肖跃强
- 作品数：135 被引量：301H指数：8
- 供职机构：山东省滨州畜牧兽医研究院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学化学工程更多>>
- 伪狂犬病病毒疫苗株SA738侵染BHK-21细胞诱导其凋亡及Caspase3表达情况分析被引量：2
- 2017年
- 旨在深入了解猪伪狂犬病病毒疫苗株PRV SA738侵染BHK-21细胞后,诱导细胞凋亡,细胞凋亡的时间及相关细胞凋亡因子表达情况。通过测定传统疫苗毒株Bartha-K61株和实验室人工筛选的gI-/gE-/PRV SA738病毒株滴度,分别利用2株疫苗毒株侵染BHK-21,采用原位双荧光染色法检测细胞凋亡,用分光光度法测定细胞凋亡因子Caspase-3表达情况。结果表明,低剂量gI-/gE-/PRV SA738疫苗毒株和Bartha-K61疫苗毒株均延迟侵染细胞的凋亡。缺失疫苗毒株gI-/gE-/PRV SA738延迟侵染细胞的凋亡时间比Bartha-K61疫苗毒株时间长,但侵染细胞增殖速度下降。细胞凋亡后期最终细胞死亡,正常细胞细胞死亡后无凋亡小体。gI-/gE-/PRV SA738疫苗毒株和Bartha-K61疫苗毒株侵染细胞凋亡后期凋亡小体形成,并检测到膜结构。在病毒侵染早期细胞内关键凋亡细胞因子Caspase3表现为上调。Caspase-3参与了病毒侵染过程中细胞凋亡的调控。
- 郭广君吕素芳魏凤魏凤李峰肖跃强李峰
- 关键词：伪狂犬病病毒
- 基于US区缺失位点猪伪狂犬病病毒疫苗株与野毒株鉴别诊断方法的建立
- 2011年
- 依据GenBank中公布的猪伪狂犬病病毒全基因组序列,针对gI、gE、28K、TK四个基因序列,设计、合成了5条引物,并对野毒株SA株、gI-/gE-/PRVSA双基因缺失株和Bartha K61疫苗株进行了扩增,得到2061bp、1323bp、801bp和963bp特异性目的条带,其中BarthaK61疫苗株基因组检测最小浓度为136pg/μL。建立了针对野毒株和两种疫苗株的鉴别诊断方法。
- 郭广君吕素芳沈志强丁壮张松林肖跃强毕研丽魏凤
- 关键词：猪伪狂犬病病毒
- 细胞凋亡体外检测方法的研究进展被引量：2
- 2015年
- 细胞凋亡贯穿于生物体生命活动的全部过程,在生命活动中具有重要的地位,是生命科学领域研究的热点。目前,用于检测细胞凋亡的方法很多。为了准确、快速地检测细胞凋亡,文章在介绍细胞凋亡的形态变化和生化特征、刺激细胞凋亡发生机制的基础上重点综述了常用的细胞凋亡的体外检测方法。
- 魏凤郭广君吕素芳肖跃强张文通管宇王金良沈志强
- 关键词：细胞凋亡体外
- PKR基因表达高效阻断Marc-145细胞系建立及其对PRRSV增殖的影响被引量：1
- 2022年
- 研究猪繁殖与呼吸障碍综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)在Marc-145细胞蛋白激酶R(interferon-induced,double-stranded RNA-activated kinase,PKR)下调表达状态下的感染特性。以Macr-145细胞PKR基因序列设计3个shRNA,并设阳性对照,合成后插入pSilencer^(TM)2.1-U6载体构建重组质粒,与Macr-145细胞PKR+EGFP标签融合表达的重组质粒共转染HEK293细胞,以筛选能下调表达PKR的shRNA,并将该shRNA重组质粒转染Marc-145细胞,潮霉素B抗性筛选并克隆纯化获得PKR下调表达的细胞系,感染重组病毒PRRSV XZ06a-EGFP,通过检测病毒结构蛋白M与EGFP表达、观察细胞病变等,研究此状态下感染特性。结果显示筛选获得致使PKR下调表达的shRNA,以及稳定表达shRNA、PKR表达降低90%以上的Marc-145细胞系,重组病毒感染后48h,M蛋白与EGFP表达均受到抑制,且与对照相比,感染后72~96 h,未观察到典型的细胞病变效应,说明在PKR表达受到抑制时,病毒增殖受到明显抑制。本研究通过建立PKR下调表达细胞系与PRRSV感染试验,初步阐明PKR在PRRSV增殖时所发挥的作用,为进一步开展PRRSV与细胞抗病毒固有免疫互作机制研究莫定了基础。
- 肖跃强杨慧于雪王文秀孙培姣魏凤唐娜沈志强
- 关键词：MARC-145细胞PRRSV
- 大肠杆菌菌毛抗原K99与耐热肠毒素STⅠ融合基因的克隆与核苷酸序列测定
- 2007年
- 采用PCR技术,从大肠杆菌K99中扩增出0.54kb的K99菌毛抗原基因,然后将其克隆到pUCm-T载体上,用BglⅡ鉴定K99插入的方向并测序。选择目的基因片段插入方向正确的重组质粒经BamHⅠ和SalⅠ双酶切后,通过T4连接酶与同样经BamHⅠ和SalⅠ双酶切合成的耐热肠毒素STⅠ核苷酸序列连接,通过PCR方法鉴定分析和核苷酸序列测序分析,证明插入的K99-STⅠ融合基因片段具有正确的核苷酸序列。
- 李书光沈志强单虎管宇肖跃强王金良南松剑刘吉山
- 关键词：融合基因
- 一株鸭星状病毒的分离鉴定被引量：5
- 2016年
- 为对发病鸭场找到致病原,并对病原分离鉴定,丰富病原分子流行病学以及为新型诊断试剂和疫苗的研究奠定基础。通过对发病鸭场病鸭临床症状和病理变化观察,鸭胚传代分离培养及一步RT-PCR检测和扩增序列比对分析,最终确定该鸭场发生鸭病毒性肝炎,病原为鸭星状病毒。鸭星状病毒感染导致鸭肝炎的报道不多,但确是导致鸭肝炎的病原之一,应该引起对该病毒的重视。
- 刘吉山李娇祖立闯肖跃强沈志强柳增善
- 关键词：鸭病毒性肝炎
- RT-PCR检测兔出血症病毒方法的建立及应用
- 【目的】建立能快速、特异、敏感的检测并临床应用的兔出血热病毒RT-PCR方法。【方法】根据GenBaank公布的RHDV序列,设计了3条引物,对引物组合进行了筛选,优化PCR体系各反应条件,测定该方法的敏感性与特异性,并...
- 肖跃强刘吉山杨慧沈志强
- 关键词：RHDVRT-PCR引物筛选
- 文献传递
- 兔出血症病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：7
- 2013年
- 为建立一种敏感、特异、简便的兔出血症病毒(RHDV)检测方法,根据GenBank中公布的RHDV全基因组序列保守区域设计了2对引物,筛选了其中1对建立并优化了PCR条件,扩增产物为331bp,并基于此建立了SYBR GreenⅠ荧光染料real-time RT-PCR检测方法。通过敏感性、特异性、标准曲线建立等表明,该方法可检出101以上拷贝数的模板,只在RHDV有特异性扩增,标准曲线线性相关性好。实际应用结果显示,该方法对疑似RHDV病料检测的阳性率为74.8%,而普通RT-PCR方法检测的阳性率为65.5%。该方法的建立为开展该病的诊断、疫苗制备质控等提供了有效的技术保障。
- 肖跃强谢金文徐二丹沈志强丁壮
- 关键词：兔出血症病毒实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应
- 狂犬病病毒糖蛋白重组犬2型腺病毒的构建
- 本试验以犬2型腺病毒全基因组重组质粒pPolyⅡ-CAV-2及其E3区重组质粒pVAX-E3为基础,通过DraⅢ和Ssp Ⅰ双酶切,缺失25097bp-26141bp共1044bpE3区片段,按与编码链相同转录方向插入由...
- 张守峰扈荣良肖跃强田向阳夏咸柱
- 关键词：狂犬病病毒糖蛋白犬2型腺病毒重组病毒
- 文献传递
- 犬瘟热病毒RT-PCR检测方法的建立被引量：4
- 2006年
- 根据GenBank上发表的犬瘟热病毒融合蛋白F基因序列,设计合成了1对寡聚核苷酸引物,扩增大小为337bp的目的片段,建立犬瘟热病毒F基因的RT-PCR检测方法。结果表明,该方法具有很强的特异性和很高的敏感性,可作为犬瘟热临床快速诊断的一种方法。
- 王金良沈志强管宇肖跃强赵元楷
- 关键词：犬瘟热病毒反转录-聚合酶链式反应
