目的EV-A71疫苗是近年来新上市应用于婴幼儿的预防性疫苗,上市后质量的一致性对保证该疫苗安全、有效具有重要意义.方法对3家企业2017年生产的EV-A71疫苗的关键控制指标(体外效力和体内效力)进行趋势分析,并与2016年趋势分析结果进行比较;将中国食品药品检定研究院(National Institutes for Food and Drug Control,NIFDC)检测结果与企业结果进行比较.结果2017年度三家企业的体外效力趋势分析结果显示未见超趋势(out of trend,OOT).体内效力趋势分析发现企业2有2次连续8批以上结果位于平均值一侧,企业3有2次超出行动限.经偏差调查发现生产、质控环节均未发现异常情况,判定为动物个体差异造成OOT,对EV-A71疫苗质量无影响.2016年度和2017年度比较结果显示两家企业年度间具有较好的一致性.NIFDC与3家企业体外效力检测结果比较差异均无统计学意义(P=0.5805,P=0.1508,P=0.1151);Bland-Altman法统计显示,98.1%批次的检测结果在不同浓度范围内的差值位于2倍标准差(2s)以内.结论上市的EV-A71疫苗质量稳定、可控.今后应加强趋势分析中对OOT结果的调查、反馈,加强年度间比较分析,以及NIFDC与企业质控实验室间的比对研究.
目的评价我国三家企业生产的肠道病毒71型(EV-A71)灭活疫苗的小鼠中和抗体应答水平和攻毒保护能力,为了解新上市EV-A71疫苗的免疫保护特性提供基础.方法应用小鼠模型,分别对上市的3家企业EV-A71灭活疫苗(编盲为A、B、C疫苗)进行中和抗体应答水平、被动免疫和主动免疫攻毒保护研究.结果一剂人用剂量A、B和C疫苗免疫后,EV-A71中和抗体几何均滴度(geometric mean titer,GMT)分别为331、132和69U/ml,A疫苗显著高于B疫苗和C疫苗(P<0.05).应用3家疫苗免疫血清被动保护,结果显示半数有效剂量(ED50)分别为1.9、50.4和8.2U/ml,提示3家疫苗免疫抗体均具有良好的保护能力,但随抗体稀释倍数的增加保护率下降趋势不同.EV-A71疫苗免疫主动保护结果显示,4倍稀释的3家EV-A71疫苗一针免疫即可获得100%的保护效果,但同样随剂量降低,保护率下降趋势不同,一针和二针免疫保护的ED50值分别为人用疫苗剂量的203.2、24.4和41.5倍,及396.4、121.4和127.5倍.结论我国不同厂家EV-A71灭活疫苗一针免疫即可获得良好的免疫应答和保护能力,抗体应答和保护水平与临床前研究一致,但三家疫苗特性存在一定差异,应进一步深入开展相关基础研究,充分保证上市后EV-A71疫苗的有效性.
目的建立第一代国家柯萨奇病毒A组16型(CV-A16)抗原标准品,用于CV-A16疫苗的抗原含量检测.方法由中国食品药品检定研究院(中检院)牵头,联合我国主要的CV-A16灭活疫苗研发单位,共计6个实验室,采用协标试剂盒,分别对两个相同、编盲设置的候选CV-A16抗原标准品(A、B)进行CV-A16抗原含量协作标定.并且分别采用各实验室建立的CV-A16抗原检测试剂盒和各自工艺制备的CV-A16疫苗原液,以候选标准品为标准进行适用性研究.结果各实验室A/B相对抗原含量比为0.978~1.082(CV:6.2%~12.4%),表明各实验室检测结果准确、可靠.故将A、B结果合并分析.候选标准品(A、B)的几何均值为2194.5kU/ml,几何变异系数(geometric coefficient of variation,GCV)为11.0%,且协标结果呈正态分布,符合标准品研制要求.将候选标准品的抗原含量暂定为2000U/ml进行适用性研究,共3家实验室完成该研究,结果显示3个采用各自工艺制备的CV-A16原液,在各自建立的CV-A16检测试剂盒上均与候选标准品具有良好的线性和平行性,适用性良好.结论建立的候选标准品可作为CV-A16抗原标准品,赋值为2000U/ml,用于CV-A16疫苗的抗原含量检测.
目的了解我国大陆手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)主要病原基因组的型间重组情况,分析柯萨奇病毒A组(coxsackievirus A,CVA)4型主要重组株的进化起源。方法收集Genbank中收录的2000—2012(含)年之间CVA2/4/5/6/8/10^(-3)/12/14/16型和肠道病毒A组71型(enterovirus 71,EV-A71)全基因组序列,应用RDP4和Simplot软件扫描重组事件;对CVA4的主要重组株,基于P3区基因开展进一步分析,应用BEAST.v1.10^(-3).4软件构建系统进化树,并进行系统地理发生分析。结果本研究关注的手足口病主要病原中,CVA2/4/6/8/14/16和EV-A71均筛选到重组株,这提示重组在肠道病毒A组中普遍存在,重组位点多位于5′-UTR、P2和P3区。CVA4主要重组株与EV-A71(JF799986)在P2区发生重组,发生重组的P3基因平均碱基替代速率(mean rate)为7.095×10^(-3)位点/年(95%HPD区间:5.458×10^(-3)~8.885×10^(-3)位点/年),最早共同祖先(the most recent common ancestor,tMRCA)可以追溯到1997.87年(95%HPD区间:1985.71—2005.23年)。结论我国大陆地区肠道病毒A组流行株均存在型间重组的现象,CVA4的C2亚型重组株可能为近年来我国大陆CVA4持续流行并引发手足口病的主要原因。本研究阐明CVA4重组株的起源进化及分子流行特征,为CVA4毒株监控和手足口病等相疾病防控工作的开展提供依据。
目的制备戊型肝炎疫苗(简称戊肝疫苗)效力国家参考品,用于戊肝疫苗效力的质量控制。方法选取1批戊肝疫苗为候选参考品原料,加入经筛选的冻干保护剂,分装、冻干后制备为候选参考品,进行均匀性和稳定性考察,并分发给4个实验室进行协作标定和适用性研究。结果选择5%海藻糖+2%右旋糖酐作为冻干保护剂制备候选参考品。候选参考品的分装精度为0.7%;抗原含量均匀性变异系数(coefficient of variation,CV)为9.0%;铝含量均匀性CV为4.0%。水分含量为1.7%。候选参考品具有较好的加速稳定性和复溶稳定性。协作标定共获得18个有效数据,结果显示候选参考品半数有效量(median effective dose,ED50)均值为0.15μg(95%置信区间为0.12~0.18μg),实验室内CV为30.8%~64.2%,实验室间CV为32.6%。2家实验室自行研制的戊肝疫苗与候选参考品均表现出良好的剂量效应关系,阳转率均随疫苗抗原含量减少而降低,曲线变化趋势相近。结论首次制备了戊肝疫苗效力国家参考品(300031-201801),用于戊肝疫苗效力ED50检测质量控制。
