于和鸣
- 作品数：27 被引量：66H指数：5
- 供职机构：国家卫生计生委科学技术研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家社会公益研究专项计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种检测前列腺癌的ELISA试剂盒
- 本发明采用双向电泳方法比较了前列腺增生细胞BPH-1、雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP及雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3三种细胞蛋白的组成。通过经质谱分析及数据库检索，确定2个差异蛋白GRP78和Annexin A2...
- 王慧萍宁丽峰周越辛玲孙铁成于和鸣
- 双向电泳分离大鼠子宫组织提取物的最佳条件摸索
- 2010年
- 目的:建立并优化大鼠子宫组织提取物的双向电泳分离条件。方法:机械匀浆法制备子宫组织总蛋白提取物,采用不同方法处理样品及不同pH范围的固相梯度胶条进行双向电泳分析。结果:经丙酮沉淀处理的提取物在pH 5～8范围的固相梯度胶条进行双向电泳分离,可获得分辨率清晰和重复性较好的二维图谱。特别是在高分子量蛋白区域得到独立清晰的蛋白质斑点。结论:通过建立并优化双向电泳分离条件,为进一步分析生理与病理状态的子宫蛋白成分提供了技术支持。
- 程露阳杨松鹤孙铁成王小强于和鸣
- 关键词：子宫提取物双向电泳
- 乙酰唑胺对大鼠精子发生和成熟的影响
- 2010年
- 目的:研究碳酸酐酶抑制剂对大鼠精子发生和成熟的影响。方法:乙酰唑胺混悬液(40mg/kg)给大鼠灌胃,分别于给药当天、1d和3d处死动物,进行睾丸、附睾称重、苏木素-伊红(HE)染色和光镜下观察分析;附睾尾剪碎计数精子密度、精子活力,染色后计数精子畸形比率;测定附睾管腔液α-葡糖苷酶水平;采用罗丹明(Rh)123荧光探针标记附睾精子,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位。结果:给予乙酰唑胺的大鼠精子活力明显降低,畸形率显著增加,附睾精子线粒体膜电位明显降低,附睾管腔液α-葡糖苷酶水平有所下降,但睾丸和附睾无明显病理学改变。结论:碳酸酐酶抑制剂可能通过影响附睾精子成熟,对雄性生殖功能进行调控。
- 舒如明王小强卢文红周善杰于和鸣谷翊群葛争艳
- 关键词：乙酰唑胺睾丸附睾精子成熟水通道蛋白-1
- 补体C3在男性不育患者血浆蛋白中的差异分布
- 2011年
- 目的:分析男性不育患者与正常捐精者血浆蛋白含量的差异。方法:利用低浓度的聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分离10例正常捐精者和2例不育症男性患者的血浆蛋白,对差异蛋白条带进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)鉴定,继而对142例不育男性患者血浆进行分析。结果:男性不育患者与正常捐精者血浆蛋白SDS-PAGE电泳结果显示,在分子量约为200kD及120kD处出现了两条明显的蛋白差异条带,经鉴定为补体C3。对所有144例不育患者的血浆蛋白分离验证结果表明,同时出现这两条差异条带的有135例(93.75%)。结论:补体C3在男性不育患者与正常捐精者血浆中存在蛋白形式差异,该差异在不育患者中的生物学意义有待进一步研究。
- 辛玲朱晓红韩丽媛郭颖于和鸣王慧萍
- 关键词：不育凝胶电泳补体3
- 大鼠精子发生过程中热休克蛋白70-2特异表达的研究被引量：5
- 2005年
- 目的运用蛋白质组学方法,寻找大鼠精子发生相关蛋白质,找到目标蛋白质后,进一步用免疫组织化学方法做定位研究。方法用重力沉降法(STAPUT法)从9 d龄雄性大鼠睾丸中分离出A型精原细胞,从成年的雄性大鼠睾丸中分离出粗线期精母细胞、圆形精子细胞。分别提取这3种细胞的总蛋白质,进行双向电泳。对所得双向电泳凝胶扫描,分析并找出差异蛋白质。对挑选出的差异蛋白质做质谱分析,发现在这3种不同细胞的表达上有明显差异的蛋白。进一步做睾丸免疫组织化学组织定位、定量研究。结果双向电泳结果显示,HSP70-2在粗线期精母细胞、圆形精子细胞中表达量较高, 在A型精原细胞则表达量极少。HSP70—2在粗线期精母细胞中表达量最大。用HSP70—2抗体对大鼠睾丸组织切片行免疫组织化学研究,发现粗线期精母细胞、Sertoli细胞、Leydig细胞有阳性颗粒反应。HSP70—2主要表达于细胞质。结论 HSP70—2在精子发生过程中有明显的差异表达,推测其对精子发生起重要调节作用。
- 成毅明石心泉于和鸣吴燕婉贾孟春
- 关键词：双向电泳精子发生质谱分析
- 一个未知的子宫雌激素反应蛋白ULF-250的鉴定被引量：4
- 2009年
- 鉴定一个未知的子宫雌激素反应蛋白ULF-250.去卵巢大鼠补充给予雌二醇造成子宫产生大量宫腔液(uterine luminal fluid,ULF),受雌激素调节的蛋白分泌其中.收集ULF分别进行SDS-PAGE和双向电泳(2-DE)分离;通过Western印迹和2D-Western确认抗ULF-250抗体识别的蛋白成分并与凝胶上的条带或斑点相对应;对目标蛋白分别用MALDI-TOF-MS和HPLC-ESI-MS/MS两种方法进行质谱分析并获得肽段序列数据;与蛋白数据库比对及文献检索鉴定未知蛋白.2D-Western显示抗ULF-250抗体特异识别的蛋白成分.从2D胶上切下对应的蛋白斑点进行MALDI-TOF-MS,结果提示:ULF-250是ebnerin/DMBT1.经SDS-PAGE分离的250 kD蛋白条带进行液-质联用分析,结果同样提示:ULF-250是ebnerin/DMBT1.与文献报道比较,ULF-250与ebnerin/DMBT1在子宫的组织定位和调节是相同的,认为ULF-250是子宫表达的ebnerin/DMBT1.通过2-DE结合质谱分析以及查阅文献,确认未知的雌激素反应蛋白ULF-250是ebnerin/DMBT1.此外,研究提示,该蛋白不仅在子宫上皮细胞表达而且分泌到子宫腔液中,其功能值得进一步研究.
- 程露阳杨松鹤孙铁成王小强胡玮齐晓伟于和鸣
- 关键词：双向电泳质谱
- 一种用于精子检测的溶液
- 本发明公开了一种用于精子检测的溶液。本发明的精子检测溶液包含透明质酸与L-肉毒碱，可以用于精子-宫颈粘液穿透试验。其中所述透明质酸作为人宫颈粘液的替代品，L-肉毒碱可以保护精子的活力。基于少/弱精症患者的精子数目少，精子...
- 宁丽峰王慧萍于和鸣
- 文献传递
- 人卵泡液抑制素B的分离与鉴定被引量：2
- 2015年
- 目的探讨人卵泡液抑制素B(INH-B)的分离纯化方法。方法收集25例育龄期女性成熟卵泡液,分别用乙腈、丙酮、乙醇3种试剂处理样品,富集低丰度蛋白,经蛋白浓度测定和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,比较3种方法对高丰度蛋白去除效果。再通过二乙基氨乙基(DEAE)阴离子交换柱和蛋白质等电点分离法分离目的蛋白。结果采用乙腈沉淀法能去除卵泡液样品中约88.7%的高丰度蛋白。并用乙腈富集、阴离子交换柱分离、等电点分离的"三步分离法"分离人卵泡液后,INH-B蛋白回收率为38.7%,等电点为4.55。结论乙腈沉淀法是一种较为有效的去除样品中高丰度蛋白、富集低丰度蛋白的方法。乙腈富集、阴离子交换柱分离、等电点分离的"三步分离法"能初步纯化获得人体天然INH-B蛋白分子粗制品,纯化回收率达38.70%。
- 杜江辛玲郭颖周芳于和鸣
- 关键词：卵泡液抑制素乙腈等电点
- 过氧化物酶6与精子活力相关性的研究被引量：5
- 2013年
- 目的探讨过氧化物酶6(PRDX6)与精子活力的相关性,以及PRDX6与热休克蛋白70-2(HSPA2)的关系。方法 107例精液标本,按照精子活力分组,A组(a+b)≤20%,B组为30%≤(a+b)<40%,C组(a+b)≥40%。提取精子蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离后,Western-blot检测精子质膜PRDX6的表达情况;通过凝胶成像分析系统分析精子中PRDX6和HSPA2的IOD值,用统计学软件分析两者相关性及与活力的关系。结果 A、B、C三组精子标本,质膜PRDX6表达率分别为81.5%、70.0%和17.1%,A组PRDX6阳性检出率显著高于其他两组(P<0.01);PR DX6与HSPA2的表达量呈正相关(r=0.713,P=0.000),两者分别与精子活力相关。结论精子膜PRDX6表达与精子活力相关,提示其可能是精子活力的指标;精子全蛋白中PRDX6与HSPA2相关,提示其与精子成熟度相关。
- 郭颖辛玲周越侯丽张尉杜江王慧萍于和鸣
- 关键词：精子活力
- 前列腺癌与良性前列腺增生细胞株差异核基质蛋白的鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的:鉴定人前列腺癌雄激素依赖性细胞株LNCaP、前列腺癌雄激素非依赖性细胞株PC-3与良性前列腺增生细胞株BPH-1之间差异表达的核基质蛋白(nuclear matrix proteins,NMPs)。方法:常规制备各细胞株NMPs,应用双向凝胶电泳对其进行分离;对差异表达的蛋白质点行MALDI-TOF-MS/MS质谱分析,数据库搜索并鉴定。结果:成功获得了分辨率高、重复性好的不同细胞株NMPs双向凝胶电泳图谱;初步鉴定出包含酶、调节蛋白、RNA结合蛋白及各种因子在内的12个差异表达的蛋白质,在癌细胞株中3个NMPs表达上调,9个下调。结论:人前列腺癌细胞与良性前列腺增生细胞之间NMPs表达存在明显差异;初步筛选出12个差异NMPs,其表达水平及功能与疾病的联系需进一步研究。
- 孙铁成辛玲宋黎明周越宁丽峰韩丽媛郭颖于和鸣王慧萍
- 关键词：良性前列腺增生核基质蛋白
