史建伍
- 作品数:26 被引量:15H指数:2
- 供职机构:南昌大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江西省科技支撑计划项目江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学环境科学与工程自动化与计算机技术更多>>
- 磁珠富集法筛选池蝶蚌微卫星分子标记
- 2014年
- 通过磁珠富集的方法分离池蝶蚌(Hyriopsis Schlegelii)的微卫星分子标记。将池蝶蚌基因组DNA酶切,连接Brown接头,采用PCR技术富集,与探针杂交后杂交复合物结合到包被有链霉亲和素的磁珠上,再将这些片段洗脱,PCR扩增,克隆构建含有微卫星片段的"基因组文库",所得到的阳性克隆进行测序。从所获得的212个阳性克隆中选取110个进行测序,其中54.5%含有微卫星序列,80%的重复序列重复数在10以上,微卫星序列中21.4%为完美型。除探针中使用的AC、AG等重复单元外,还观察到CT、GA、ATG等重复序列。设计获得60对微卫星引物,合成其中的30对经PCR筛选,结果有10对引物扩增出多态性条带。该实验表明:磁珠富集法是获得池蝶蚌微卫星分子标记的一种有效的方法,同时,制备出的微卫星标记可为今后研究池蝶蚌分子遗传多样性提供有用的遗传标记。
- 陶然史建伍邱齐骏盛军庆王军花洪一江
- 关键词:池蝶蚌微卫星磁珠富集法
- 池蝶蚌FEM-1蛋白原核表达及在性腺中的定位
- 根据已得到的Hsfem-1b和Hsfem-1c基因的全长cDNA序列,经NCIBI中比对获知这两个序列都有3个以上的结构域,在这两个基因结构域中各选取一段包含一个完整且具有代表性结构域的序列,并对此设计扩增该完整结构域的...
- 熊文芳史建伍舒轻朝彭扣盛军庆王军花吴娣洪一江
- 关键词:原核表达蛋白纯化WESTERNBLOTTING
- 池蝶蚌组织蛋白酶L基因的组织表达及免疫应激分析被引量:7
- 2012年
- 应用cDNA文库筛查及同源片段克隆拼接技术,克隆了池蝶蚌组织蛋白酶L(Hs-CtsL)cDNA基因全长序列(GenBank注册号为JN604558)。其cDNA全长1152 bp,5′-非翻译区(Untranslated Region,UTR)长1 bp,3′-UTR长149 bp包括1个多聚腺苷信号AATAAA和Poly(A)尾巴,开放阅读框(Open reading frame ORF)为1002 bp,编码333个氨基酸组成的多肽链。其分子量约37.7 kD,理论等电点为7.16,包含信号肽、前体域和成熟域。系统进化分析显示,Hs-CtsL同无脊椎动物组织蛋白酶L聚为一支,且同三角帆蚌亲缘关系最近,其次为褶纹冠蚌。组织表达分析结果显示,池蝶蚌组织蛋白酶L在肠、鳃、性腺、外套膜、斧足、闭壳肌、血细胞、肝胰腺、肾和心脏均有表达,其中血细胞中表达量最高。应激实验表明,经嗜水气单胞菌刺激后,Hs-CtsL在血细胞、鳃、肝胰腺和外套膜中的表达量显著上调。其中在肝胰腺中刺激后6h表达量到达峰值,在血细胞、鳃和外套膜中的表达模式近似,表现为一个波动变化,在4h、12h和48h被上调。结果暗示着Hs-CtsL除参与了池蝶蚌血细胞的先天性免疫防御以外,还参与了其消化腺免疫器官的免疫应答反应。
- 彭扣王军花刘彤彤盛军庆史建伍邵攀何书豪洪一江
- 关键词:池蝶蚌CATHEPSIN免疫应激
- 萍乡红鲫卵母细胞透明带糖蛋白ZP3基因及其侧翼序列的克隆和分析
- 利用SMART cDNA和RACE-PCR技术对萍乡红鲫卵母细胞透明带糖蛋白ZP3基因进行克隆。克隆得到萍乡红鲫ZP3基因cDNA全长序列1383bp,其中22-1335bp为萍乡红鲫ZP3的完整开放阅读框,总共编码43...
- 史建伍盛军庆曾柳根王军花洪一江
- 关键词:ZP3侧翼序列
- 文献传递
- 萍乡红鲫卵母细胞透明带糖蛋白ZP3基因及其侧翼序列的克隆和分析
- 利用SMART cDNA和RACE-PCR技术对萍乡红鲫卵母细胞透明带糖蛋白ZP3基因进行克隆。克隆得到萍乡红鲫ZP3基因cDNA全长序列1383bp,其中22-1335bp为萍乡红鲫ZP3的完整开放阅读框,总共编码43...
- 史建伍盛军庆曾柳根王军花洪一江
- 关键词:侧翼序列绿色荧光蛋白
- 池蝶蚌表皮生长因子受体EGFR基因的克隆与表达分析
- 表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR),是一类广泛分布于真核生物体细胞膜上的多功能糖蛋白,具有酪氨酸激酶活性,是一种重要的跨膜受体。在哺乳动物体内,EGFR被配体激...
- 刘国凤史建伍盛军庆彭扣王军花洪一江
- 关键词:池蝶蚌EGFRREAL-TIME免疫荧光外套膜珍珠囊
- 翘嘴红鲌群体遗传多样性分析被引量:3
- 2014年
- 基于RAPD方法对江西(鄱阳湖)、湖北(梁子湖)和江苏(太湖)3个群体的翘嘴红鲌遗传多样性进行分析,以评价它们的群体遗传结构和良种选育的可行性。结果显示从30个随机引物中筛选出了20个多态性较高的引物,既可扩增出3个群体共同的DNA条带,也可扩增出单个群体特有的特征条带。从3个群体实验鱼中共检测到119个扩增片段,长度在0.2-1.7kb之间。鄱阳湖群体多态位点数61个,多态位点比为51.26%,梁子湖群体多态位点数50个,多态位点比为42.02%,太湖群体多态位点数67个,多态位点比为56.30%。3个群体的Shannon多样性指数分别为0.429 2,0.382 8和0.443 1。群体间遗传相似系数依次为:最高是鄱阳湖与梁子湖,为0.8055,其次是鄱阳湖与太湖,为0.801 6,最低是梁子湖与太湖,为0.785 2。结果提示,鄱阳湖与梁子湖亲源关系较近,与太湖稍远;所筛选出的引物应用RAPD技术可以方便地分析不同群体翘嘴红鲌的遗传多样性,并可为良种选育的亲本选择提供依据。
- 史建伍舒轻朝胡蓓娟肖鸣鹤曾柳根邹新建洪一江
- 关键词:翘嘴红鲌随机扩增多态性DNA多态位点
- 一种中华鳖稚鳖筛选设施与方法
- 本发明提供了一种中华鳖稚鳖筛选设施与方法,该筛选方法包括以下步骤:(1)将刚孵化的中华鳖稚鳖放在筛选平台上,打开水管冲水阀门,由最高一级筛选阶梯向下冲水,保证每级筛选水槽蓄满水,继续保持水流从上至下冲刷,使筛选平台潮湿但...
- 洪一江简少卿赵大显吴国辉王军花史建伍袁小龙
- 文献传递
- 萍乡红鲫早期性腺发育及MAPK酶在卵母细胞中的表达
- 原始生殖细胞(PGCs)是生殖细胞的前体,起源于生殖嵴本身的生殖上皮细胞的增殖细胞。原始生殖细胞特征:细胞个体大,显著大于周围细胞,呈圆形或卵圆形,细胞界线明显,细胞核大且透亮,常位于细胞的一侧,核仁明显,细胞质较少。为...
- 易伟佳盛军庆彭扣史建伍吴娣辜清洪一江
- 关键词:PGCS性腺发育免疫组化
- 文献传递
- 池蝶蚌β-连环蛋白基因cDNA的克隆及表达特征分析被引量:1
- 2017年
- 为了解淡水贝类性别调控与分化机制,课题组建立了池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)性腺转录组,在转录组库中,存在β-连环蛋白(β-catenin)基因序列。实验对池蝶蚌β-catenin基因进行验证,采用RACE技术克隆其c DNA全长,命名为Hsβ-catenin。该序列全长4386 bp,5′-非编码区为162 bp,3′-非编码区为1758 bp,开放阅读框为2466 bp,编码821个氨基酸;该蛋白结构域主要由12个ARM重复序列组成;二级结构中,α-螺旋占47.75%,β-折叠占1.22%,随机卷曲占51.04%;三级结构中含大量α-螺旋且为右手超螺旋,构成ARM结构域;系统进化树分析表明,Hsβ-catenin与软体动物聚为一支,然后与昆虫类聚为一支。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测显示,Hsβ-catenin在肠中表达量最高,其次是斧足和精巢。Hsβ-catenin基因在12月龄和36月龄表达量较高,且在36月龄表达量最高,表明其可能参与池蝶蚌的性别调控与分化作用。
- 闫含笑史建伍盛军庆王军花洪一江
- 关键词:池蝶蚌克隆QRT-PCR