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蔡秋凤: 作品数：133 被引量：242H指数：9; 供职机构：集美大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金厦门市科技计划项目更多>>; 相关领域：轻工技术与工程农业科学生物学医药卫生更多>>

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鲢骨骼肌过敏原小清蛋白的分离纯化及多克隆抗体制备与应用被引量：9: 2010年; 小清蛋白是鱼类的主要过敏原,对该蛋白的研究不仅有利于过敏原检测方法的建立也可为低致敏性水产品的开发提供理论依据。通过组织捣碎、冷冻离心、热处理、Superdex75凝胶过滤等方法从鲢白色肉中纯化得到过敏原小清蛋白。Tricine-SDS-PAGE显示,在非还原条件下,该蛋白呈分子量分别为12ku、14ku、24ku的3个条带。而在还原条件下,仅有分子量为12ku的条带。Western-blotting分析表明,分子量为12ku、14ku和24ku的这3个条带都与小鼠抗蛙小清蛋白单克隆抗体(PARV-19)发生特异性反应,提示它们均为小清蛋白的不同形态。用纯化的小清蛋白制备多克隆抗体,经Protein A Sepharose亲和层析纯化得到高纯度的免疫球蛋白G(IgG)。Dot-blot检测发现,抗体稀释至1/51200时仍能与纯化的小清蛋白有显色反应。用制备的多克隆抗体进行Western-blotting分析,能特异地检测4种鱼(鲤、鲢、鲫、黄鳍鲷)中的小清蛋白。; 汪宁蔡秋凤刘光明陈昭华王锡昌苏文金曹敏杰; 关键词：小清蛋白纯化多克隆抗体

猪血激肽原的分离纯化及其对白鲢鱼鱼糜的凝胶作用被引量：5: 2012年; 以猪血为原材料,通过硫酸铵盐析和柱层析等方法,分离纯化出2种半胱氨酸蛋白抑制剂激肽原(kininogen).激肽原Ⅰ的得率为0.7%,纯化倍数为613.7;激肽原Ⅱ的得率为24.1%,纯化倍数为295.7.SDS-PAGE结果表明,激肽原Ⅰ和激肽原Ⅱ的分子质量分别为58 ku和116 ku.激肽原Ⅰ和激肽原Ⅱ对白鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix)鱼浆中肌原纤维蛋白降解都有一定的抑制作用,当激肽原Ⅱ添加量为鱼浆质量的0.03%时,可以使鱼糜凝胶强度提高24%.因此,激肽原可作为添加剂有效提高鱼糜制品的凝胶强度.; 钟婵江韬玲翁武银蔡秋凤翁凌曹敏杰; 关键词：组织蛋白酶猪血白鲢鱼

小龙虾粗提物体外降解小鼠肌肉的研究: 本研究旨在明确小龙虾致横纹肌肉溶解综合征的危害物的存在部位。本研究分别用不同提取液(PBS、盐溶液、正己烷)提取熟小龙虾的不同部位(肌肉、鳃肠、腺体)，得到粗提物；通过SDS-PAGE分析不同浓度粗提物在体外降解小鼠肌肉...; 林江伟曹敏杰蔡秋凤翁武银刘光明; 关键词：小龙虾降解

鲢小清蛋白的cDNA克隆及在大肠杆菌中的原核表达被引量：1: 2014年; 以鲢(Hypophthalmichthys molitrix)肌肉cDNA为模板,利用小清蛋白特异性引物进行PCR扩增,克隆得到β小清蛋白两种不同亚型,即Ⅰ型、Ⅱ型编码区基因。将目的基因片段连接到pET28a(+)表达载体,并在大肠杆菌[E.coli BL21(DE3)]中诱导表达。结果表明,经诱导的小清蛋白重组质粒菌株有特异的蛋白表达。SDS-PAGE分析显示,目的蛋白的分子量约为13 kD,与预期大小一致。菌体超声破碎后发现2种亚型的小清蛋白均为可溶表达。利用Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,得到高纯度的重组小清蛋白PVⅠ和PVⅡ。经Western Blot鉴定,重组小清蛋白PVⅠ和PVⅡ均能与抗鲢小清蛋白单克隆抗体反应。本研究为进一步分析小清蛋白的结构与致敏性的关系提供了重要的基础。; 王慈曹敏杰郑晓江詹春兰刘光明蔡秋凤; 关键词：小清蛋白 CDNA克隆原核表达

日本鳗（Anguilla japonica）胶原蛋白和小清蛋白的过敏原性: 本文以日本鳗（Anguilla japonica）皮肤与肌肉组织为研究对象,采用碱溶、酸溶、盐析、冻干等方法纯化得到胶原蛋白,采用加热、饱和硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析等方法纯化得到两种亚型...; 刘光明史千玉蔡秋凤潘冰青翁武银苏文金曹敏杰; 关键词：胶原蛋白小清蛋白免疫分析; 文献传递

凡纳滨对虾丝氨酸蛋白酶抑制剂的原核表达及性质研究: 2016年; 通过PCR扩增得到凡纳滨对虾丝氨酸蛋白酶抑制剂（SPI）基因,将其插入大肠杆菌表达载体p ET-28a,实现丝氨酸蛋白酶抑制剂在BL21（DE3）菌中以包涵体的形式大量表达。SDS-PAGE结果显示,目的蛋白分子质量约为15 ku,与预期大小一致。将包涵体溶解后,利用Ni2＋亲和柱层析对重组蛋白进行纯化,得到高纯度的重组SPI。经复性后的SPI对胰蛋白酶具有较高的抑制活性。该抑制剂在90℃内加热1 h,可保留90%以上的抑制活性,且在p H 1~8范围内较稳定。该抑制剂能特异性抑制凡纳滨对虾内源性胰蛋白酶的活性。抑制动力学试验结果表明,该抑制剂是竞争性抑制剂,其抑制常数Ki为1.69×10-9mol/L。结论：重组凡纳滨对虾丝氨酸蛋白酶抑制剂具有较高的抑制活性且较稳定,经优化表达条件后有望应用于新型对虾保鲜剂。; 詹春兰王慈翁凌蔡秋凤刘光明曹敏杰; 关键词：凡纳滨对虾丝氨酸蛋白酶抑制剂原核表达

加工处理方式对蟹类原肌球蛋白的消化稳定性和过敏原性的影响被引量：15: 2011年; 在超声波处理对拟穴青蟹(Scylla paramamosain)过敏原(原肌球蛋白,Tropomyosin,TM)影响的研究基础上,本文采用超声波、微波、超声波结合蒸煮处理拟穴青蟹蟹肉,提取其蛋白粗提液,通过模拟胃肠液消化及SDS-PAGE电泳、Western-blotting、抑制性ELISA等方法分析TM的消化稳定性及过敏原性。结果显示,与未经处理的样品及非过敏蛋白相比,TM在超声波(200W,30℃)处理后降解较快;微波处理后TM的消化稳定性及过敏原性没有明显变化,超声波处理、超声波结合蒸煮处理后TM的消化稳定性及过敏原性明显降低。该结果提示,超声波、超声波结合蒸煮等加工处理方式可降低蟹肉的致敏性。; 刘光明余惠琳黄秀秀蔡秋凤苏文金曹敏杰; 关键词：原肌球蛋白免疫检测

海参肠道中丝氨酸蛋白酶的分离纯化及性质分析: 自溶是导致海参体壁胶原蛋白降解的主要原因,是海参保鲜、贮藏、运输和加工等环节的难题之一.但是,目前针对引起海参自溶过程中胶原蛋白降解的蛋白酶研究报道甚少.本研究通过DEAE-Sephacel离子交换、Sepharcyl ...; 颜龙杰蔡秋凤张凌晶刘光明苏文金曹敏杰; 关键词：海参肠道丝氨酸蛋白酶纯化自溶

九孔鲍鱼纤维素酶的分离纯化与性质分析被引量：7: 2010年; 采用SP-Sepharose阳离子葡聚糖凝胶交换柱层析、Sephacryl S-200丙烯葡聚糖凝胶柱层析和Hydrox-yapatite羟基磷灰石柱层析,从九孔鲍鱼(Haliotis diversicolor)消化腺中分离纯化到一种纤维素酶。SDS-PAGE结果显示,该酶的分子质量约为55kDa。该酶水解羧甲基纤维素钠的最适温度50℃,最适pH5.5。该酶在温度40℃以下,pH5.0～7.0之间具有较好的稳定性。; 孙乐常巫朝华蔡秋凤张凌晶苏文金曹敏杰; 关键词：纤维素酶纯化

一种以鲍鱼内脏为原料制备纤维素酶的方法: 本发明提出了一种以鲍鱼内脏为原料制备纤维素酶的方法。包括如下步骤：粗酶提取；活性炭处理：所述粗酶液经过活性炭处理后过滤除去活性炭，所得为滤液；阳离子交换柱层析；膜处理；酶制剂制备：将所述浓缩液经喷雾干燥或冷冻干燥，得到高...; 曹敏杰陶志鹏蔡秋凤翁凌沈建东刘光明苏文金; 文献传递

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