习佳飞
- 作品数:54 被引量:136H指数:6
- 供职机构:军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 红系祖细胞冻存液及其应用
- 本发明公开了红系祖细胞冻存液及其应用,其中,该红系祖细胞冻存液包含:DMSO;HSA;以及血浆。该冻存液能够有效保存红系祖细胞,并且保存时间长,细胞复苏后增殖能力强,细胞回收率高。
- 陈琳裴雪涛习佳飞谢小燕周军年李艳华岳文房芳南雪刘大庆
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- 培养基、试剂盒及其用途
- 本发明公开了培养基、试剂盒、制备早期中胚层祖细胞的方法及利用本发明的试剂盒制备生血内皮细胞的方法。其中,该培养基包含:基础培养基,该基础培养基为SFDM培养基;PGE2以及BMP4。利用本发明的该培养基能够高效快速制备大...
- 裴雪涛李艳华张博文何丽娟习佳飞岳文姚海雷
- 文献传递
- 以人胎肝基质细胞为饲养层有效扩增脐带血CD34^+细胞
- 2010年
- 目的以人胎肝基质细胞(fetal liver stromal cell,FLSC)作为饲养层,进行脐带血CD34+细胞的扩增培养,寻找更加有效的体外扩增方法。方法比较脐带血CD34+细胞在无饲养层和人FLSC饲养层条件下,培养7,13,15d的细胞增殖状况;并利用流式细胞仪检测不同时间点CD34+细胞的比例。结果随着培养时间的延长,脐带血CD34+细胞的扩增呈现时间依赖性改变;在FLSC饲养层条件下,CD34+细胞培养7,13,15d的扩增数量分别为(11.83±0.76)×105,(14.37±0.32)×105和(18.73±0.25)×105,而在无饲养层条件下的扩增数量分别为(2.90±0.10)×105,(8.87±0.15)×105和(11.97±0.15)×105,两者相比有显著性差异(P(0.01);此外,流式细胞仪检测各时间点CD34+细胞的比例,在培养第13天,FLSC饲养层条件下CD34+细胞的比例为10.21%,而在无饲养层为1.01%,两者存在显著差异。结论以人FLSC作为饲养层可以有效扩增脐带血造血干/祖细胞,为今后临床造血干细胞移植提供充足的细胞来源。
- 何丽娟习佳飞郭小丽王若永杨超李艳华裴雪涛
- 关键词:脐带血CD34+细胞扩增
- 人胚胎干细胞诱导分化为成熟红细胞的关键技术研究
- 临床输血治疗是最常用的细胞治疗手段,然而目前血液来源紧张及输血相关传染病发生给其临床应用的安全性和广泛性带来了巨大挑战,因此人们期望寻找更为安全、充足的血液来源。随着干细胞发育及体外诱导分化研究的不断深入,大量的研究表明...
- 习佳飞
- 关键词:人胚胎干细胞红细胞碱性成纤维细胞生长因子转基因诱导分化
- 文献传递
- 慢病毒介导的稳定表达bFGF的胎儿肝脏基质细胞株的建立被引量:2
- 2007年
- 通过重组慢病毒系统感染人胎儿肝脏基质细胞(fetalliverstromalcell,FLSC),建立了能够稳定、高效表达碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)的细胞株bFGF/FLSC.从流产胎儿肝脏组织分离富集基质细胞,对其进行了生长特性和表面标志的鉴定,其在体外维持传代35代,依然保持正常的染色体核型.从胎儿骨髓间充质干细胞中克隆得到bFGF基因,构建重组慢病毒载体,感染FLSC,根据荧光表达强弱进行流式分选,获得能够继续稳定传代的低表达和高表达bFGF的两株细胞,RT-PCR和蛋白质印迹证实,细胞株中bFGF基因的稳定表达.RT-PCR结果显示,弱荧光和强荧光表达细胞的bFGF,在mRNA水平的表达分别是转染空载体细胞的2.33倍和6.19倍;蛋白质印迹结果显示,在蛋白质水平表达分别是1.76倍和5.05倍.用建立的bFGF/FLSC作饲养层细胞体外培养人胚胎干细胞(humanembryonicstemcells,hES),结果证明,其能在无或少量添加外源bFGF的条件下,维持人ES细胞增殖及其干性达20代.bFGF/FLSC细胞株的建立,将为构建低成本、安全高效的人胚胎干细胞的培养体系及研究造血细胞的发育分化提供适宜的微环境.
- 习佳飞王韫芳张鹏袁红丰施双双闫舫陈琳白慈贤南雪裴雪涛
- 关键词:胎儿肝脏基质细胞慢病毒人胚胎干细胞
- 诱导人胚胎干细胞定向分化为肝细胞的方法及专用培养基
- 本发明公开了一种体外诱导人胚胎干细胞定向分化为肝细胞的方法及其专用培养基。该体外诱导方法包括以下步骤:1)将人胚胎干细胞用分化培养基I悬浮,再将细胞悬液移入低吸附性细菌培养皿中,在37℃、5%CO<Sub>2</Sub>...
- 裴雪涛裴海云王韫芳白宗良杨印祥习佳飞岳文南雪白慈贤
- 文献传递
- 诱导脐带血来源的CD34+细胞重编程获得诱导性多能干细胞(iPS cells)
- <正>目的:目前已经利用转录因子的表达使得人类各种成体细胞(表皮成纤维细胞、间充质干细胞、神经干细胞、肝细胞、外周血细胞等)重编程形成诱导性多能干细胞(iPS cells),然而对脐带血来源的细胞的诱导仍在研究
- 姚海雷张文成王思涵李保伟张锐习佳飞周军年吕洋曾泉施双双何丽娟南雪李艳华岳文裴雪涛
- 文献传递
- 苯肼致小鼠溶血性贫血模型的建立被引量:8
- 2010年
- 目的:应用苯肼致小鼠发生溶血性贫血,建立急性溶血性贫血模型,筛选苯肼致小鼠贫血最佳浓度和红细胞移植的最佳时机。方法:30只C57BL/6小鼠随机分为6组,经腹腔注射不同浓度的苯肼溶液,于注射前和注射后第1、3、5、7、9天采集小鼠外周血进行检测,记录相关指标的变化,比较各组之间的差异,筛选出最佳溶血效果的给药浓度和红细胞移植治疗介入的时机。结果:注射苯肼溶液可使C57BL/6小鼠短期内产生明显的急性溶血性贫血症状,皮肤黏膜颜色苍白;外周血红细胞数量、血红蛋白含量、红细胞压积降低;随着苯肼溶液浓度的增加,小鼠体重显著减轻,存活率下降。结果表明,苯肼注射小鼠致贫血的最佳作用浓度为1.2mg/10g体重,小鼠贫血状态可维持7d。结论:建立了小鼠溶血性贫血模型,此模型可应用于红细胞输注效果的评价。
- 王若永习佳飞何丽娟谢小燕杨超陈琳李艳华裴雪涛
- 关键词:急性溶血性贫血苯肼动物模型红细胞
- 核基质结合区在转基因植物中的应用研究进展被引量:6
- 2001年
- 随着转基因研究的发展,转基因技术的应用已日益广泛,但基因沉默一直是转基因技术发展的障碍之一。β-核基质结合区区(Matrix attchment region,MAR)对克服基因沉默的作用已经引起了广泛的重视,本文对MAR的结构特点及其在转基因植物中的实验研究进展进行了阐述。
- 王亚楠胡建军习佳飞李林
- 关键词:MAR转基因植物
- 泊洛沙姆188对体外三维培养脐血单个核细胞向巨核细胞分化的影响被引量:1
- 2018年
- 目的观察泊洛沙姆188(P188)对体外三维(3D)培养诱导脐血单个核细胞向巨核细胞分化的影响。方法将分离的脐血单个核细胞分别接种于细胞瓶和细胞培养袋中,后者采用WIGGENS摇床模拟生物反应器进行3D培养。在巨核细胞诱导培养基中加入P188体外培养14d,观察细胞形态、计数细胞数并计算细胞存活率,采用流式细胞术观察巨核细胞表面标志表达情况。结果与采用传统的细胞培养瓶二维(2D)培养诱导巨核细胞相比,2D+P188培养组巨核系CD41+、CD41+/CD61+、CD61+细胞数明显增加(P值均〈0.01);在3D培养中加入P188,细胞体积变大,核形状不规则,胞质含紫红色颗粒,细胞分化更接近成熟。2D培养、3D培养及3D+P188培养组组间巨核细胞表面标志CD41、CD41/CD61、CD61表达水平差异有统计学意义(P值均〈0.01)。LSD—t检验两两比较显示,与2D培养相比,3D培养诱导巨核细胞存活率及细胞数均降低(P值分别为0.018、0.027),3D+P188培养组细胞数、细胞存活率与2D和3D培养组比较差异均无统计学意义(P值均〉0.05)。而3D培养组巨核细胞CD41/CD61表达水平为(36.30±1.27)%,高于2D培养组的(23.95±1.34)%(P=0.002),3D+P188培养组CD41/CD61表达水平更高[(59.45±1.20)%]。结论3D培养有利于巨核系祖细胞诱导分化,但细胞存活率低,加入P188,细胞生存状态好,且诱导效率更高。
- 陈琳岳文谢小燕张秀媛吕洋刘大庆习佳飞曲洺逸范增房芳裴雪涛
- 关键词:巨核细胞泊洛沙姆诱导分化