笔者于1995年在国外学习期间,学习和应用了脉冲电场凝胶电泳(Pulsed-field Gel Electrophoresis,PFGE)技术,为早日应用这一技术,促进国内鼠疫专业的科研工作,介绍如下。1 脉冲电场凝胶电泳的原理 以往国内做鼠疫耶尔森菌DNA电泳时,按电泳介质分,可分为琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳;按电泳装置分,可分为水平电泳和垂直电泳,不管何种电泳都不同程度的遇到分辨力差的问题,其原因是所有超过一定大小的线状双链DNA片段在介质中的迁移速度相同,当线状DNA双链螺旋半径超过凝胶孔径时,即达到分辨力的极限。当然,这除了选用限制性内切酶的原因之外,更多的是因为电泳本身的局限性,凝胶孔径越大,所能筛分的线状DNA片段也越大,但是。
