胡小健
- 作品数:30 被引量:15H指数:3
- 供职机构:复旦大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 红细胞膜上Band 3交联对物质跨膜运输的影响
- Band 3和葡萄糖运输体(GluT1)是人红细胞膜上二种重要的膜蛋白。Band 3的主要功能是介导对阴离子的跨膜转运,由此使体内CO和外界O得以顺利交换。GluT1在膜上起着对D型葡萄糖易化扩散的作用,给红细胞提供糖酵...
- 姜维华丁滪胡小健周汉清张志鸿
- 文献传递
- 骨髓型急性放射病患者红细胞膜蛋白组成与功能变化特征被引量:2
- 1998年
- 观察辐射对红细胞膜损伤的远后效应。方法应用7.5%聚丙烯酰胺凝胶电泳法、Percol梯度密度离心、NO-2通透速率测定、DIDS通透抑制率测定等方法,分析5例骨髓型急性放射病(ARS)患者受照后第6年红细胞膜蛋白组成与功能。结果辐射对膜蛋白的损伤持续存在,损伤特征为带8蛋白含量减少,带3蛋白阴离子转运功能低下。进一步分析结果显示,ARS年轻红细胞对NO-2通透时间延迟较中、老年细胞变化明显;ARS红细胞对DIDS通透抑制效应下降。结论结果提示,辐射对红细胞膜蛋白的损伤环节在骨髓红细胞合成期;ARS红细胞膜外侧带3结合位点可能发生病变,导致阴离子转运功能下降;同时。
- 李津婴魏善建胡小健张志鸿周汉清
- 关键词:红细胞膜蛋白急性放射病
- 脂筏结构蛋白Flotillin的原核可溶表达与纯化
- <正>在生物膜上存在着富含鞘脂和胆固醇的微区结构脂筏,脂筏内除了存在大量信号转导相关的蛋白质外,还主要含 Flotillin 等标志性的特征结构蛋白,它们与上述信号分子相互作用形成蛋白质复合体,进一步调控信号转导途径,若...
- 宋佳平丁灏胡小健张志鸿
- 文献传递
- 红细胞膜上Band3交联对物质跨膜运输的影响
- 2002年
- Band3和葡萄糖运输体(GluT 1)是人红细胞膜上两种重要的膜蛋白.BS3(双磺基琥珀酰亚胺辛二酸盐)是一种不能透过膜的Band3共价交联剂.通过改变 Band3在膜上的聚集状态,BS3能抑制红细胞膜对NO2-的运输速率.同时,葡萄糖输入和输出的速率也随之明显减小.SDS-PAGE结果显示单体 Band 3减少,GluT 1的量无变化.表明在膜上Band3和GluT 1之间存在相互作用以实现膜蛋白功能快速和协同的发挥.
- 姜维华丁滪胡小健周汉清张志鸿
- 关键词:红细胞膜跨膜运输亚硝酸根
- 马克斯克鲁维酵母外切菊粉酶INU1的晶体结构研究
- 2019年
- 菊粉酶是一类能够将菊粉水解成果糖和低聚果糖的酶,它广泛应用于糖浆和果糖的工业生产.为了深入研究菊粉酶的结构与功能特征,我们解析了马克斯克鲁维酵母ATCC12424的外切菊粉酶INU1的晶体结构.通过毕赤酵母SMD1168(his4,pep4)对INU1进行了分泌表达,其体积酶活达到了1 671 U/mL.使用阴离子交换柱对INU1进行纯化并结晶解析了结构,INU1的晶体属于空间群I4 122,晶胞参数a=b=c=172.65,在上海同步辐射光源其衍射分辨率为2.8,一个非对称单位中有两个INU1分子以面对面方式堆积成二聚体.INU1的晶体结构与GH32(糖苷水解酶32)家族其他蛋白一致,主要由N端保守的5个β螺旋桨结构域和C端不保守的β夹层结构域组成.氨基酸序列和晶体结构对比显示,INU1的催化位点为Asp53,Asp182和Glu238.这个晶体结构为菊粉酶INU1的进一步改造以适应工业化生产提供了基础.
- 李龙苏晓琴方自安周峻岗胡小健吕红
- 关键词:菊粉酶菊粉马克斯克鲁维酵母晶体结构
- 一种碟式微流控结晶芯片与传统结晶板的蛋白质结晶能力比较
- 2015年
- 设计并制作了一种在微腔中对蛋白质进行微批量法(microbatch)结晶的碟式微流控结晶芯片,它是一种高通量、低成本、低耗样量(纳升级)、操作简便的蛋白质结晶筛选方法,这种芯片能成功地结晶溶菌酶(lysozyme)和青色荧光蛋白(CyPet).为了系统地比较这种微流控芯片与传统的使用蒸汽扩散法(vapor diffusion)的24孔结晶板的结晶能力,用3个Hampton结晶试剂盒(Crystal Screen KitⅠ、Crystal Screen KitⅡ和PEG/Ion Screen Kit),在4℃及20℃培养条件下分别对5种标准蛋白(溶菌酶(lysozyme)、木聚糖酶(xylanase)、脂肪酶B(lipase B)、葡萄糖异构酶(glucose isomerase)和嗜热菌蛋白酶(thermolysin))进行了结晶筛选实验.结果表明,在4℃时微流控芯片与24孔结晶板有相近数目的结晶条件(91 vs 98);在20℃时虽然微流控芯片上的结晶条件数少于24孔结晶板(67 vs 94),但主要是嗜热菌蛋白酶的结晶条件数显著减少,其他4种蛋白在两种方法上均有相近的结晶条件数,表明微流控芯片能以接近24孔结晶板的效率进行蛋白质结晶筛选.但是,在4℃时微流控芯片与24孔结晶板有60%的结晶条件不同,20℃时有90%的结晶条件不同,这表明目前的这种微流控芯片还不能直接代替传统的24孔结晶板,它可以作为蛋白质结晶筛选时的一种补充方式.
- 孙凯雷王丽杨文静祁祺胡小健李刚
- 关键词:蛋白质结晶
- 精胺对红细胞膜阴离子通透性的影响被引量:3
- 1993年
- 本文采用改进的NH_4Cl等渗膨胀法研究了精胺对红细胞膜阴离子通透性的影响.结果表明精胺对膜阴离子通透性有增大作用,并且这种作用随精胺浓度的增加及作用时间的延长而增大.本文还就精按的作用机制进行了探讨.
- 许红胡小健周汉清张志鸿
- 关键词:精胺红细胞膜阴离子通透性
- 精氨酸酶与红细胞膜的相互作用
- <正>人红细胞膜上阴离子交换蛋白Band 3能通过其胞质段(cdb3)和细胞内的骨架蛋白 (Ankyrin、Protein 4.1、Protein 4.2等)、多种糖酵解酶(醛缩酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、6-磷酸果糖激...
- 蒋明丁滪胡小健孙家廷张志鸿
- 文献传递
- 限制性内切酶Sau3Al蛋白质的结晶研究
- <正>限制性内切酶Sau3AI识别并酶切含GATC序列的DNA链,由于其对DNA的破坏性使得大量表达重组Sau3AI难以在大肠杆菌中实现。与有相同酶活性的其它蛋白质相比,Sau3AI对双链DNA识别位点GATC中的A的甲...
- 徐春艳宋佳平郁峰丁滪唐琳胡小健何建华张志鸿
- 文献传递
- Ⅱ型糖尿病患者红细胞膜葡萄糖运输体异常的研究被引量:1
- 1998年
- 用葡萄糖跨膜运输蛋白的抑制剂-根皮素,观察到它对Ⅱ型糖尿病患者红细胞膜葡萄糖输入的抑制常数显著增大,提示了患者葡萄糖运输体外侧和底物分子结合位点发生了结构改变。进一步,测量了和膜上葡萄糖运输体能特异结合的葡萄糖、细胞松弛素B、根皮素等对血影膜上色氨酸残基荧光的淬灭效应。由淬灭效应前后血影膜荧光强度的相对变化,证实患者红细胞膜对葡萄糖转运功能的异常和运输蛋白中某些色氨酸残基(特别是膜外侧区段)周围结构的改变有关。
- 胡小健张志鸿彭锋周汉清程威英冯菡芳
- 关键词:糖尿病红细胞膜