孙建
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 供职机构：南开大学生命科学学院分子生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 植酸酶分泌型酵母工程菌的构建(英文)被引量：4
- 2002年
- 通过逆转录 PCR从无花果曲霉总 RNA中扩增出 1 .4 -kb带信号肽的植酸酶基因 ,将其克隆到穿梭表达载体 p YES2 ,构建了含有目的基因的重组质粒 p YPA1 .用 p YPA1转化酿酒酵母 INVSc1菌株 ,成功地构建了能分泌活性植酸酶的工程菌株 .该菌株的成功构建为饲料和食品添加剂以及解磷工程菌肥的开发奠定了基础 .
- 祝建洪孙建陈珈李桂兰吴卓伟王隆飞陈功Marc G Fortin李明刚
- 关键词：工程菌植酸酶酿酒酵母基因克隆基因表达重组质粒
- 植酸酶酵母工程菌的构建被引量：2
- 2004年
- 从无花果曲霉 (Aspergillusficuum) 3 432 2中用RT PCR方法扩增出一条约 1 4kb的特异性条带 ,DNA序列测定表明 ,目的片段为不含信号肽的植酸酶编码序列 ,全长 1 347bp。无花果曲霉 (Aspergillusficuum) 3 432 2phyA基因序列已在GenBank注册 (注册号为 :AF5 37344)。将该基因克隆到酵母表达载体pYES2中 ,构建成不带信号肽phyA基因的重组表达载体pYPA2。用醋酸锂法将pYPA2转进Ura缺陷型的酿酒酵母 (S cerevisiaeINVSc1 ) ,筛选获得含植酸酶基因的酵母转化子。经半乳糖诱导表达后 ,用磷钼蓝显色 (AMES)法对酵母菌体进行酶活测定 ,测出了明显的植酸酶活性 ,pYPA2胞内植酸酶活性约 1 1 5 5IU mL ,表明无花果曲霉 (Aspergillusficuum) 3 432
- 李桂兰祝建洪孙建陈佳李明刚
- 关键词：无花果曲霉PHYA基因酿酒酵母
