 蛋白抗原的大肠杆菌工程菌，以可溶性形式存于胞浆内。该重组蛋白具有特异的免疫原性。
- 熊志红庄玉辉张晓刚何秀云董恩军昌增益
- 关键词：结核分支杆菌抗原基因表达
- 结核分支杆菌弱毒株H37Ra减毒机制的初步探讨
- 2003年
- 目的:通过结核分支杆菌H37Rv和H37Ra蛋白质组分析,以期了解与H37Rv毒力相关的基因和H37Ra减毒机制.……
- 何秀云庄玉辉张晓刚李国利
- PCR检测胸水结核杆菌的研究被引量：4
- 1992年
- 本文介绍应用PCR(聚合酶链反应)技术检测结核性胸水52例、癌性胸水15例,并与涂片镜检和分离培养对比。PCR检测结核性胸水阳性率28.8％,涂片镜检为3.9％,培养均阴性。癌性胸水三种方法均为阴性。
- 李国利庄玉辉张晓刚吴雪琼汪家志王立华芦友发高杉范素芬
- 关键词：水胸结核杆菌聚合酶链反应
