宋水川 作品数:9 被引量:10 H指数:2 供职机构: 解放军117医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江大学城市学院教师科研基金 上海市科学技术发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
HBx基因的克隆和序列分析及其真核表达载体的构建 被引量:1 2005年 目的:通过HBx基因的克隆、序列对比和进化树分析以及pcDNA 3.1(+)-HBx真核表达载体的构建,为进一步研究HBx基因与肝癌发生发展的关系打下基础。方法:用O liga6.0结合P rim er P rem ier 5.0软件设计特异性引物,通过PCR方法从广西HB sA g阳性病人血清中(血清型A drq+)分离得到的病毒株构建的HBxA g质粒中扩增HBx基因。用DNA star5.01和V ector NT I Su ite 8.0软件进行序列对比分析和进化树构建。经双酶切将HBx基因定向插入到pcDNA 3.1(+)质粒中。结果:成功克隆了基因型C型突变型HBx基因,并构建出真核表达载体pcDNA 3.1(+)-HBx。新基因被G eneB ank接受,在G eneB ank上登录号为AY 839630。序列对比和进化树分析表明,新克隆的基因与野生基因型C型有高度的同源性(97.8%),2.2%的变异。结论:从广西HB sA g阳性病人病毒株(血清型A drq+)中发现了新的基因型C型突变型HBx基因(m u tan t genotype C)。pcDNA 3.1(+)-HBx真核表达载体的构建,将为进一步研究HBx基因在树实验性肝癌诱发过程中所起的作用打下基础。 匡志鹏 谢裕安 梁安民 苏建家 张瑞萍 宋水川 王皓关键词:肝癌 HBX基因 真核表达载体 CTLA4-Ig对变应性接触性皮炎小鼠模型的治疗作用 被引量:2 2002年 目的探讨B7/CD28共刺激通路阻断剂CTLA4-Ig对变应性接触性皮炎的作用。方法建立小鼠二硝基氟苯(DNFB)变应性接触性皮炎模型,以不同剂量的CTLA4-Ig进行静脉注射,通过检测小鼠耳廓肿胀度观察其对DNFB和FITC刺激的反应,并观察CTLA4-Ig的长期疗效,同时对治疗后的小鼠脾细胞进行体外淋巴细胞增殖实验。结果CTLA4-Ig有明显的治疗作用,DNFB变应性接触性皮炎小鼠经治疗耳廓肿胀抑制率最高达69.7%,而且治疗的小鼠在激发后的14d用DNFB再刺激能产生无应答反应,但对FITC的再刺激表现为耳廓肿胀明显,过继转移CTLA4-Ig治疗小鼠的淋巴细胞能诱导受体鼠对DNFB的刺激产生特异性免疫耐受。结论应用B7/CD28共刺激通路阻断剂CTLA4-Ig融合蛋白能有效地抑制接触性超敏反应,为临床治疗Ⅳ型变态反应性皮肤病如湿疹等提供一种新的可能的治疗策略。 周倩 寇庚 钱卫珠 王皓 刘彦君 王晓芸 宋水川 金军 李晓冬 吴孟超 郭亚军 陈列平关键词:CTLA4-IG 变应性接触性皮炎 接触性超敏反应 药理学 人参皂甙Rbl对血管性痴呆大鼠认知功能及突触素表达的影响 被引量:4 2011年 目的:研究人参皂甙Rbl(GSRbl)对血管性痴呆大鼠认知功能与海马突触素表达的影响。方法:将36只大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组。以双侧颈总动脉结扎法制作血管性痴呆大鼠模型。造模后治疗组大鼠腹腔注射GSRbl(30mg·kg^-1·d^-1)。Y型迷宫和免疫组织化学法结合图像分析检测各组大鼠认知功能和海马突触素免疫阳性产物的平均光密度。结果:与对照组大鼠相比,模型组大鼠Y型迷宫中错误次数增加,模型组大鼠学习记忆能力减退,其海马区突触素免疫反应阳性产物平均光密度降低;与模型组相比,治疗组大鼠出错次数减少,而海马区突触素免疫阳性产物平均光密度升高。结论:人参皂甙Rbl可增加血管痴呆性大鼠海马区突触素表达,显著改善其认知功能。 董静尹 袁张根 宋水川 张大勇 王俊波 李达 丁立峰关键词:人参皂甙RB1 血管性痴呆 突触素 两株新肝癌LXY-1、XMS-1细胞系的建立及其生物学特性观察 2007年 目的建立两株新建的肝癌细胞系并观察其生物学特性。方法采用HE染色技术、细胞计数法、琼脂糖电泳法、ELISA、流式细胞仪、核型分析和异种移植等对两株新的肝癌细胞系进行生物学特性研究。结果两株细胞分别命名为LXY-1、XMS-1,均已获得长期体外生长的能力,无论形态学观察,还是LDH同工酶谱的变化,均符合肝癌细胞的一般特征,细胞培养上清及胞质中均不分泌AFP、HBsAg。XMS-1细胞DNA整合有HBV DNA,染色体平均数分别为:LXY-1105条、XMS-150条。两株细胞S、G2-M期细胞比例增加,细胞倍增时间介于19.5~59.2h之间,异种移植成瘤率:LXY-175%,XMS-1不成瘤。结论两株肝癌细胞均具有人肝癌细胞的一般特征,可用于肝癌的防治研究。 江晓肖 宋水川关键词:细胞系 核型分析 异种移植 染色体 TRAIL蛋白联合吉西他宾对肝癌细胞的体外杀伤作用 2010年 目的研究肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体(TRAIL)和吉西他宾对肝癌细胞的杀伤作用及联合作用。方法将生长良好的肝癌细胞接种于96孔板,培养24h后,加入不同浓度TRAIL和吉西他宾,倒置显微镜下观察细胞形态变化;利用非同位素细胞增殖试剂盒和流式细胞仪分别检测细胞的生长抑制率和细胞凋亡。结果(1)TRAIL组、吉西他宾组、TRAIL和吉西他宾联合用药组24h后肝癌细胞几乎全部从培养瓶壁脱落;(2)TRAIL与吉西他宾对10株肝癌细胞均有不同程度的生长抑制作用。其中ch—hep-2对TRAIL及吉西他宾最敏感,其IC50分别为24.33ng/ml和328mg/ml;当TRAIL蛋白浓度为500ng/ml时,吉西他宾对ch—hep-2的生长抑制作用明显增强,IC50为065mg/ml,其细胞毒作用增强5倍,流式细胞仪检测两者作用后的细胞,均可检测到细胞调亡峰。结论TRAIL和吉西他宾协同诱导肝癌细胞发生调亡,TRAIL蛋白可明显增加吉西他宾的杀伤效应,它可作为临床肝癌化疗的辅助药物。 宋水川 董静尹 陈达伟 江晓肖关键词:TRAIL 吉西他宾 肝癌 高效、低毒免疫毒素SM5-1-PE38KDEL(突变体)的构建及其抗肿瘤作用机理的研究 原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,术后复发率较高,更主要的是手术无法切除肉眼看不见的肿瘤组织,而放、化疗对造血和免疫系统均有严重的抑制作用,甚至导致机体免疫力进一步下降,使肿瘤广泛转移。肿瘤免疫治疗是继手术、放疗、化... 宋水川关键词:免疫毒素 定点突变 内吞 文献传递 伽玛刀治疗对胰腺癌患者外周T淋巴细胞亚群的影响 被引量:3 2012年 目的研究胰腺癌患者伽玛刀治疗前后外周血白细胞、淋巴细胞及T淋巴细胞亚群的变化。方法观察20例胰腺癌患者外周血白细胞、淋巴细胞变化,并与20例健康人对照,采用流式细胞术检测伽玛刀治疗前后外周血CD4+,CD8+,CD4+/CD8+,CD4+CD25+变化。结果胰腺癌患者外周血淋巴细胞及CD4+、CD8+值低于对照组(P<0.01),伽玛刀治疗前后胰腺癌患者CD4+、CD8+含量差异具有统计学意义(P<0.05),伽玛刀治疗前后CD4+/CD8+、CD4+CD25+含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论胰腺癌患者存在T淋巴细胞免疫功能低下,抗肿瘤免疫反应差,伽玛刀治疗使患者CD4+、CD8+T淋巴细胞进一步减少,提示伽玛刀治疗中应辅以免疫调节剂以提高临床疗效。 江晓肖 宋水川 陈达伟关键词:伽玛刀 胰腺癌 免疫 外周血淋巴细胞 新建肝癌细胞系的生物学特性及TRAIL抗肝癌动物实验研究 摘要:原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,在各类癌肿中的发病率居第三位,其恶性程度高,病情发展迅速,病死率高,每年我国有11万人口死于肝癌,占全世界肝癌死亡总数的45%,严重威胁着我国人民的身心健康。因而,深入研究肝癌... 宋水川关键词:肝癌 细胞系 凋亡 生物学特性 肿瘤 文献传递 重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白的鉴定 2004年 宋水川 季军捷 寇庚 钱卫珠 史菊鲜 王皓 郭亚军关键词:半胱氨酸蛋白酶 细胞凋亡 克隆 原核表达