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逆转录病毒载体感染原代大鼠肝细胞的研究被引量：1: 1999年; 目的研究逆转录病毒载体高效转移并表达于大鼠原代肝细胞．方法采用表皮生长因子（ＥＧＦ）刺激大鼠原代肝细胞增殖，以表达β半乳糖苷酶的双顺反子逆转录病毒载体（ｐＧＣＥＮ／βｇａｌ）感染肝细胞．采用Ｘｇａｌ原位染色方法检测肝细胞内ＬａｃＺ的表达．结果肝细胞表达β半乳糖苷酶基因，转导效率为３％～２２％．结论双顺反子逆转录病毒载体（ｐＧＣＥＮ／βｇａｌ）可有效介导βｇａｌ基因表达于原代大鼠肝细胞，提示该载体可用于标记大鼠肝细胞，有利于研究肝细胞移植后在体内的生物学特性和肝病的体外基因治疗．; 廖丹谢青周霞秋钱书兵陈诗书李定国; 关键词：肝细胞逆转录病毒载体基因治疗肝移植肝病

转基因肿瘤细胞端粒酶活性表达人和小鼠的差异性被引量：16: 1999年; 目的人和小鼠正常体细胞端粒酶的活性，存在着种属差异性．肿瘤细胞中端粒酶活性的变化是否亦存在种属差异性尚不清楚．因此，我们在人和小鼠的肿瘤细胞系中，分别转导细胞因子基因ＩＬ２和（或）ＴＮＦα，以观察其对肿瘤细胞增殖活性及端粒酶活性的影响．方法首先将目的基因ＩＬ２和（或）ＴＮＦα构建入ｐＬＸＳＮ或ｐＧＣＥＮ逆转录病毒载体，用脂质体法转染ＰＡ３１７细胞进行病毒包装，再以病毒颗粒分别感染ＭＫＮ２８，ＭＫＮ４５，Ｔｃａ８１１３及Ｈ２２细胞，后者经Ｇ４１８筛选、挑克隆及扩增培养，然后用ＰＣＲ，ＲＴＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ鉴定其外源基因的整合及表达，并制作细胞生长曲线，以观察肿瘤细胞增殖活性变化，同时用ＴＲＡＰＰＣＲ法观察转基因肿瘤细胞端粒酶活性变化．结果人ＭＫＮ２８，ＭＫＮ４５及Ｔｃａ８１１３转导ＩＬ２或ＴＮＦα后，肿瘤细胞增殖受到不同程度的抑制；相应地，其端粒酶活性也受到抑制．而小鼠Ｈ２２细胞转导ＩＬ２和（或）ＴＮＦα后，增殖未受抑制，端粒酶活性亦未受抑制．结论人和小鼠肿瘤细胞系中转细胞因子基因ＩＬ２和（或）ＴＮＦα后，端粒酶活性及肿瘤细胞增殖发生不同的变化，提示肿瘤细胞中端粒酶的作用机制，在人和小?; 李正生朱正纲朱正纲陈诗书尹浩然; 关键词：肿瘤细胞端粒酶白细胞介素-2 肿瘤坏死因子

肝细胞损伤的分子机制及干预策略: 谢青周霞秋廖丹徐人欢金由辛陈诗书臧国庆郭斯敏徐玉敏姜山周惠娟晏春根刘海防俞红郭清; 应用分子生物学、免疫学及细胞生物学技术，对肝细胞损伤的机制及干预进行了系列研究。系统地研究了钙离子信号与内质网、线粒体在调控肝细胞凋亡过程中的主从关系，并对传统认为在凋亡发生过程中线粒体起主导作用的理论提出了挑战，进一步...; 关键词：; 关键词：肝功能衰竭肝细胞损伤分子机制治疗干预

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陈诗书

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