迟象阳
- 作品数:9 被引量:15H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 一种抗炭疽芽孢杆菌PA抗原的全人源抗体
- 本发明公开了一种抗炭疽芽孢杆菌PA抗原的全人源抗体,所述抗体通过克隆人源的抗炭疽PA抗原抗体的重链和轻链可变区基因,构建线性表达框,并转染于宿主细胞,通过对PA抗原结合活性和中和活性的筛选而获得。本发明公开的抗体对炭疽芽...
- 陈薇于长明迟象阳李建民徐俊杰刘威岑宋小红张军张晓鹏付玲
- 文献传递
- 埃博拉病毒截短型糖蛋白GPdmucin的表达与纯化
- 2017年
- 目的:确定黏蛋白区缺失的埃博拉病毒包膜糖蛋白(GPdmucin)的最佳表达系统,并获得纯化的GPdmucin。方法:从埃博拉病毒的包膜糖蛋白(GP)全长基因上扩增GPdmucin序列,构建至pET32a、pFast Bac1和pcDNA3.4三种不同表达系统的质粒中,分别在原核、昆虫和哺乳动物表达系统中进行表达,并用特异抗体鉴定表达情况。结果:原核系统表达的GPdmucin不稳定,活性差;在昆虫表达系统中,GPdmucin在细胞内以不溶形式表达;利用Expi293瞬时蛋白表达系统,GPdmucin在哺乳动物细胞中可溶性表达,Ni柱亲和层析获得的目的蛋白纯度达90%以上,且与特异抗体具有很好的结合活性。结论:获得哺乳动物细胞表达系统表达的GPdmucin蛋白,将用于GPcl的制备、GP抗体筛选、疫苗效果评价及病毒致病机理的研究。
- 范鹏飞迟象阳宋小红房婷吴诗坡陈旖王潇霖张冠英于长明陈薇
- 关键词:埃博拉病毒生物学活性
- 应用噬菌体随机肽库技术筛选鼠疫耶尔森菌F1抗原中和性表位
- 2015年
- 目的:筛选鼠疫耶尔森菌F1抗原的中和性表位,构建基于鞭毛蛋白佐剂的重组表位疫苗。方法:利用鼠疫菌F1抗原的中和抗体F2H5筛选噬菌体随机12肽库,对得到的阳性克隆采用ELISA进行特异性鉴定,采用竞争抑制ELISA确定具有竞争性的噬菌体单克隆并对其DNA测序,重组表达并纯化获得肽序列与截短型鞭毛蛋白Fli Cdel的融合蛋白,并通过Western印迹和ELISA鉴定重组蛋白与F2H5的结合。结果:获得了2株能够与F1抗原竞争结合F2H5的噬菌体单克隆12-1和12-14,其中12-14的竞争能力较强;通过序列比对,并没有发现这2株噬菌体克隆的插入肽序列与F1抗原序列存在一致性,但这2个插入肽序列与Fli Cdel的重组蛋白在Western印迹和ELISA结果中均显示出能够被抗F1的单克隆抗体识别。结论:F1中和性抗体筛选出的肽序列与截短的鞭毛蛋白融合表达后能够被F2H5特异性识别,为进一步对重组表位抗原进行免疫保护评价奠定了基础。
- 尹可欣迟象阳任军房婷刘树玲刘炬杨秀旭李建民于长明
- 关键词:鼠疫耶尔森菌F1抗原噬菌体随机肽库表位
- 一种抗炭疽芽孢杆菌PA抗原的全人源抗体
- 本发明公开了一种抗炭疽芽孢杆菌PA抗原的全人源抗体,所述抗体通过克隆人源的抗炭疽PA抗原抗体的重链和轻链可变区基因,构建线性表达框,并转染于宿主细胞,通过对PA抗原结合活性和中和活性的筛选而获得。本发明公开的抗体对炭疽芽...
- 陈薇于长明迟象阳李建民徐俊杰刘威岑宋小红张军张晓鹏付玲
- 全人源炭疽保护性抗原中和抗体的研究
- 炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)致死率极高,是人畜共患烈性传染病-炭疽病(Anthrax)的病原体。并且炭疽杆菌来源广泛、易于培养,被作为一种A类生物战剂进行管理,其防生和反恐一直以来都具有重要的军事...
- 迟象阳
- 关键词:炭疽保护性抗原中和抗体药理作用
- 文献传递
- 一种人源抗埃博拉病毒包膜糖蛋白的单克隆抗体及应用
- 本发明公开了一种人源抗埃博拉病毒包膜糖蛋白GP的单克隆抗体,所述抗体具有独特的CDR区,并具有独特的作用位点,计算机模拟分析及生物学实验结果证实所述抗体既作用于GP的NPC1受体结合区,同时也作用于GP的聚糖帽区域,通过...
- 陈薇于长明迟象阳范鹏飞侯利华李建民徐俊杰吴诗坡刘威岑宋小红陈旖张晓鹏房婷付玲
- 文献传递
- 利用转基因小鼠筛选全人源炭疽致死因子中和抗体被引量:2
- 2016年
- 炭疽是由炭疽芽孢杆菌引起的严重威胁人类健康的传染病。炭疽毒素包括3种蛋白质成分:保护性抗原(PA)、致死因子(LF)和水肿因子(EF)。PA与LF形成致死毒素(LT),与EF形成水肿毒素(ET)。由于致死毒素(LT)在感染者损伤及死亡中发挥主要作用,因此在炭疽感染晚期单纯使用抗生素治疗难以发挥疗效,治疗性中和抗体成为目前最有效的炭疽治疗药物。目前国外获得的炭疽毒素抗体多为炭疽PA抗体,美国FDA已批准瑞西巴库(人源PA单抗)用于吸入性炭疽的治疗。一旦炭疽芽孢杆菌被人为改构或PA中和表位发生突变,针对PA单一表位的抗体将可能失效,因此针对LF的抗体将成为炭疽治疗的有效补充。目前国外已有的LF抗体多为鼠源抗体和嵌合抗体,而全人源抗体可以避免鼠源抗体免疫原性高等缺点。本研究首先用LF抗原免疫人抗体转基因小鼠,利用流式细胞仪从小鼠脾淋巴细胞中分选抗原特异的记忆B细胞,通过单细胞PCR方法快速获得两株具有结合活性的抗LF单抗1D7和2B9。瞬时转染Expi 293F细胞制备抗体,通过毒素中和实验(TNA)发现1D7和2B9在细胞模型中均显示较好的中和活性,并且与PA单抗联合使用时,表现出较好的协同作用。总之,本文利用转基因小鼠、流式分选技术和单细胞PCR技术的优势,快速筛选到全人源LF抗体,为快速筛选全人源单克隆抗体开辟了新的思路与方法。
- 王潇霖迟象阳刘炬刘威岑刘树玲邱顺芳温中华范鹏飞刘坤宋小红付玲张军于长明
- 关键词:转基因小鼠
- 单个B细胞抗体制备技术及应用被引量:14
- 2012年
- 单克隆抗体是现代生命科学研究的重要工具,为许多领域的发展作出了不可估量的贡献。随着PCR技术和单克隆抗体技术的发展和成熟,单个B细胞抗体制备技术迅速兴起。该技术能够对单个的抗原特异性B细胞进行抗体基因的体外克隆和表达,保证了轻重链可变区的天然配对,相较于传统的抗体制备技术具有效率高、全人源、基因多样性更丰富等优势。单个B细胞抗体制备技术已成为制备全人抗体的热门方法,同时也促进了包括抗体发生成熟、疫苗保护机制、疫苗开发、肿瘤及自身免疫疾病等免疫学相关研究。文中就单个B细胞抗体制备技术的过程及应用作简要综述。
- 迟象阳于长明陈薇
- 关键词:单克隆抗体免疫球蛋白基因逆转录PCR
- 一种人源抗埃博拉病毒包膜糖蛋白的单克隆抗体及应用
- 本发明公开了一种人源抗埃博拉病毒包膜糖蛋白GP的单克隆抗体,所述抗体具有独特的CDR区,并具有独特的作用位点,计算机模拟分析及生物学实验结果证实所述抗体既作用于GP的NPC1受体结合区,同时也作用于GP的聚糖帽区域,通过...
- 陈薇于长明迟象阳范鹏飞侯利华李建民徐俊杰吴诗坡刘威岑宋小红陈旖张晓鹏房婷付玲