鲍柳君
- 作品数：7 被引量：16H指数：2
- 供职机构：苏州大学医学部细胞生物学系更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人胚胎干细胞结合丝素材料向神经细胞分化的实验研究
- 人胚胎干细胞（human embryonic stem cell，hES）是一种取自人囊胚内细胞团，经体外分离、培养获得的一种多能干细胞。它具有体外无限增殖和多向分化潜能两个基本特点。生物支架材料是种子细胞在形成组织之前...
- 鲍柳君
- 关键词：胚胎干细胞生物相容性神经细胞细胞分化
- 文献传递
- 小鼠胚胎干细胞无饲养层培养及其生物学特性被引量：4
- 2009年
- 目的建立小鼠胚胎干(ES)细胞株S8在无饲养层的条件下短期内连续传代体系,获得大量纯的ES细胞。方法ES-S8细胞无饲养层连续传代后,检测其未分化指标以及多分化潜能。结果ES-S8细胞在无饲养层条件下培养5代,AKP染色、SSEA-1免疫荧光、OCT-4均显阳性,以及经拟胚体(EB)途径自发分化后,能形成多种类型的细胞。结论ES-S8细胞能够在无饲养层条件下培养,至少传5代仍能保持未分化特异性指标和多分化潜能。
- 韩甫叶荣鲍柳君张军超张焕相
- 关键词：胚胎干细胞饲养层细胞拟胚体小鼠
- 低温对小鼠卵母细胞纺锤体损伤和发育潜力的影响被引量：2
- 2009年
- 为了评价低温对小鼠卵母细胞纺锤体损伤和发育潜力的影响以及损伤的可逆性,MII期卵母细胞在24℃室温或4℃环境下分别处理1、2、4或24h,并于37℃下恢复培养1或2h,复温或未经复温的卵孤雌激活后分析早期发育潜力,并对处理的卵通过免疫荧光细胞化学技术检测纺锤体的损伤和重建动态。结果显示纺锤体受低温打击的受损程度明显依赖于处理温度和时间,低温处理对纺锤体的损伤具有较强的可逆性,不论24℃或4℃,处理时间不超过4h的卵均能重建正常的纺锤体构像,但孤雌激活胚胎的早期发育潜力仍然受到明显的影响,而24h低温处理导致了纺锤体构像的不可逆破坏。对不同卵龄小鼠卵母细胞的研究发现卵龄大小不影响低温打击后的卵发育潜力。这些结果提示在以卵母细胞为材料的细胞工程技术的操作过程中应尽可能缩短室温操作时间。
- 张军超叶荣鲍柳君张焕相朱子玉
- 关键词：小鼠卵母细胞纺锤体孤雌激活
- 利用Red同源重组系统构建兔次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因打靶载体被引量：1
- 2008年
- 利用EL350基因工程菌进行同源重组,成功进行基因敲除已有报道,但利用该系统进行兔次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase,HPRT)基因突变和基因打靶方面的研究还没有报道。实验首先在已经筛选到含有兔全长HPRT基因BAC克隆(LBNL1-304M19)的基础上,利用Red重组系统,通过Gap-Repair方式从此克隆上将一段47kb无启动子的HPRT基因组片段(不含有第1个外显子)克隆到pBACLinkSp质粒上,产生pBACLinkSp-rHPRT质粒。然后基于pBACLinkSp-rHPRT质粒,设计不同的同源臂,从而删除了HPRT基因的不同编码区,成功构建了三个不同的HPRT基因打靶载体。同时对利用同源重组技术敲除不同大小的DNA片段的效率进行了研究。基于实验所构建的三个不同的兔HPRT基因打靶载体,为探索兔成纤维细胞和胚胎干细胞基因打靶的适宜条件,及进一步获得兔HPRT基因敲除动物疾病模型奠定了基础。
- 张传山李峰姚刚郭毅鲍柳君陈学进
- 关键词：RED重组基因敲除
- 小鼠胚胎干细胞在丝素材料上向神经细胞分化的研究被引量：1
- 2008年
- 以小鼠胚胎干细胞(ES)为种子细胞,使用改良的4-/4+RA方案,诱导小鼠ES细胞在丝素材料上向神经细胞分化,探讨丝素材料对其生长、黏附、分化等情况的影响。将小鼠ES细胞悬浮培养4 d得到的拟胚体(EBs)分别接种到经丝素膜和明胶包被的培养皿上进行诱导,比较不同材料上EBs的贴壁率及向神经元分化的比率。结果表明EBs在明胶和柞蚕丝素蛋白膜(TSF)上贴壁较快,平均贴壁率为90.3%和84.4%,在桑蚕丝素蛋白膜(SF)上贴壁较慢,贴壁率低,仅为38.5%,同时三者神经元的分化比率均能达到40%以上,无明显差异。以上实验显示TSF有望成为小鼠ES细胞向神经细胞分化的支架材料。
- 鲍柳君叶荣韩甫张军超张焕相
- 关键词：胚胎干细胞丝素神经细胞
- 无血清无饲养层条件下培养小鼠胚胎干细胞被引量：8
- 2008年
- 目的研究在无血清无饲养层条件下小鼠胚胎干细胞的培养方法,为最终建立无血清无饲养层培养系统打下基础。方法比较小鼠胚胎干细胞ES-S8株在无血清培养体系和有血清培养体系中的生长情况,分析ES-S8细胞克隆形成效率,测定其生长速度;然后在撤去血清和饲养层的条件下培养ES-S8细胞,进行AKP染色和表面标记物SSEA-1免疫荧光检测。结果ES-S8细胞在无血清培养条件下细胞生长速度减缓,克隆形成率降低,但AKP染色、SSEA-1免疫荧光均显阳性;在无血清无饲养层条件下ES-S8细胞培养仍能形成克隆,且AKP染色、SSEA-1免疫荧光均显阳性。结论研究表明ES-S8细胞能够在无血清无饲养层的培养条件下生长,保持其良好的未分化特性。
- 韩甫叶荣鲍柳君张军超张焕相
- 关键词：载脂蛋白
- 离心对小鼠卵母细胞纺锤体定位和早期发育潜力的影响
- 2010年
- 为了评价离心对卵母细胞纺锤体定位和早期发育潜力的影响,以小鼠MII期卵母细胞经过1000、3 000和5 000 r/min离心10 min,通过免疫荧光细胞化学技术检测纺锤体定位的变化,并通过孤雌激活和体外受精分析离心处理后卵母细胞的发育潜力。结果显示离心后的卵母细胞纺锤体构像正常,定位于皮层边缘,且更靠近第一极体,离心处理的卵孤雌激活后纺锤体动态和减数分裂进程与对照组一致,并保持了正常的早期胚胎发育潜力。这些结果提示卵母细胞的离心处理可作为小鼠核移植中去核的前处理,从而改善在没有霍夫曼镜头情况下盲吸去核的效率。
- 张军超叶荣顾培明鲍柳君张焕相朱子玉
- 关键词：卵母细胞离心纺锤体
