谢凤珍 作品数:14 被引量:45 H指数:5 供职机构: 河南科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技攻关计划 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
不同杀菌剂防治优质小麦纹枯病的研究 被引量:3 2007年 研究表明:优质小麦纹枯病的发生和普通小麦一样具有明显的阶段性。在不同阶段(主要是播种期和返青拔节期)分别用种衣剂、杀菌剂进行防治能起到良好的防治效果。药剂防治的最好组合是:播种期用14%小麦种衣剂拌种,返青拔节期(3月15日前后)用20%纹枯净可湿性粉剂喷雾。 谢凤珍 王振河 李淑恒关键词:优质小麦 纹枯病 种衣剂 杀菌剂 Penicillin和Ca^(2+)对玉米老化种子发芽及幼苗生长的影响 被引量:1 2007年 用不同浓度的CaCl2和Penicillin及二者复配后对老化的玉米种子进行处理,结果表明,Penicillin 100 mg/L、CaCl20.015 mg/L、二者复配以0.015 mg/L CaCl2+100 mg/L Penicillin能明显提高老化玉米种子发芽率、幼苗根系活力和叶片叶绿素含量,能适当降低其种子浸泡液的电导度,并经方差分析差异达到显著水平。 高扬帆 王振河 谢凤珍关键词:CACL2 PENICILLIN 玉米 老化种子 内切酶法制取菊苣低聚果糖工艺条件的研究 被引量:5 2007年 目的:利用毕赤嗜甲醇酵母表达的重组黑曲霉菊粉内切酶,从菊苣菊粉中制取低聚果糖。方法:用重组黑曲霉菊粉内切酶酶解水提菊粉,用薄层色谱、离子色谱分析酶解产物,研究酶解条件,分析产物组成。结果与结论:菊粉浓度为20~160g/L、酶浓度为12U/g菊粉时,低聚果糖的最大产率逐渐升高然后下降;在接近最大溶解度200g/L时,菊粉寡糖最大产率为62.0%,最大产率与酶的用量无关,但提高酶的浓度可以缩短达到最大产率的时间。pH5.5、50℃、菊粉浓度为40g/L、酶用量为12U/g菊粉时,可达到最大产率64.6%;酶解的产物主要为GF2到GF10的菊粉寡糖。 华承伟 谢凤珍 王建华关键词:菊粉 低聚果糖 拟青霉内切β-1,3(4)-葡聚糖酶基因克隆、表达及重组酶性质 被引量:2 2011年 采用改造的酿酒酵母表达载体pYES2-GSL构建了拟青霉Paecilomyces sp.FLH30表达cDNA文库,刚果红平板法筛到一内切β-1,3(4)-葡聚糖酶基因(PsBg16A),全长cDNA为1 217 bp,完整开放阅读框(ORF)951 bp,编码316个氨基酸,属于糖苷水解酶16家族。去信号肽的PsBg16A克隆入表达载体pET28a(+)并在E.coli BL21成功表达,经16°C 20%乳糖诱导24 h,酶活达482 U/mL。重组PsBg16A可水解大麦葡聚糖、地衣多糖和昆布多糖,显示PsBg16A为典型的β-1,3(4)-葡聚糖酶(EC 3.2.1.6),重组酶最适pH和温度分别为7.0和65°C,对大麦葡聚糖、地衣多糖和昆布多糖的Km分别为3.12、4.86和10.32 g/L。 华承伟 谢凤珍 陈晓静关键词:拟青霉 基因克隆 毕赤嗜甲醇酵母工程菌高密度培养表达黑曲霉菊粉内切酶的研究 2007年 目的:对毕赤嗜甲醇酵母工程菌inu-26高密度培养表达黑曲霉菊粉内切酶的条件进行优化,找出最佳的外源蛋白表达条件。方法:在摇瓶优化培养的基础上进行发酵罐高密度培养,优化最佳产酶条件。结果:以葡萄糖为碳源、微量元素添加量100~200mL/L、甲醇浓度1g/L、pH6.0~7.0、诱导时间96h时酶的表达量最高;摇瓶模拟高密度培养表明影响酵母生长的最主要因素葡萄糖和硫酸铵的最佳浓度分别为20~45和11.5g/L;利用培养基F1进行高密度培养优于其他培养基,工程菌生长符合指数生长曲线,细胞生长延迟期为1.36h,比生长速率μ为0.4846h-1。结论:以葡萄糖为碳源,采用葡萄糖-甲醇混合诱导和100%甲醇单一诱导相结合,在菌体鲜重约为280g/L时连续诱导96h,菌体生长良好,不会出现自溶,且酶的表达量最高,为摇瓶培养的3倍多,酶活最高可达540 U/mL。 华承伟 谢凤珍 王建华 史贤明葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达优化 被引量:2 2011年 拟青霉(Paecilomyces sp.FLH30)β-1,3(4)-葡聚糖酶可在重组菌BL21(DE3)-pET28a/PsBg16A中表达.首先确定了该酶的细胞表达定位,再研究了诱导温度、诱导剂种类及浓度、诱导起始菌体密度、诱导时间等因素对重组菌生长及目的蛋白表达活性的影响.结果表明,IPTG和乳糖皆可诱导目的蛋白表达,乳糖的诱导效果优于IPTG.在诱导起始OD_(600)为3.2时加入10%乳糖,20℃诱导20 h最适于目的蛋白的表达.表达条件优化后,酶活可达到482.2U/mL. 谢凤珍 华承伟 陈晓静关键词:葡聚糖酶基因 大肠杆菌 红色链霉菌发酵产红霉素培养基的响应面优化 被引量:11 2011年 目的采用响应面法对红色链霉菌(Streptomyces erythreus)发酵产红霉素培养基进行优化。方法利用Design-Expert 8的Min Run Res IV多因子两水平设计,对发酵培养基的有机碳源和氮源的组成进行因素的效应评价,利用最峭攀登搜索法为响应面分析的中心组合设计确定中心区,利用响应面分析得到优化培养基组成。结果淀粉、糊精、豆饼粉和玉米浆因素对红霉素产量有显著影响,其最佳组成为:淀粉5.24%,糊精1.43%,豆饼粉4.56%,玉米浆1.47%。结论利用响应面法已成功优化了红霉素发酵培养基组成的碳源和氮源,摇瓶发酵产红霉素化学效价为6 192 U/ml。 华承伟 于江傲 谢凤珍关键词:红霉素 发酵 培养基 响应面 响应面法优化玉米芯木聚糖提取条件 被引量:7 2012年 为提高玉米芯中木聚糖得率,采用响应面法对碱法提取玉米芯木聚糖条件进行优化。利用Design-Expert 8的Min Run ResⅣ多因子两水平设计,对影响木聚糖提取的因素进行效应评价,利用最峭攀登搜索法为响应面分析的中心组合设计确定中心区,利用响应面分析得到优化提取条件。结果表明,碱提温度、碱提时间、NaOH质量分数和料液比对木聚糖提取率有显著影响,其最佳条件为:NaOH质量分数16%,温度85℃,料液比1∶16,提取时间2.5h。利用响应面法成功对玉米芯木聚糖提取条件进行优化,提取率达到25.6%。 华承伟 谢凤珍 陈晓静关键词:玉米芯 木聚糖 响应面 菊苣中菊粉提取工艺条件的研究 被引量:7 2006年 新鲜菊苣干制后干菊苣粉中总糖的含量可达73.6%,采用干菊苣粉用循环方式进行水抽提菊粉,在料液比为1:15,温度为80℃,浸提时间为2 h时提取率达98%,浸提液总糖含量达48.1 g/L;干菊苣粉和菊粉提取液中总糖的测定采用酸解法时,采用0.2 mol/L HCl水解40 min时,可提高测定结果准确度。 华承伟 谢凤珍 王建华关键词:菊苣 菊粉 一种酿酒酵母表达cDNA文库分离纤维质降解酶系基因的方法 2012年 目的:建立一种筛选自然界产纤维质降解酶系基因的新方法。方法:对酿酒酵母表达载体pYES2多克隆位点加入真核生物稀有限制性酶切位点SfiI进行改造,利用SMART技术,以大肠杆菌文库为转导,构建了拟青霉(Paecilomyces sp.H28)的酿酒酵母全长cDNA表达文库。结果:利用纤维质-刚果红染色法从文库筛选到多种纤维素和半纤维素降解酶系基因。结论:成功构建了拟青霉的酿酒酵母表达cDNA文库,加快了纤维质降解酶系基因的快速分离,也为其它相关基因的快速分离提供了有益的借鉴。 华承伟 谢凤珍 于江傲关键词:酿酒酵母 拟青霉