吴永忠 作品数:117 被引量:238 H指数:7 供职机构: 重庆市肿瘤研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市卫生局科研项目 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 机械工程 更多>>
RNAi抑制EGFR基因增强卵巢癌细胞对泰素敏感性的研究 被引量:1 2009年 目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因在卵巢癌细胞对泰素敏感性的增强作用。方法构建针对EGFR基因序列特异性shRNA的表达载体,用脂质体转染卵巢癌SKOV3细胞及G418筛选阳性克隆。采用RT-PCR、Western blot检测EGFR基因的抑制情况,用MTT法检测卵巢癌细胞对泰素的敏感性。结果靶向EGFR的序列特异性shRNA可明显抑制EG-FR基因的表达,EGFR mRNA和蛋白的抑制率分别为77.5%和76.1%;序列特异性shRNA-EGFR可明显提高卵巢癌细胞对泰素的敏感性,差异有统计学意义(P<0.01)。结论体外实验证实抑制EGFR基因的表达可提高卵巢癌细胞的化疗敏感性。 林远洪 吴永忠 郭启帅 罗茜 黄环关键词:EGFR基因 泰素 卵巢癌 放射治疗骨转移性癌痛的临床研究 目的
探讨放射治疗骨转移性癌痛的最佳时间--剂量分割模式.
材料与方法
以1996年6月至2000年5月我科收治的符合研究条件的142例骨转移性癌痛患者为研究对象.按不同的时间--剂量分割模... 吴永忠 王兴远 郭剑锋 陈晓品 雷自重关键词:骨转移性肿瘤 癌痛治疗 疗效 文献传递 RNAi沉默EGFR基因对卵巢癌放疗敏感性的影响 2009年 目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因对卵巢癌放疗敏感性的增强作用。方法构建针对EGFR基因序列特异性短发夹状RNA(shRNA)表达载体,应用卵巢癌SKOV3细胞建立裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、单纯放疗组、基因放疗组,采用6MVX线照射裸鼠瘤组织,监测瘤体积,测量瘤质量,取瘤组织行RT-PCR、Western印迹、免疫组化、电镜检测。结果治疗后三组瘤体积差异均显著(均P<0.01),单纯放疗组、基因放疗组的抑瘤率分别为28.1%、46.1%,基因放疗组EGFR基因的表达明显下调,透射电镜下瘤组织凋亡、坏死最明显。结论动物实验证实RNAi沉默EGFR基因明显提高卵巢癌的放疗敏感性。 林远洪 吴永忠 李少林 郭启帅 罗茜关键词:EGFR基因 RNA干扰 放疗 卵巢癌 RNA干扰EGFR基因对卵巢癌细胞放疗敏感性影响的实验研究 2010年 目的:构建针对表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)基因的小于扰RNA(Small interference RNA,siRNA)质粒,转染人卵巢癌SKOV3细胞株后,检测RNA干扰(RNA interference,RNAi)对EGFR基因表达及评估细胞对放疗敏感性的影响。方法:体外构建EGFR小发卡状RNA(Short hairpin RNA,shRNA)的表达质粒,脂质体法转染入SKOV3细胞及G418筛选阳性克隆。实验随机分为阳性RNA干扰组(A组)、阴性RNA干扰组(B组)、空白对照组(C组)。采用RT-PCR、Western Blot技术检测EGFR mRNA及其蛋白质的表达情况。分别给予不同放射剂量(0、2、4、6、8Gy)照射,MTT法绘制细胞存活曲线。结果:靶向EGFR的序列特异性shRNA可明显抑制EGFR基因的表达,EGFR mRNA和蛋白的抑制率分别为77.5%和76.1%;序列特异性shRNA-EGFR可明显提高SKOV3细胞对放疗的敏感性,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:体外研究表明RNAi沉默EGFR基因可以提高卵巢癌SKOV3细胞对放疗的敏感性。 罗茜 吴永忠 林远洪 郭启帅 黄环关键词:EGFR基因 RNA干扰 卵巢癌 放疗敏感性 加速超分割放射治疗肺鳞癌前瞻性研究 1996年 加速超分割放射治疗肺鳞癌前瞻性研究陈绪元,雷自重,张菊,吴永忠,戴晓波,陈晓品,张玲重庆医科大学临床学院肿瘤科(重庆630042)为探索一种照射方法既能提高肺鳞癌局控率和生存率,又不增加正常组织的近期放疗反应和远期并发症。我院从1992年2月~199... 陈绪元 雷自重 张菊 吴永忠 戴晓波 陈晓品 张玲关键词:加速超分割放疗 肺鳞癌 放射性食管炎 局控率 肿瘤干细胞 胸部MRI在肺癌放疗中的价值 1996年 本文介绍了胸部MRI在制定与放疗计划有关的肺癌诊断和分期上的应用,放疗中肿瘤和肺组织反应的MRI表现,以及在放疗后对肺癌病人随访过程中MRI的价值。 吴永忠 雷自重关键词:肺肿瘤 放射疗法 胸部 NMR 女性患肺癌,与“四气”有关 2015年 今年44的张女士是一名普通的家庭主妇,半年前干家务活不小心被东西砸伤右手,造成手部骨折,随后被送到医院植入了钢针固定.休养3个月后恢复得差不多了,张女士来到当地医院取钢针,却在拍胸片时发现右肺下叶有个结节.为进一步确诊,家人陪同张女士一起到肿瘤医院就诊,经过详细检查后被确诊为早期肺癌,并做了手术切除.张女士对此一直耿耿于怀,自己不抽烟不喝酒,平时身体也没有什么不适,怎么会患上肺癌呢? 吴永忠 程风敏关键词:早期肺癌 女性 钢针固定 手部骨折 右肺下叶 端粒酶与恶性实体肿瘤 2003年 高枫 吴永忠 李少林关键词:端粒酶 恶性实体肿瘤 端粒 基因治疗 Clusterin基因沉默对卵巢癌SKOV3细胞增殖与侵袭的影响 被引量:5 2011年 目的通过RNA干扰技术抑制卵巢癌SKOV3细胞分泌型clusterin(sCLU)基因的表达,研究其对卵巢癌细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法通过脂质体介导靶向sCLU基因的siRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,实验分为4组:实验组(sCLU-siRNA+脂质体)、阴性对照组Ⅰ(negative control siRNA+脂质体)、阴性对照组Ⅱ(sCLU-siRNA)、空白对照组(等体积的完全培养液)。RT-PCR和蛋白质印迹分析法检测sCLU表达;利用MTT法、Transwell小室体外侵袭实验及流式细胞仪AnnexinⅤ/PI法检测评价sCLU基因抑制后对卵巢癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。结果靶向sCLU基因的siRNA明显、特异性地抑制了sCLU mRNA和蛋白的表达水平;MTT实验结果显示实验组细胞增殖能力较各对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪AnnexinⅤ/PI法检测结果显示实验组细胞凋亡率较各对照组明显升高,达到(15.84±1.53)%,较空白对照组升高了约9%,差异有统计学意义(P<0.01)。侵袭实验结果提示实验组细胞侵袭能力受到明显抑制,实验组穿膜细胞数量为(26.52±6.22)个/视野,较各对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 sCLU基因沉默明显抑制了卵巢癌SKOV3细胞的增殖、侵袭能力,并增加了其凋亡率,sCLU基因有望成为卵巢癌治疗的新靶点。 黄锣 罗茜 陈诚 张幸平 吴永忠关键词:CLUSTERIN 卵巢肿瘤 小分子干扰RNA 肿瘤侵袭 RNA干扰EGFR基因家族真核表达载体的构建 被引量:1 2008年 目的:构建针对表皮生长因子受体(Epidermal growth factor recepter,EGFR)家族的小分子发夹状RN(A Small hairpinRNA,shRNA)干扰质粒表达载体,为本课题下一步研究提供有力工具。方法:选择放疗不敏感的卵巢癌细胞SKOV3中高表达的EGFR家族同源性基因为靶基因,根据shRNA的设计原则,设计实验组及对照组shRNA。体外合成2段编码短发夹RNA序列的DNA单链,退火,克隆到相应载体pGensil-1的polⅢ启动子下游。结果:经酶切和DNA测序鉴定成功构建了EGFR家族同源性基因的RNA干扰表达载体,分别命名为pGensil-1-E及pGensil-1-C。为下一步体外、体内实验奠定了基础。 黄环 吴永忠 李少林 郭启帅 林远洪 彭志平关键词:RNA干扰 真核细胞表达载体