辛殿祺
- 作品数：60 被引量：191H指数：8
- 供职机构：北京大学第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金首都医学发展科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- T细胞因子4显性负调节基因ΔNTCF4对肾癌细胞GRC-Ⅰ生物学性状的影响被引量：2
- 2006年
- 目的观察T细胞因子4(TCF4)显性负调节基因ΔNTCF4对肾癌细胞GRC-1生长、增殖等生物学行为的影响。方法将缺失N末端的TCF4显性负调节基因真核表达质粒pCDNA3-ΔNTCF4和pCDNA3空载体分别转染肾癌细胞GRC-Ⅰ,建立稳定表达ΔNTCF4基因的肾癌细胞系GRC-Ⅰ/ΔNTCF4和空载体细胞系GRC-Ⅰ/Mock,光镜下观察细胞生长状态,绘制生长曲线,MTT法检测细胞增殖活性,免疫细胞化学和Western blot检测Wnt信号通路下游靶基因C-Myc、Cox-2蛋白表达水平。结果稳定表达ΔNTCF4基因的GRC-Ⅰ/ΔNTCF4细胞形态由圆形变为长条状,细胞生长速度变慢,核分裂相减少,出现向正常肾小管细胞逆转的趋势；GRC-Ⅰ/ΔNTCF4细胞增殖活性受到明显抑制,与GRC-Ⅰ对照细胞相比抑制率达11．2%～35．5%(P＜0．05),而GRC-Ⅰ/Mock与对照细胞相比差异无统计学意义；表达显性负调节基因的肾癌细胞系GRC-Ⅰ/ΔNTCF4中Cox-2蛋白表达水平显著降低。结论转染T细胞因子4显性负调节基因ΔNTCF4能部分抑制肾癌细胞GRC-Ⅰ生长,降低Wnt通路靶基因C-Myc、Cox-2表达,为通过阻断Wnt信号通路对肾癌进行细胞信号治疗提供了实验依据。
- 叶雄俊林桂亭常智杰张志文辛殿祺王晓峰郭应禄
- 关键词：肾肿瘤T细胞因子4
- 激活转录因子5的克隆及其在真核细胞中的表达定位被引量：2
- 2005年
- 目的克隆激活转录因子(ATF)5,构建其真核表达载体,观察其在细胞中的表达定位。方法根据人ATF5的cDNA序列设计引物,通过巢式PCR扩增ATF5全长及其N端(ATF5/N)和C端(ATF5/C),构建重组表达质粒pCS2MT-ATF5、pCS2MT-ATF5/N和pCS2MT-ATF5/C及融合绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒pEGFP-ATF5。将表达质粒转染293T和Cos7细胞,Westernblot检测其表达情况,荧光显微镜观察ATF5在293T和Hela细胞的定位。结果巢式PCR产物与预期大小一致,重组质粒pCS2MT-ATF5、pCS2MT-ATF5/N和pCS2MT-ATF5/C能表达携带Myc标签的蛋白Myc-ATF5、Myc-ATF5/N和Myc-ATF5/C,分子量分别为52、35和43×103。荧光显微镜观察发现融合了GFP的ATF5蛋白定位在细胞核。结论成功的克隆和表达ATF5基因为进一步研究其在肾肿瘤发生、发展过程中的作用奠定了基础。
- 叶雄俊常智杰林桂亭张志文辛殿祺王晓峰郭应禄
- 关键词：基因克隆真核细胞肾肿瘤
- 垂体瘤转化基因(PTTG1)可抵抗UV诱导的细胞凋亡作用
- 2008年
- 垂体瘤转化基因(PTTG1)在很多肿瘤中呈高水平表达.越来越多的研究表明,PTTG1与细胞增殖、细胞转化有关.但PTTG1在凋亡中的作用仍不清楚.通过在细胞中下调和过表达PTTG1,观察PTTG1在UV照射诱导凋亡中的作用.结果发现,RNAi-介导下调HeLa细胞PTTG1表达可增加对UV诱导凋亡的敏感性,而过表达PTTG1则降低对UV诱导凋亡的敏感性.此外,UV照射能降低PTTG1蛋白的表达水平,并且表现为明显的剂量和时间关系.这些研究结果显示,PTTG1在UV照射诱导的凋亡中发挥重要的抗凋亡作用.这为研究PTTG1在肿瘤发生、发展中的作用机制提供了新的实验证据.
- 来永庆朱绪辉那彦群辛殿祺
- 关键词：凋亡
- 散发性肾透明细胞癌组织中希佩尔林道基因突变与缺氧诱导因子1α、2α的测定被引量：3
- 2005年
- 目的 探讨散发性肾透明细胞癌 (CCRCC)组织中希佩尔 林道 (VHL)基因突变、缺氧诱导因子 1α(HIF- 1α)和HIF- 2α的表达及其关系,对肿瘤分期、分级的影响。方法 应用聚合酶链反应(PCR)、PCR产物直接测序和免疫组化等方法,分析 77例散发性CCRCC患者癌组织中VHL基因突变、HIF- 1α和HIF- 2α的表达。其中T1 期 55例(71% ),T2 期 7例 (9% ),T3 期 14例 (18% ),T4 期1例(1% );病理分级,G1 15例(19% ),G2 56例(73% ),G3 6例(8% )。结果 在正常肾组织中无VHL基因突变。散发性CCRCC中VHL基因突变率为 52% ( 40 /77 ),HIF 2α阳性率 81% ( 62 /77 ),高于HIF 1α阳性率 66% (51 /77) (χ2 =23 310, P<0 01);VHL基因突变者中HIF 1α和HIF 2α的阳性率(98%和 93% )均高于无突变者的阳性率 ( 32% 和 68%,χ2 值分别为 36 .386, 7 617,P均 <0 01 );HIF 1α和HIF 2α的表达均与VHL基因突变相关(偏回归系数分别为 4 481, 2. 027,P均 <0 01);未发现VHL基因突变、HIF 1α和HIF 2α表达与肿瘤病理分级、分期有关 (P均 >0. 05 )。结论 在散发性CCRCC患者中VHL基因突变较广泛,在突变组织中HIF -1α和 2α高表达,但VHL基因突变、HIF- 1α和 2α的表达与患者病理分级、分期不相关。
- 龚侃张宁那熙吴关杨新宇辛殿祺那彦群
- 关键词：基因突变缺氧诱导因子1Α
- 短期新辅助治疗对前列腺癌组织内聚集素蛋白表达的影响被引量：2
- 2005年
- 目的 探讨短期新辅助治疗(NHT)后前列腺癌组织学及癌细胞内聚集素蛋白表达的变化及其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法,对未行雄激素阻断治疗的 26例前列腺癌患者前列腺癌根治术(RP)标本(26份,无NHT组 ), 19例行 3个月NHT患者NHT前穿刺活检标本及NHT后的RP标本(NHT组),行前列腺癌组织内聚集素蛋白表达水平的测定,观察NHT对癌组织中聚集素蛋白表达水平的影响。结果 聚集素主要存在于前列腺癌细胞的细胞浆中,部分存在于细胞外间质。NHT组NHT前癌组织中聚集素表达较弱,染色强度平均值为 1 .42±0 .51,NHT后表达较强,染色强度平均值为 2 .16±0. 60(t=7. 10,P<0. 01);NHT组NHT后聚集素表达高于无NHT组 (染色强度平均值为 1 .57±0. 70,t=2 91,P<0 .01)。结论 雄激素阻断治疗可使前列腺癌细胞内聚集素适应性上调,针对聚集素的辅助治疗可提高激素阻断治疗的效果。
- 牛亦农辛殿祺何志嵩周利群潘柏年那彦群郭应禄
- 关键词：新辅助治疗前列腺癌肿瘤组织聚集素雄激素
- 从人肾癌酵母双杂交文库中筛选TCF4相关蛋白被引量：5
- 2003年
- 目的 应用酵母双杂交技术寻找在肾癌发生过程中与Wnt信号家族成员T细胞因子 4(TCF4)相互作用的新蛋白。 方法 以Wnt通路中的关键信号分子TCF4的N端和DNA结合域(TCF4ND ,1～ 495aa)为诱饵蛋白 ,筛选肾癌双杂交文库 ,得到的阳性克隆酶切分类 ,测序后在GenBank中进行Blast分析。 结果 筛出与hTCF4相互作用的阳性克隆 51个 ,包括 β环连蛋白 (β catenin) ,hTCF4,激活转录因子 5(ATF5) ,人类锌指蛋白等 ,其中未知基因 2个。 结论 肾癌的发生。
- 叶雄俊林桂亭张志文陈培拉辛殿祺常智杰郭应禄
- 关键词：肾癌
- 尿路上皮癌特异新基因尿路上皮癌抗原1表达强度与尿路上皮癌分级相关性研究被引量：5
- 2012年
- 目的找到与尿路上皮癌抗原1(UCA1)表达强度相关的临床病理学参数,为该基因在膀胱癌发生或进展中的功能学研究提供依据。方法用逆转录PCR检测83例尿路上皮癌(膀胱癌48例,肾盂癌23例,输尿管癌12例)组织中UCA1的表达强度,同时用Northern印迹法分别检测3例尿路上皮癌(3种癌各1例)的UCA1表达。用Spearman's非参数分析研究UCA1表达强度与4个临床病理学参数(患者性别,肿瘤分期、分级及数量)的相关性。按照4个临床病理学参数将尿路上皮癌分为不同亚组,用Mann-Whitney检验来比较UCA1在不同亚组中的表达差异。结果 UCA1在83例尿路上皮癌中总体表达率达84.3%(70/83),在3种尿路上皮癌中的表达率分别为85.4%(41/48)、83.3%(10/12)、82.6%(19/23)。UCA1表达强度与肿瘤分级有相关性,相关系数0.269(P=0.014),且高级别肿瘤的表达强度明显高于低级别肿瘤,差异有统计学意义(P=0.019),而患者性别、分期及肿瘤数量与UCA1表达强度均无相关性。结论 UCA1与尿路上皮癌分级的显著相关性说明该基因可能与尿路上皮癌的进展有关,对此需要更深入的功能学研究加以证实。
- 杨阳张争雷洪恩何志嵩辛殿祺
- 关键词：尿路上皮癌
- 雄激素调控前列腺癌中PTTG1表达的研究
- 2005年
- 目的阐明雄激素与前列腺癌中雄激素应答基因PTTG1(pituitary tumor transforming gene1)表达的关系。方法选择基因芯片筛选的大鼠前列腺雄激素应答基因PTTG1,应用Northern Blot检测其在去势大鼠补充雄激素Mib(Mibolerone)前后在前列腺组织中的表达。应用免疫组化检测PTTG1在人前列腺癌组织中的表达,进一步以Northern Blot检测雄激素依赖性前列腺癌细胞系LNCaP及雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC3和DU145中PTTG1的表达情况。结果PTTG1在去势7d的大鼠前列腺组织中没有表达,而补充Mib2d后即有显著的表达;PTTG1主要表达于人前列腺癌上皮细胞;0.1nmol/L Mib作用48h可显著上调LNCaP细胞PTTG1的表达;与LNCaP细胞比较,PC3和DU145中PTTG1的基础表达水平更高。结论雄激素可显著上调大鼠前列腺组织及人前列腺癌细胞中PTTG1的表达,提示PTTG1可能在人前列腺癌的发生、发展中发挥重要的作用。
- 辛殿祺朱绪辉来永庆由然那彦群郭应禄毛泽斌
- 关键词：垂体瘤转化基因前列腺肿瘤雄激素类
- 前列腺癌细胞中NSBP1基因表达上调被引量：11
- 2004年
- 明确用mRNA差异显示技术 (mRNA DD)筛选出的前列腺癌相关基因NSBP1(NucleosomalBindingProtein 1)在前列腺癌细胞系的表达情况。在GenBankNR数据库中对筛选出的 5条差异表达序列标签 (EST)进行同源性分析 ,其中 1条与已知基因NSBP1高度同源 (97% )。半定量RT PCR结果显示在LNCaP、DU14 5及PC 3前列腺癌细胞系中NSBP1mRNA的表达水平分别高于正常前列腺组织 2 5倍、3 4倍和 3 6倍 ,与Northern杂交分析结果趋势一致。7例前列腺癌组织的RT PCR结果也体现了相同的表达趋势 ,NSBP1表达较配对正常前列腺组织增高 ,差异有统计学意义。以上结果表明NSBP1基因在前列腺癌细胞系和组织中的表达均明显高于正常前列腺组织 ,NSBP 1表达上调可能参与了前列腺癌的发生发展过程。
- 王建伟周利群杨学贞艾军魁辛殿祺那彦群郭应禄
- 关键词：前列腺癌细胞癌组织上调PC-3序列标签
- Clusterin前导序列抗前列腺癌细胞凋亡作用的研究被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨clusterin前导序列在抗前列腺癌细胞凋亡中的作用。 方法 培养转染全长clusterin序列的LNCaP细胞 (简称A)及缺少前导序列clusterin的LNCaP细胞 (简称B)为试验组 ,培养野生型 (简称L)及转染PIRES2 EGFP永久表达载体的LNCaP细胞 (简称M)为对照组 ,RT PCR法检测 4组细胞的clusterinmRNA水平。以TNF α进行诱导 ,检测L组细胞clusterinmRNA的变化 ,MTT及ELISA法检测 4组细胞的增殖活性与凋亡情况。 结果 B、A组细胞clusterinmRNA水平均显著高于L、M组 (P均 <0 .0 1) ;B、A组间差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。TNF α作用 2h时 ,与对照组 (A =12732 .0± 5 1.1)相比L组细胞clusterinmRNA有一过性升高 (A =15 6 4 2 .0± 6 4 .3) ,t =- 77.10 6 ,P <0 .0 1;12、2 4hmRNA显著降低 (A =1170 5 .3± 30 .7,984 8.0± 6 7.4 ,t=2 4 .890 ,4 8.0 2 0 ,P均 <0 .0 1) ;TNF α作用 2 4h后 ,A组细胞存活比例 (0 .75 97± 0 .0 2 5 1)显著高于B组细胞 (0 .6 6 97± 0 .0 185 )及对照组 (0 .6 80 8± 0 .0 2 2 2 ,0 .6 991± 0 .0 2 91) ,P均 <0 .0 1;A组细胞凋亡程度 (A =0 .32 6 5± 0 .0 387)显著低于B组细胞 (A =0 .5 6 5 0± 0 .0 32 4 )及对照组 (A =0 .5 892± 0 .0 4 18,0 .6 2 36± 0 .0 311。
- 牛亦农辛殿祺丁义杨风光买铁军周利群潘柏年那彦群郭应禄
- 关键词：前列腺癌细胞凋亡癌细胞肿瘤
