王琼
- 作品数：15 被引量：99H指数：7
- 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生生物学理学更多>>
- SEM单克隆抗体的制备方法及应用
- 本发明涉及SEM单克隆抗体的制备方法及应用，包括以下步骤：以重组SEM免疫BALB/c小鼠，再用小鼠的脾细胞直接与骨髓瘤细胞融合，采用间接酶联免疫吸附法筛选产SEM单克隆抗体的优势杂交瘤细胞株，得到SEM单克隆抗体。通过...
- 唐俊妮赵燕英朱安妮汤承陈娟王琼
- 文献传递
- SEI单克隆抗体的制备方法及应用
- 本发明涉及SEI单克隆抗体的制备方法及应用，包括以下步骤：以重组SEI免疫BALB/c小鼠，再用小鼠的脾细胞直接与骨髓瘤细胞融合，采用间接酶联免疫吸附法筛选产SEI单克隆抗体的优势杂交瘤细胞株，得到SEI单克隆抗体。通过...
- 唐俊妮赵燕英朱安妮汤承陈娟王琼
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌肠毒素及移动基因元件研究进展被引量：11
- 2016年
- 金黄色葡萄球菌肠毒素是一种热源性的超抗原。食用被肠毒素污染的食物能够引起食物中毒,导致恶心、呕吐、腹痛有时伴随腹泻。本文综述了肠毒素的分类命名、理化性质、以及编码不同肠毒素的基因在移动基因元件中的存在情况。这些移动基因元件在金黄色葡萄球菌毒力传播和进化过程中起着至关重要的作用,了解它们对于金黄色葡萄球菌流行病学溯源以及理解毒力机制具有一定的指导意义。
- 王琼唐俊妮
- 关键词：金黄色葡萄球菌葡萄球菌肠毒素理化性质
- 一种采用微波炉加热快速提取细菌DNA用于PCR扩增的方法被引量：31
- 2015年
- 利用微波加热原理,探索一种快速、简单、高效提取细菌DNA用于常规PCR快速检测的方法.在微波炉额定功率800 W条件下分别对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特氏菌、副溶血弧菌、沙门氏菌以及志贺氏菌6种常见食源性病原菌进行微波处理,离心取上清,获取细菌DNA,将样本DNA进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳进行验证.并进一步采用微波加热方法针对6种病原菌最低检出浓度和混合提取6种病原菌DNA的PCR检测进行分析.6种病原菌在微波炉中加热40-130 s的上清DNA样本均能用于常规PCR扩增.针对检出浓度的分析表明,副溶血弧菌的最低检出浓度为103cfu/ml,金黄色葡萄球菌为104cfu/ml,肠出血性大肠杆菌为105cfu/ml,肠炎沙门氏菌和福氏志贺氏菌的最低检出浓度为106cfu/ml,针对单核细胞增生李斯特氏杆菌的的最低检出浓度为107cfu/ml.进行6种混合菌微波共提取时,其中5种病原菌的特异性基因都能扩出,并且条带很亮.该微波提取方法具有快速,简单,高效的特点,能满足大部分食源性病原菌的常规PCR检测需求,大大节约了时间和成本,具有广泛的适用性,为细菌快速分子检测提供了简便手段.
- 王琼唐俊妮汤承陈娟刘骥陈炼红
- 关键词：微波炉加热DNA提取PCR扩增
- 金黄色葡萄球菌新型肠毒素sek基因在3株食品分离菌株中的表达被引量：7
- 2016年
- 目的：肠毒素sek基因在临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株中较为流行,研究新型肠毒素sek基因的时序性表达可为食物中毒预防和疾病控制补充新的基础数据。方法：本研究针对实验室保存的食源性金黄色葡萄球菌菌株进行21种肠毒素基因检测,筛选出3株含sek基因的菌株SA005、SA008和SAB0,针对3株菌株进行生长曲线测定,随后在培养不同时间段收集菌体提取RNA,利用实时荧光定量聚合酶链式反应（real time-polymerase chain reaction,real time-PCR）检测肠毒素sek基因在12~120 h的相对表达水平。结果：基因检测结果显示,菌株SA005含有16S、nuc、mec A、seb、sec、sek、sex基因,SA008含有16S、nuc、mec A、sea、sek、sex基因,SAB0含有16S、nuc、sek、sex基因。3株菌株在胰酪胨大豆肉汤培养基中的生长曲线趋势较相似,18 h左右出现折点,之后细菌进入生长稳定期。3株菌株的sek基因在12~120 h全程表达,SA005的sek基因在48 h时相对表达量最高,在84 h相对表达量最低;SA008在24 h时的相对表达量最高,在48 h相对表达量最低,在60~120 h表达量相对比较稳定;SAB0在12~120 h之间相对表达量呈现抛物线趋势,在60 h和72 h的表达量相对较高且差异不显著（P〉0.05）。结论：3株菌株sek表达水平存在明显差异,相同菌株sek基因不同时间点表达也存在差异性,菌株基因背景的影响可能是造成sek基因表达差异性的关键。
- 王琼唐俊妮汤承陈娟刘骥蔡自建
- 关键词：金黄色葡萄球菌时序性表达
- 洋葱汁对五种常见食源性病原细菌抑菌效果研究被引量：13
- 2015年
- 探讨两种不同颜色(紫皮洋葱和白皮洋葱)的生洋葱汁对五种常见食源性病原细菌(金黄色葡萄球菌、单增李斯特氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌和大肠杆菌)的抑菌效果.通过制备两种不同颜色的生洋葱汁,首先采用顶空取样并结合GC-MS分析两种不同生洋葱汁的主要挥发性成分,随后采用液体培养和平板抑菌试验研究两种不同颜色的洋葱汁对五种食源性病原菌的抑菌效果.GC-MS的结果分析表明含硫化合物是洋葱原汁中的主要挥发性成分,达34种,硫醚类化合物占12种.液体培养试验表明两种不同品种的洋葱原汁对五种常见的食源性病原菌均具有一定的抑菌效果,在细菌生长早期(4-6 h)抑菌效果较明显,随着培养时间的延长,抑菌效果逐渐减弱(10-12 h).抑菌效果强弱与洋葱原汁浓度呈正相关.平板抑菌试验表明洋葱原汁对金黄色葡萄球菌和志贺氏菌有很强的抑菌效果,总的来说紫色洋葱汁的抑菌效果较好些.我们的研究结果表明生洋葱汁对常见的食源性病原细菌有一定的抑菌效果,为食品保鲜和食品保健等方面均有一定的指导意义.
- 唐俊妮王琼韦吉敏史辉汤承陈娟刘骥
- 关键词：洋葱汁挥发性物质食源性病原菌抑菌活性
- 针对不同来源金黄色葡萄球菌分离菌株的agr Ⅰ-Ⅳ分型初探被引量：7
- 2014年
- 目的:金黄色葡萄球菌附属基因调节子(agr)位点是一个全面的群集感应系统并且控制着毒力因子的产生,本研究旨在针对不同来源的金黄色葡萄球菌分离菌株进行agr Ⅰ-Ⅳ基因分型研究.方法:根据金黄色葡萄球菌agrⅠ-Ⅳ基因组别类型的引物,对五种不同来源的169株金黄色葡萄球菌DNA模板进行多重PCR扩增,获得目的基因,以判断agr基因型.结果:169株分离菌株中,agrⅡ型的检出率为19%(32/169),agrⅢ型检出率为12%(20/169),agrⅣ型检出率为8%(14/169),五种不同来源的金黄色葡萄球菌均有检出agrⅡ型,均未检出agrⅠ型,并且都含有未能分型的agr阴性菌株.研究结果表明不同来源金黄色葡萄球菌分离菌株中agr Ⅰ-Ⅳ基因型的流行情况.该方法对于金黄色葡萄球菌菌株分子分型有一定的借鉴意义,也为金黄色葡萄球菌菌株分子流行病学调查奠定一定的基础.
- 王琼唐俊妮汤承陈娟刘骥
- 关键词：金黄色葡萄球菌分离菌株
- 金黄色葡萄球菌在猪肉上的生长以及新型肠毒素基因sek的表达被引量：2
- 2016年
- 目的：研究金黄色葡萄球菌在猪肉上的生长以及新型肠毒素sek的时序性表达。方法：将实验室保存的三株携带sek基因的金黄色葡萄球菌SA005、SA008和SAB0分别接种于无菌猪肉上37℃静置培养至120 h,每隔12 h取样进行细菌计数以及p H测定,同时收集不同时间点的菌体提取RNA,利用实时荧光定量PCR监测细菌生长过程中sek的相对表达量。结果：三株菌株在猪肉上生长36 h以后进入稳定期,48 h肉上已经出现肉眼可见的金黄色葡萄球菌菌体聚集,120 h肉粒变得粘稠并有黏液渗出;猪肉p H在细菌生长的36 h前变化不大,在120 h已逐渐上升到p H8.85-9.14;三株金黄色葡萄球菌sek的表达量在细菌生长的对数期有一次高表达,随后表达量下降,在生长的稳定后期表达量再次升高,其中,SA005的sek基因在细菌的生长过程中表达量明显高于SA008和SAB0（p〈0.01）。结论：三株金黄色葡萄球菌在猪肉上生长,肠毒素sek基因持续表达但相对表达量因菌株而存在差异,sek基因在转录水平上的高表达将会带来食品安全的潜在威胁。
- 王琼张荣陈娟龙虎唐俊妮
- 关键词：金黄色葡萄球菌猪肉荧光实时定量PCR时序性表达
- 一种鉴定牦牛肉真伪的检测方法
- 本发明公开了一种鉴定牦牛肉真伪的检测方法，本发明的引物是针对牦牛物种的特异性基因序列进行设计，扩增片段长度1003bp，而其它肉品不能扩增出该片段。通过采用DNA？提取，PCR扩增，电泳检测和结果鉴定几个步骤即可进行牦牛...
- 唐俊妮汤承陈娟刘骥蔡自建王琼许瑞云倪赛巧李爽
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- 一种检测金黄色葡萄球菌新型肠毒素I的双抗夹心法
- 本发明公开了一种检测金黄色葡萄球菌新型肠毒素I（SEI）的双抗夹心法。本发明包括（1）用包被抗体包被酶标板，洗板，用于洗去未与酶标板结合的包被抗体，该包被抗体为SEI单克隆抗体；（2）加入封闭液对酶标板上多余结合位点进行...
- 唐俊妮朱安妮赵燕英汤承陈娟王琼
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