陆慧琦
- 作品数：85 被引量：217H指数：8
- 供职机构：第二军医大学长征医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 含有效B细胞活化因子基因启动子的重组质粒及其制备方法和用途
- 本发明涉及生物医药工程技术领域。目前有关B细胞活化因子(BAFF)基因上游调控元件的准确定位及其与相应的DNA结合蛋白的相互作用的研究尚属空白，更未见任何有关病理条件下BAFF基因调控元件的功能变化的报道。本发明提供一种...
- 仲人前周琳孔宪涛高春芳王皓屠小卿陆慧琦
- 文献传递
- 核心蛋白聚糖对正常肝脏细胞和肝癌细胞作用的体外研究
- 王桂琴赵素莲陆慧琦孔宪涛张玲玲李莉
- 本研究通过免疫组化及细胞原位核酸杂交技术，从单个细胞水平观察DCN对HSC-T6细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原等ECM基质成分mRNA表达与蛋白合成的影响。结果表明，DCN可以使HSC-T6细胞表达Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA减少，使Ⅰ、Ⅲ...
- 关键词：
- 关键词：核心蛋白聚糖肝纤维化
- B细胞激活因子水平ELISA检测方法的建立及临床初评被引量：2
- 2004年
- 目的:建立血清B细胞激活因子(B lymphocyte stimulator,BlyS)水平的ELISA检测方法,并初步探讨其临床价值。方法:以商品化的抗人BlyS单克隆抗体、生物素化抗人BlyS多克隆抗体,采用双抗夹心法自行建立BlyS血清水平的ELISA检测方法;并对80例风湿性疾病患者［50例系统性红斑狼疮(SLE)、20例类风湿关节炎(RA)、10例干燥综合征(SS)］、60例自身免疫性肝病患者［35例原发性胆汁性肝硬化(PBC)、25例自身免疫性肝炎(AIH)］和40例正常人的血清BlyS水平进行检测。结果:成功建立血清BlyS水平的ELISA检测法且重复性较好,80例风湿性疾病患者的血清BlyS水平为(8.23±1.42)ng／ml,60例自身免疫性肝病患者为(3.40±0.79)ng／ml,40例正常人的血清BlyS水平为(3.19±0.88)ng／ml。与正常人相比,风湿性疾病组的BlyS血清水平明显升高(P<0.01),而自身免疫性肝病组的BlyS血清水平升高则不明显。结论:本研究所建立的BlyS血清水平ELISA检测方法简便、可靠、准确,为后续研究BlyS与自身免疫性疾病尤其是风湿性疾病的关系奠定了基础。
- 周琳屠小卿朱烨刘海英陆慧琦候晓菁陈洁谭龙益孔宪涛仲人前
- 关键词：B细胞激活因子酶联免疫吸附测定自身免疫疾病
- 人源抗-HBs Fab表达系统的转换与效果被引量：1
- 2004年
- 目的:重新克隆抗-HBs Fab基因于pBAD载体,改变诱导方式与表达条件,提升原核表达人源抗体片段的经济性与实用性。方法:经3次基因扩增,分步克隆,将Fd、Lc与pBAD／Lc基因先后插入到pBAD载体中,形成单载体双启动、定向表达形式。筛选双重插入菌落,阿拉伯糖诱导表达,PAGE和Western印迹鉴定抗一HBs Fab的表达效果。结果:酶切克隆载体,琼脂糖电泳证实Fd和pBAD／Lc基因的正确插入;PAGE可见明显的相对分子质量近50 000的蛋白区带,Western印迹显示该区带确为Fab;HBsAg特异印迹表明表达产物具有抗原结合活性。结论:比较原pComb3表达系统,改变后的pBAD表达系统明显提高了抗-HBs Fab的表达量(可达70 mg／L)并保持了抗体活性,为该抗体的批量制备与临床应用提供了条件。
- 韩焕兴陆慧琦郑大勇叶伟民朱烨罗荣城
- 关键词：抗-HBSFAB基因表达
- 2种检测VEGF-C和VEGFR-3基因表达的方法在诊断食管癌淋巴结转移中的价值被引量：2
- 2009年
- 目的评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)和免疫组织化学法(IHC)测定食管癌组织中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)基因表达在诊断食管癌淋巴结转移中的意义。方法分别采用实时FQ-RT-PCR和IHC检测食管癌组织中VEGF-C/VEGFR-3 mRNA和VEGF-C/VEGFR-3蛋白。结果有淋巴结转移组食管癌组织VEGF-C/VEGFR-3 mRNA和蛋白的表达均显著高于无淋巴结转移组;实时FQ-RT-PCR检测VEGF-C mRNA诊断食管癌淋巴结转移的敏感性、特异性以及与病理学诊断的符合率与IHC检测VEGF-C蛋白差异无统计学意义;实时FQ-RT-PCR检测食管癌组织VEGFR-3 mRNA诊断食管癌淋巴结转移的敏感性、特异性以及与病理学诊断的符合率均明显高于IHC(P<0.05)。结论实时FQ-RT-PCR检测VEGF-C/VEGFR-3 mRNA可较好地反映食管癌淋巴结转移状况。
- 卢培陆慧琦韩焕兴朱学源黄秋芳龚炜
- 关键词：血管内皮生长因子-C血管内皮生长因子受体-3食管癌淋巴结转移实时荧光定量逆转录聚合酶链反应
- 乳腺癌组织中ERα mRNA和PR mRNA检测方法的建立和应用被引量：2
- 2012年
- 建立测定雌激素受体α（ERa）tuRNA和孕激素受体（PR）mRNA的实时荧光定量RTPCR，探讨两者在乳腺癌组织及良性乳腺肿瘤组织中的表达水平。分别以pMDl8－ERα和pMDl8－PR质粒为定量模板，用循环阂值（Ct）定量起始模板，在荧光TaqMan方法的基础上建立了测定ERamRNA和PRmRNA的实时荧光定量RT—PCR，并分别测定48例乳腺癌组织及28例良性乳腺肿瘤组织中ERamRNA和PRmRNA的表达水平。ERamRNA和PRmRNA测定的线性范围为103～108copy／μgRNA；ERamRNA和PRmRNA高值和低值的批内和批间变异系数（cⅥ在5．07％～11．28％之间。ERmRNA在乳腺癌组织中的表达量为6．76×10。copy／μgRNA（4．17×10。，9．34×10。），良性乳腺肿瘤组织中的含量为1．54×10μcopy／／μgRNA（1．02×10。，2．06×10。），乳腺癌组织的表达量高于良性组织（P％0．05）；PRmRNA在乳腺癌组织中的表达量为1．02×10。copy／μgRNA（6．81×10。，1．36×10。），良性乳腺肿瘤组织中的含量为4．93×10。copy／／μgRNA（3．21×10。，6．65×10。），两者表达无明显差异（P〉0．05）。ERαmRNA和PRmRNA在乳腺癌和良性乳腺肿瘤组织中的表达存在相关性。我们建立的测定ERamRNA和PRmRNA的实时荧光定量RT—PCR灵敏、稳定、重复性好，可供临床检测和研究。ERamRNA和PRmRNA基因表达水平可作为预测治疗效果及判断预后的重要指标。
- 叶伟民何金何铭珺杨洁徐毅陆慧琦
- 关键词：雌激素受体Α孕激素受体乳腺癌实时荧光定量RT-PCR
- 抗HBs Fab-IFNa对HBV感染作用的实验研究
- HepG2.2.15细胞是由2个头尾相连的HBV-DNA全基因的重组质粒转染HepG2细胞而建立的细胞系,可在体外无性繁殖,能够长期稳定的向培养上清中分泌HBsAg,HBeAg和完整的Dane颗粒,而且还能产生大量的复制...
- 陆慧琦宋杰陈佳叶伟民韩焕兴
- 文献传递
- 人源抗-HBs Fab表达系统的转换与制备研究
- 人源抗体制备的瓶颈是获得高表达、高产量、高活性抗体.前期的研究表明,以pComb3为载体的抗体片段表达无法避免较高的基础表达,难以达到上述的理想制备.该课题引入了一个新的策略,即以pBAD/gⅢ为载体重新克隆抗-HBs ...
- 陆慧琦
- 关键词：抗体活性
- 文献传递
- κ、λ轻链C区基因的克隆与表达
- 目的利用pBAd /g ⅢA表达载体和大肠杆菌Top10克隆和表达κ、λ轻链C区基因片段,探索生物工程技术制备小分子抗原的可行性。方法以RT-PCR从正常人的外用血淋巴细胞mRNA中扩增出κ、λ轻链恒定区基因,经Hind...
- 陆慧琦韩焕兴叶伟民杨丹榕
- 关键词：纯化免疫印迹
- 文献传递
- 不同浓度阿霉素对A549细胞存活影响的机制研究
- 2014年
- 目的:探讨在不同浓度阿霉素作用下,肺癌细胞株A549存活率发生反向变化的可能机制。方法:在阿霉素作用于A549细胞24小时后,采用MTT法检测细胞存活情况的变化;用实时定量RT-PCR和蛋白印迹法测定survivin的mRNA和蛋白水平表达;免疫印迹检测p21蛋白表达水平,以及流式细胞术检测药物作用后细胞周期变化。进一步用羟基脲阻滞细胞分化于G1期,观察阿霉素对细胞的作用情况。结果:在不同浓度梯度的阿霉素作用下(由低至高),细胞存活率出现先下降后上升的反弹趋势(P<0.01),并伴随survivin分子的高表达,同时,药物作用下细胞分化更倾向阻滞于G1期。结论:高浓度阿霉素作用下细胞分化多阻滞于G1期,并诱导出现survivin分子的高表达,从而增强了对细胞的保护作用是细胞存活率反向升高的可能原因。
- 宋杰祝丽双陈佳陆慧琦韩焕兴
- 关键词：阿霉素肺癌细胞株A549SURVIVIN细胞周期
