解瑶
- 作品数:10 被引量:12H指数:2
- 供职机构:河北大学更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 一种适用于SELEX技术的单链DNA制备方法被引量:2
- 2014年
- 为了建立一种简单、高效制备高纯度单链DNA方法,用于SELEX技术筛选过程中次级文库的筛选,对制备链霉亲和素磁珠的实验条件进行了优化,确定了对称PCR产物与链霉亲和素磁珠偶联的最佳时间和饱和度,并验证了不同浓度NaOH对解链效果的影响,建立了适于SELEX技术的单链DNA制备体系。利用荧光法和聚丙烯酰胺凝胶电泳对本实验所建立方法及传统不对称PCR法制备单链DNA的回收效率和纯度进行了比较,结果表明在最优实验条件下用磁性分离法制备的单链DNA纯度及回收效率均显著高于不对称PCR法。
- 刘中成解瑶张艳芬赵丽健刘利鹏肖敏华
- 关键词:SELEX技术单链DNA
- 一种特异识别链霉素的核酸适配子及其在链霉素检测中的应用
- 本发明公开了一种特异识别链霉素的核酸适配子,所述适配子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;同时,本发明还公开了利用核酸适配子定性及定量测定的链霉素方法和在食品检测中的应用。本发明以链霉素为靶物质,利用SELEX技术...
- 刘中成樊武舫张艳芬解瑶赵丽君赵丽健王向欢
- 核酸适配子在小分子检测中的应用
- 2015年
- 核酸适配子是利用配体指数级富集系统进化技术从单链寡核苷酸文库中筛选出的与靶物质有高亲和力和特异性的寡核苷酸,它已成为小分子化合物研究的有效工具,在分析化学领域逐渐成为人们研究的热点。当前已筛选了许多小分子物质特异性适配子,并基于适配子开发了一系列小分子物质检测系统。本文主要对SELEX筛选流程、小分子物质核酸适配子筛选特征与方法以及以核酸适配子为基础开发的电化学法、荧光法、胶体金比色法、酶联适配子免疫法等在小分子物质检测中的应用进行了综述。
- 张艳芬解瑶王南南赵丽建刘利鹏刘中成
- 一种特异识别链霉素的核酸适配子及其在链霉素检测中的应用
- 本发明公开了一种特异识别链霉素的核酸适配子,所述适配子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;同时,本发明还公开了利用核酸适配子定性及定量测定的链霉素方法和在食品检测中的应用。本发明以链霉素为靶物质,利用SELEX技术...
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- 文献传递
- 负调控变态反应融合分子设计及其作用机制研究
- 刘中成毕克维张艳芬管立时海浪赵丽君解瑶
- 根据变态反应中肥大细胞和嗜碱粒细胞同时表达IgE高亲和力受体FcεRI和免疫负调节受体FcγRIIB的特点,利用噬菌体肽库展示技术筛选IgE结合肽与抑制性受体FcγRIIB结合肽,并通过构建融合分子的形式偶联FcεRI与...
- 关键词:
- 关键词:变态反应性疾病基因工程
- 一种特异识别链霉素的核酸适配子的筛选方法和应用
- 本发明公开了一种特异识别链霉素的核酸适配子筛选方法,其步骤为:A、环氧基凝胶与链霉素偶联;B、制备阴极柱和阳极柱;C、构建ssDNA随机文库,对链霉素亲和性较高的适配子的筛选及测定;D、荧光法鉴定最高亲和性、特异性识别链...
- 刘中成樊武舫张艳芬解瑶赵丽君赵丽健王向欢
- 核酸适配子在IgE检测中的应用被引量:1
- 2013年
- 核酸适配子是一类经SELEX技术筛选出来的寡聚核苷酸,其功能与单克隆抗体类似但在诸多方面明显优于抗体,可用于测定靶物质含量等。免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)是介导过敏反应的关键因子,IgE定量检测是临床诊断过敏性疾病的重要指标。该文主要综述了核酸适配子在IgE检测中的应用。
- 刘中成赵丽君张艳芬解瑶时海浪
- 关键词:IGE
- 适于标记核酸适配子胶体金的制备及性能被引量:4
- 2014年
- 为了获得适于标记寡核苷酸适配子的胶体金,对制备工艺条件进行了优化:20 mL 0.1 g/L氯金酸溶液中添加10 g/L柠檬酸三钠500 μL,pH=3.0,初始沸腾时间小于4 min,加入还原剂后反应时间为6 min.通过紫外可见光谱扫描和透射电镜对其性能进行鉴定,获得了分散均匀、直径15~20 nm的胶体金颗粒,可准确标记核酸适配子,且将胶体金标记的链霉素适配子与半抗原小分子链霉素进行反应,可对链霉素进行定性和半定量检测,满足利用胶体金标记适配子检测靶物质的需要.
- 解瑶刘中成张艳芬赵丽健刘利鹏
- 关键词:胶体金
- 一种特异识别链霉素的核酸适配子的筛选方法和应用
- 本发明公开了一种特异识别链霉素的核酸适配子筛选方法,其步骤为:A、环氧基凝胶与链霉素偶联;B、制备阴极柱和阳极柱;C、构建ssDNA随机文库,对链霉素亲和性较高的适配子的筛选及测定;D、荧光法鉴定最高亲和性、特异性识别链...
- 刘中成樊武舫张艳芬解瑶赵丽君赵丽健王向欢
- 文献传递
- Cε3-Cε4蛋白核酸适配子筛选与鉴定被引量:6
- 2012年
- 设计并合成随机ssDNA文库,以硝酸纤维素膜为筛选介质,利用SELEX技术筛选人Cε3-Cε4蛋白特异性高亲和力核酸适配子,通过对退火温度、循环次数及靶蛋白与ssDNA摩尔比等关键参数进行优化,建立了适合的筛选体系。ELISA测定各适配子亲和力,获得了人Cε3-Cε4蛋白高亲和力、高特异性适配子,并分析了其一级结构和二级结构。以所获高亲和力适配子分别作为捕获适配子和检测适配子,建立了酶联适配子吸附试验(enzyme-linked aptamers sorption assay,ELASA)方法,灵敏度达到120 ng.mL-1,可用于人IgE的定量检测。
- 刘中成赵丽君张艳芬时海浪解瑶
- 关键词:免疫球蛋白E适配子