- 骨桥蛋白[OPN]、细胞表面黏附分子[CD44v6]及金属蛋白酶2[MMP-2]在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义
- 近年来关于细胞表面黏附分子(CD44)、金属蛋白酶(MMP)与肿瘤关系的研究比较多，而与它们有联系的骨桥蛋白(OPN)却研究的很少，本试验通过研究OPN、CD44v6及MMP-2在非小细胞肺癌中的表达水平，试图了解它们与...
- 喻钧
- 关键词：骨桥蛋白细胞表面黏附分子金属蛋白酶非小细胞肺癌
- 文献传递
- Toll样受体-3在人肺腺癌细胞中的表达及意义被引量：1
- 2013年
- 目的探讨Toll样受体-3（TLR3）在人肺腺癌细胞（A549细胞）和人支气管上皮细胞（HBE细胞）中的表达及意义。方法体外培养A549细胞和HB_E细胞，采用细胞免疫组织化学技术检测TLR3在2种细胞中的表达；采用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）检测TLR3mRNA在2种细胞中的表达；利用Westernblot检测TLR3蛋白的表达。结果细胞免疫组织化学染色显示TLR3主要表达于两种细胞的胞膜和胞质中，呈棕黄色颗粒状，A549细胞中TLR3mRNA的表达相对值为1．01680±0．02376，高于HBE细胞，后者为0．04780±0．01792，TLR3蛋白在A549细胞中的表达相对值为0．31930±0．01116，高于HBE细胞，后者为0．16070±0．00303（P〈0．01）。结论TLR3在A549细胞中表达高于HBE细胞，提示TLR3可能参与促进人肺腺癌细胞的生长进展过程。
- 喻钧潘铁成魏翔李军刘立刚胡敏
- 关键词：肺腺癌免疫组织化学
- OPN、CD44v6及MMP-2在肺鳞癌、腺癌中的表达及其临床意义被引量：19
- 2006年
- 背景与目的近年来关于细胞表面黏附分子(CD44)、基质金属蛋白酶(MMP)与肿瘤关系的研究比较多,而对骨桥蛋白(OPN)的研究却很少。本研究的目的是通过研究OPN、CD44v6及MMP-2在肺鳞癌、腺癌中的表达水平,了解它们与肺鳞癌、腺癌生长、浸润及转移的关系。方法采用免疫组化方法,对69例肺鳞癌、腺癌患者手术标本OPN、CD44v6和MMP-2进行检测。结果OPN、CD44v6和MMP-2表达率与患者组织学类型、TNM分期及淋巴结转移有密切关系(P<0.05),与细胞分化程度则无明显关系(P>0.05)。OPN与CD44v6、MMP-2的表达均呈正相关,CD44v6与MMP-2表达之间无相关性。结论OPN、CD44v6和MMP-2的表达同肺癌病理类型、分期、淋巴结转移有密切关系,可能作为临床评估肺鳞癌、腺癌进展及预测肿瘤转移潜能的指标。
- 喻钧潘铁成李军魏翔陈涛胡敏宋定伟刘立刚陈鹏
- 关键词：MMP-2CD44V6
- 骨桥蛋白、细胞表面黏附分子及金属蛋白酶2在肺鳞癌、腺癌中的表达及其临床意义
- 目的近年来,我国肺癌发病率和病死率均升至恶性肿瘤首位,肿瘤侵袭转移是非小细胞肺癌最重要的生物学行为。骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)是一种分泌性钙结合磷酸化糖蛋白,其中含有特异的与细胞黏附有关的RGU(Arg→...
- 喻钧潘铁成李军魏翔陈涛胡敏宋定伟刘立刚郑智
- 文献传递
- TLR基因在人肺腺癌细胞和支气管上皮细胞中的表达被引量：1
- 2013年
- 目的探讨Toll样受体家族(Toll-like receptors,TLRs)基因在人肺腺癌细胞(A549细胞)和人支气管上皮细胞(HBE细胞)中的表达及意义。方法通过GenBank网站查找基因全序列,根据引物设计原则应用软件Primer 5.0设计TLR2、TLR3、TLR9和内参β-actin引物。体外培养A549细胞和HBE细胞,提取细胞总RNA并逆转录得到cDNA,采用实时定量荧光PCR检测TLRs基因mRNA在这2种细胞中的表达。琼脂糖凝胶电泳检测各扩增产物片段大小。采用Western blot检测TLR2、TLR3、TLR9蛋白的表达。结果 TLR2、TLR3、TLR9基因在A549细胞中的表达丰度均比在HBE细胞中高(P<0.01)。琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物符合预期片段大小。TLR2、TLR3、TLR9蛋白在A549细胞中的表达相对值分别为(0.472 8±0.010 3)、(0.319 3±0.011 2)和(0.856 9±0.007 9),而在HBE细胞中的表达相对值分别为(0.258 5±0.005 7)、(0.160 7±0.003 0)和(0.699 1±0.010 0),A549细胞中TLR2、TLR3、TLR9表达的相对值均高于HBE细胞(均P<0.01)。结论 TLR2、TLR3、TLR9基因在A549细胞中的表达高于HBE细胞,提示TLRs基因可能参与人肺腺癌的发生发展。
- 喻钧潘铁成魏翔李军潘友民刘立刚胡敏
- 关键词：TOLL样受体人肺腺癌细胞人支气管上皮细胞基因表达
- Toll样受体3-小分子RNA干扰对人肺腺癌细胞A549增殖分化及免疫逃逸的影响
- 2014年
- 目的 观察Toll样受体3（TLR3）对人肺腺癌细胞A549的增殖、抗凋亡及免疫逃逸方面的影响.方法 给予TLR3-RNA干扰（RNAi）慢病毒转染组、未转染组和空载对照组TLR3的配体Poly（I∶C）刺激后,分别通过流式细胞术检测B7-H1的表达,实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测前列腺素E2（PGE-2）的表达,Western blot检测磷酸化p38的含量,并采用膜联蛋白V/碘化丙锭（Annexin V/PI）双染色法检测A549细胞的凋亡.结果 在Poly（I∶C）刺激时间及浓度相同的情况下,转染TLR3-RNAi慢病毒载体的A549细胞组中B7-H1阳性细胞百分比、PGE-2的表达以及磷酸化p38的百分比相对值均低于未转染组和空载对照组（P＜0.01）.凋亡实验显示,转染TLR3-RNAi慢病毒载体的A549细胞组细胞凋亡率[（44.40 ±1.41）％]明显高于未转染慢病毒载体组（34.70±0.89）％]和空载对照组[（36.50±1.12）％,P＜0.01.结论 TLR3基因沉默抑制了A549细胞中p38、PGE-2、B7-H1的表达,并降低了细胞的抗凋亡能力.
- 徐文佳喻钧潘铁成魏翔李军潘友民刘立刚胡敏
- 关键词：肺腺癌TOLL样受体3脱噬作用
- TLR3基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的观察慢病毒表达载体介导的RNA干扰(RNAi)对人肺腺癌细胞株A549细胞Toll样受体3(Toll-likereceptor 3,TLR3)表达的影响,为后续的以TLR3基因为靶点的肺癌研究和治疗奠定基础。方法应用基因工程技术,筛选出4条针对TLR3基因的RNAi靶序列,分别与pCCL-GFP载体连接,构建4个重组慢病毒表达载体TLR3-RNAi-LV 1#,TLR3-RNAi-LV 2#,TLR3-RNAi-LV 3#,TLR3-RNAi-LV 4#;将连接产物转化到DH5α感受态细胞,经PCR筛选阳性克隆、测序鉴定。将TLR3-RNAi-LV、pHelper 1.0、pHelper 2.0共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度。将包装产生的4种重组慢病毒分别感染A549细胞,实时定量PCR和Western印迹检测A549细胞TLR3mRNA和蛋白的表达。根据筛选的结果,选取最有效的载体进行病毒的大量包装。结果 4个慢病毒载体PCR和测序结果与预期结果一致,经包装产生的病毒滴度分别为2×108、2×108、2×108、1×108 TU/mL。感染A549细胞后,TLR3基因mRNA和蛋白的表达量与未感染慢病毒的细胞组及空载体感染组相比均明显下降(均P<0.05),其中TLR3-RNAi-LV 4#作用较明显,使mRNA表达下降80%,蛋白表达下降68%(均P<0.05)。4#病毒载体大量包装后其滴度为1×109 TU/mL。结论成功构建针对TLR3基因的4个慢病毒载体TLR3-RNAi-LV,体外感染A549细胞后可有效抑制TLR3基因和蛋白的表达。
- 喻钧潘铁成魏翔刘立刚胡敏
- 关键词：TOLL样受体3RNA干扰慢病毒肺腺癌
- 电视胸腔镜胸交感神经干切断术治疗手汗症120例被引量：2
- 2006年
- 目的探讨电视胸腔镜胸交感神经干切断术治疗手汗症的安全性和有效性。方法2003年6月～2005年5月,120例手汗症患者在双腔气管插管全麻下接受胸腔镜交感神经干切断术,切断T2～T3,合并腋窝多汗者同时切断T4。术中采用红外线测温仪监测手掌温度的变化。结果全组手术顺利,无手术死亡,1例术后气胸置入胸管后肺复张。术中监测交感神经干切断前后手掌温度平均升高2.5℃,术毕患者手掌多汗的症状立即消失。平均手术(58.3±23.2)min,术后平均住院(1.6±0.8)d。57例患者出现不同程度的代偿性多汗,5例出现背痛,均能耐受。随访1～23个月,平均(12.4±4.6)个月,无1例手汗症复发。结论电视胸腔镜胸交感神经干切断术治疗手汗症是一种安全、有效的微创外科技术,但其特有并发症的预防值得重视。
- 魏翔潘铁成汤应雄胡敏李军陈涛喻钧
- 关键词：胸腔镜胸交感神经干切断术手汗症
- 骨桥蛋白、细胞表面黏附分子及金属蛋白酶2在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义
- 背景与目的:近年来关于细胞表面黏附分子(CD44)、金属蛋白酶(MMP)与肿瘤关系的研究比较多,而与它们有联系的骨桥蛋白(OPN)却研究的很少,本试验通过研究OPN、CD44v6及MMP-2在非小细胞肺癌中的表达水平,试...
- 喻钧
- 关键词：非小细胞肺癌骨桥蛋白金属蛋白酶CD44V6
- 文献传递
- 慢病毒转染TLR/_3基因的小分子RNA对人肺腺癌A549细胞增殖及免疫逃逸影响的研究
- 第一部分TLR3在A549细胞中的表达
目的：Toll样受体家族/(Toll-like receptors，TLRs/)是非常重要的天然免疫分子，并被视为联系天然免疫和获得性免疫的桥梁，近年来随着天然免疫研究的...
- 喻钧
- 关键词：实时定量PCR慢病毒B7-H1实时定量PCRWESTERNBLOT
- 文献传递
